富硒板党酒对衰老大鼠睾丸的影响*

谭文波，袁德培，杨付明

（湖北民族学院医学院，湖北恩施445000）

富硒板党酒是以优质白酒和全国地理标志产品-富硒板党为主料，辅以枸杞、肉桂、蜂蜜、一级冰糖精制而成，具有补中益气、强身壮体、健心养颜、滋阴壮阳，促进人体新陈代谢，增强肌体免疫力，防癌抗癌之功能。现代药理学研究证明板党具有明确的抗氧化抗衰老作用［1］，而硒有促进男性生殖和延年益寿之功效［2］。目前有关富硒板党酒抗衰老与促生殖的研究尚无报道，为此，本文通过观察富硒板党酒对衰老大鼠睾丸结构和机能代谢的影响，来探讨其保健养生功能。

1 材料与方法

1.1 药品与试剂

富硒板党酒（恩施本草药业有限公司），大鼠睾酮、SOD、GSH-Px、MDA ELISA试剂盒（上海丰翔生物科技有限公司）。

1.2 主要仪器

UV-2450分光光度仪，GL-20GII型高速低温离心机，Multikan MK3酶标仪，DW40-120低温冰箱，Neusoft-770SS显微镜，BS224S电子分析天平，HFJ-10内切式匀浆机。

1.3 动物分组及给药

5月龄健康清洁级Wistar雄性大鼠30只，体重280～320 g（华中科技大学同济医学院动物中心）。随机分为3组（n＝10）：对照组、模型组和实验组。模型组和实验组按0.025 ml／g颈背皮下注射5%D-半乳糖生理盐水溶液，对照组颈背皮下注射等量生理盐水，同时实验组按5 ml／kg灌服富硒板党酒，对照组和模型组灌服等量生理盐水，每日1次，连续给药42 d。

1.4 血清睾酮及睾丸指数的检测

末次给药2 h后，将各组大鼠称重，摘眼球取血约1 ml，高速低温离心机以3 200 r／min离心4 min，取血清按试剂盒说明书检测血清睾酮（testosterone，T）的含量。采血后脱颈椎处死，取双侧睾丸称重，计算睾丸指数，即睾丸指数（mg／g）＝睾丸质量（mg）／鼠体质量（g）。

1.5 睾丸组织SOD、GSH-Px、MDA含量的检测

取右侧睾丸置于冰冷的生理盐水中漂洗，去血，拭干，称重，放人匀浆器中，加入9倍于其重量的冷生理盐水进行匀浆（匀浆时间每次 10 s，间隙30 s，连续5～6次，均在冰水中进行）。将制备好的10%的组织匀浆以3 000 r／min离心10～15min，取适量离心好的匀浆上清液按试剂盒说明测定睾丸组织超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）的含量。

1.6 睾丸组织学观察

取左侧睾丸置10%中性甲醛溶液中固定24 h后，梯度酒精脱水，石蜡包埋，冠状切面制备5μm厚的石蜡切片，HE染色，光镜观察。

1.7 统计学方法

2 结果

2.1 富硒板党酒对各组大鼠睾丸指数和血清T含量的影响

与对照组比，模型组大鼠睾丸指数和血清T含量显著下降（P＜0.01）；与模型组比，实验组大鼠睾丸指数和血清T含量明显增加 （P＜0.01，表 1）。

Tab.1 Effect of rich selenium-banqiao-codonopsis pilosula wine on testis index and the content of T in serum of each group rats（±s，n＝10）

Tab.1 Effect of rich selenium-banqiao-codonopsis pilosula wine on testis index and the content of T in serum of each group rats（±s，n＝10）

T：Testosterone**P＜0.01 vs control group；＃＃P＜0.01 vs model group

Group Testis index（mg／g） T（ng／L）Control 7.64±0.51 0.50±0.08 Model 4.36±0.48** 0.30±0.06**Test 6.14±0.57＃＃ 0.47±0.07＃＃

2.2 富硒板党酒对各组大鼠睾丸组织SOD、GSH-Px、MDA含量的影响

与对照组比，模型组大鼠睾丸组织SOD和GSH-Px含量显著下降，MDA含量明显增加（P＜0.01）；与模型组比，实验组大鼠睾丸组织SOD、GSH-Px含量明显增加，MDA含量明显下降 （P＜0.01，表 2）。

Tab.2 Effect of rich selenium-banqiao-codonopsis pilosula wine on the content of SOD，GSH-Px and MDA in each group rats testicular tissue（±s，n＝10）

Tab.2 Effect of rich selenium-banqiao-codonopsis pilosula wine on the content of SOD，GSH-Px and MDA in each group rats testicular tissue（±s，n＝10）

SOD：Superoxide dismutase；GSH-Px：Glutathione peroxidase；MDA：Malondialdehyde**P＜0.01 vs control group；＃＃P＜0.01 vs model group

Group SOD（U／g） GSH-Px（nmol／g） MDA（nmol／g ）Control 196.23±6.07 170.58±7.24 6.74±1.26 Model 127.95±4.86**129.87±7.15**11.39±1.87**Test 170.72±5.61＃＃159.52±8.48＃＃ 7.85±1.72＃＃

2.3 富硒板党酒对各组大鼠睾丸组织形态结构的影响

对照组大鼠睾丸生精小管圆而饱满，管壁各级生精细胞及支持细胞分层排列有序，管腔中无脱落细胞，可见大量成熟精子，间质细胞成群排列在生精小管间隙（图1A）；模型组大鼠睾丸生精小管管径大小不一，管壁细胞层数减少排列紊乱，部分管腔阻塞或塌陷，可见脱落细胞，成熟精子数量明显减少，间质细胞轮廓不清（图1B）；实验组生精小管基膜基本完整，管壁增厚变圆，可见各个发育阶段的生精细胞和支持细胞，管腔中无脱落细胞，有较多成熟精子，间质细胞成群分布于生精小管之间的疏松结缔组织内（图1C）。

Fig.1 Effects of rich selenium-banqiao-codonopsis pilosula wine on testicular tissuemorphological change of each group（HE×400）

3 讨论

神经内分泌衰老学说认为：下丘脑-腺垂体-性腺轴功能衰退是人类衰老的主要环节，人类的衰老与性腺结构和功能的退化密切相关。男性从50岁开始，睾丸组织生精细胞、支持细胞、间质细胞就开始出现退行性变，引起这一改变的主要原因是脂质过氧化反应［3］。艾明仙等研究证明，富硒板党能提高血浆和组织抗氧化酶系的活性，减少脂质过氧化反应终产物MAD的产生［4］。药物化学研究证实富硒板党含硒量高达0.28 mg／kg，硒作为谷胱甘肽过氧化酶的基本组成部分，有促进体内过氧化物分解，维持细胞正常形态结构与功能的作用［5］。

本研究发现，D-半乳糖导致大鼠睾丸组织抗氧化酶SOD和GSH-Px含量显著下降，细胞膜发生脂质过氧化损伤，MDA含量明显增加，使生物大分子交联聚合，引起生精细胞、支持细胞和间质细胞变性、坏死，细胞数量减少，结构破坏，排列紊乱，产生精子和分泌睾酮能力下降，最终睾丸出现萎缩 ，睾丸指数明显下降。而富硒板党酒显著改善衰老大鼠睾丸组织SOD和GSH-Px的活性，减少自由基对细胞膜及生物大分子的攻击，使MDA产生减少，细胞毒性作用减弱，从而维护细胞的结构与功能，延缓睾丸的萎缩。因此，富硒板党酒能延缓睾丸退变，维持生殖功能，提高生活质量。

［1］ 黄丽亚，张 宏，余 洁.板党对冈田酸致大鼠阿尔茨海默病抗氧化作用［J］.中国公共卫生，2008，24（9）：1105-1106.

［2］ 尉俊仁，冯 佩，章子贵.硒对氟致大鼠睾丸与附睾中某些酶活性变化的影响［J］.毒理学杂志，2012，26（1）：4-8.

［3］ 黄和贤，曹文富，彭 爽，等.延衰合剂对D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠睾丸及血清睾酮的影响［J］.中国老年学杂志，2011，31（12）：2239-2241.

［4］ 艾明仙，黄丽亚.富硒板党对大鼠学习记忆及抗氧化酶影响［J］.中国公共卫生，2007，23（6）：736-737.

［5］ 郭贵华，杨 丽，沈振华，等.硒对砷染毒致雄性大鼠生殖损害的拮抗作用［J］.咸宁学院学报（医学版），2008，22（6）：461-464.