头穴透刺对运动性疲劳大鼠下丘脑TPH、MAO-A的影响

张 淼，李虹霖，徐 飞

(1.黑龙江中医药大学附属第二医院，黑龙江 哈尔滨 150001；2.黑龙江省医院 康复科，黑龙江 哈尔滨 150036)

运动性疲劳是机体各种复杂内在变化的一种综合外在表现，是机体在长时间的运动后，其生理现象在运动过程中表现为机体运动能力下降，使其运动能力不能持续在特定的运动水平和/或预定的运动强度。对运动性疲劳防治的研究是运动医学关注的热点和焦点。大量研究[1-2]显示，中医药对运动性疲劳有良好的防治前景。本组研究采用针刺预处理方法，观察头穴透刺对运动性疲劳的防治作用。

1 材料与方法

1.1 实验动物 取8周龄健康Wistar大鼠48只,雌雄各半，体质量(200±10) g。由黑龙江中医药大学实验动物中心提供，大鼠质量合格证书编号：SCXK(黑)2008004。

1.2 试剂与仪器 试剂主要有TPH抗体和MAO抗体均购自于millipore公司，荧光定量Realtime PCR试剂盒、逆转录试剂盒均购自于takara公司产品。主要仪器有电子天平(赛多科斯，万分之一)、水浴锅、游泳箱(55 cm×55 cm×40 cm)、秒表。

1.3 实验方法

1.3.1 动物分组 将48只大鼠随机分为4组，每组12只，分别为空白对照组、模型组、头穴透刺组和传统针刺组。

1.3.2 造模方法 模型组和治疗组方法参见文献[3-4]建立疲劳力竭模型。空白对照组适应性训练1周，正常饲养。

1.3.3 治疗方法 头穴透刺组和传统针刺组大鼠每天在针刺预处理1 h后进行造模。每只大鼠针刺前束缚固定，参照中国针灸学会实验针灸研究会制定的《动物针灸穴位图谱》选穴。头穴透刺组:针刺双侧百会透太阳、双侧足三里、肾俞、关元，留针15 min，出针1 h后进行造模。传统针刺组:针刺双侧足三里、肾俞、关元，留针15 min,出针1 h后进行造模。空白对照组：正常饲养不给予任何处置。模型组：正常造模，造模前后均不给予任何治疗。共进行4周的游泳大鼠模型训练，每周游6 d。第1周每天游30 min，每周递增30 min。

1.4 观察指标

1.4.1 一般状况 观察造模后各组大鼠的精神状态、体毛、体质量、大小便及活动情况等。

1.4.2 力竭游泳实验 第4周末进行力竭性游泳，记录游泳时间，力竭标准以大鼠游泳的协调动作消失，水淹没鼻尖，身体下沉，至再次浮出水面的时间超过10 s,并连续3次者。

1.4.3 标本采集及荧光定量逆转录聚合酶链反应 用1%戊巴比妥钠(40 mg/kg)腹腔注射麻醉，麻醉满意后固定于鼠板上，用含4%多聚甲醛缓冲液灌注固定取下丘脑。参照文献[5]提取RNA。逆转录参照试剂盒说明书进行操作。荧光定量聚合酶链反应参照试剂盒说明书进行操作。

2 结果

2.1 一般情况 造模后，各模型组大鼠的饲料、饮水量均有所减少，体毛干枯，体质量缓慢增长，活动减少，眼裂变小，眯眼明显，精神萎靡，反应迟钝。

2.2 各组力竭时间结果比较 见表1。

表1 各组力竭时间结果比较(±s,n=12)

2.3 对各组下丘脑组织中TPH、MAO-AmRNA表达的影响 见表2。

表2 对各组下丘脑组织中TPH、MAO-AmRNA表达的影响(±s,n=12)

3 讨论

运动性疲劳是机体运动进行到一定阶段必然出现的生理功能变化。本实验采用目前国内外有关疲劳的研究比较公认的成熟的动物模型——大鼠游泳疲劳模型。大鼠随着游泳天数的增加神情倦怠，皮毛蓬乱枯槁，食欲减退，体质量不增或略有降低，双眼暗淡无光，对外界刺激反应迟钝等疲劳症状,提示运动性疲劳模型建立成功。研究[6-8]显示,5-羟色胺在运动性疲劳中起着重要作用，是运动性疲劳的重要递质之一。MAO主要存在于线粒体内，5-羟色胺的主要代谢途径是在MAO作用下氧化脱胺，在适宜的条件下，通过MAO-A酶代谢生成5-HIAA。TPH是芳香族氨基酸羟化酶家族的一员，被认为是5-羟色胺合成的关键酶，其活性是5-羟色胺合成的前提，能催化L-色氨酸转化为5-羟色胺，并影响着5-羟色胺的代谢功能。

中医药在扶正补虚，提高运动能力，调节机体免疫功能，延缓疲劳等方面积累了大量经验[9-10]。运动性疲劳属中医“虚证”范畴。针刺具有疏通经络,激发正气，改善血液循环，抗脂质过氧化，清除自由基，调节免疫功能，纠正代谢紊乱，纠正运动性神经—内分泌—免疫调节紊乱等作用。研究发现，头穴透刺能降低大鼠下丘脑组织中TPH mRNA表达，增强MAO-A mRNA表达，其抗运动性疲劳机制可能与此有关。

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