中医药逆转肺癌耐药的研究进展

赵秀芳，于 航综述，侯毅鞠审校 (吉林医药学院药学院:.2008级医学检验本科班，2.血检教研室，吉林 吉林 3203)

肺癌是严重影响人类生存的恶性肿瘤之一，据世界卫生组织报道，目前肺癌的死亡率已经居全球恶性肿瘤之首［1］。现阶段肺癌的治疗主要依靠药物和手术治疗两方面，其中化疗较为常见。但多药耐药(MDR)严重影响着化疗的效果［2］，肺癌细胞的MDR的产生，主要由细胞的膜转运蛋白和相关靶酶异常，以及凋亡途径改变等引起。许多学者通过中药单味成分、中药复方和中西联合治疗对肺癌耐药性进行逆转。现就其相关实验研究作综述如下。

1 单味中药成分

汉防己甲素是由中药汉防己中提取的生物碱，其主治功能有消炎、解热、镇痛、肌肉松弛、扩张血管等。临床研究其对多种肿瘤有抑制作用，徐萌［3］等人通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞术和碘化丙啶染色研究了汉防己甲素对肺癌耐阿霉素细胞株的作用，结果MTT显示汉防己甲素作用后耐药细胞的耐药指数由5.43降至1.89。通过比较药物作用前后耐药细胞MRP蛋白表达，耐药细胞MRP蛋白表达率(%)为60.25 ±8.71，经汉防己甲素作用后的细胞MRP蛋白表达降至32.21±4.79。染色发现经汉防己甲素作用后的耐药细胞的凋亡(%)由13.37±2.65升至76.08 ±12.26，细胞凋亡明显增加，达到了逆转耐药的效果。

农丽等人［4］通过从吴茱萸中提取的主要生物碱——吴茱萸碱(EV)作用于顺铂(DDP)耐药细胞株，吴茱萸碱具有细胞损伤、抗菌、镇痛、抗侵染、抗病理转移的作用。利用MTT检测计算逆转倍数，EV浓度0.125 mg/L、0.25 mg/L 对经 DDP 诱导耐药的A549细胞(A549/DDP)逆转倍数分别为3.67和11.48。流式细胞术检测细胞凋亡(%)，由18.90±4.69 增加至 22.70 ±0.50。而反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组 MDR1、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)等mRNA的表达，电泳后条带分析MDR1、Bcl-2等均有下调。综合数据表明吴茱萸碱对肺癌耐药细胞的逆转作用显著，且呈剂量依赖性。

薏苡仁(康莱特)［5］在临床肿瘤治疗中应用广泛，具有益气养阴，消癖散结之功效。学者通过不同剂量的薏苡仁注射液对A549/DDP细胞的抑制作用作了研究［6］，以磺酰罗丹明(SRB)染色反应药物作用后对细胞的抑制率，随着药物浓度增加，测得其吸光度(OD)值明显降低，以OD值代表抑制程度，其抑制明显增加，计算数据有统计学意义。利用RT-PCR检测MDR1、Bcl-2、生存素(Survivin)等 mRNA的表达，蛋白质印记(Western blot)测定P-糖蛋白(P-gp)、Bcl-2、Survivin蛋白表达量，电泳条带分析后表达量均有所降低。

2 复方中药

我国古代就有“温以散寒，下以除滞”之理，温下方(附子、大黄、人参、当归)［7］具有使寒邪祛、阳气复的功效。季旭明［8］等人将温下方灌胃大鼠得到含药血清，以不同药物浓度的血清孵育通过诱导得到的A549/DDP细胞，通过检测耐药细胞内的谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽转移酶-π(GST-π)和 DDP 的含量反应温下方对耐药细胞的逆转耐药的作用。免疫荧光细胞化学法检测GST-π的活性，结果药物剂量组的荧光强度明显弱于对照组，即经温下方作用后的耐药细胞内GST-π的酶活性降低，抑制了细胞的耐药性。流式细胞术检测细胞顺铂含量，药物剂量组的荧光强度明显增强，说明细胞内顺铂药物含量增加明显，达到了逆转耐药的目的。

消岩汤(人参 30 g、白术 60 g、黄耆 30 g、当归30 g、忍冬藤30 g、茜草根 6 g、白芥子 6 g、茯苓 9 g)具有“解毒祛瘀，扶正抗癌”的功效，张莹［9］等人利用MTT法分别检测了不同剂量的消岩汤对敏感的A549细胞和A549/DDP细胞的杀伤作用，高、低剂量组的耐药逆转倍数分别为1.78和1.57，计算有统计学意义，起到了逆转耐药的作用。

益气养肺方是由太子参、玉竹、北沙参、北芪、麦冬、五指毛桃、田七、白花蛇舌草、防己、生甘草组成［10］，以其滋阴养肺、祛痰化湿为主要功效而应用广泛。学者将其作用于具有MRP表型的A549耐药细胞［11］，通过MTT、流式细胞术、共聚焦显微镜和酶标法检测其对耐药细胞的作用，MTT结果细胞抑制率(%)有4.23 ±0.72 升至 18.62 ±2.95，细胞毒作用明显增强。流式细胞术检测MRP表达量(%)由73.2 ±9.4 下降至 27.6 ±4.8，耐药蛋白表达量显著降低。此外还通过检测线粒体膜电位和Ca2+水平以及Caspase-3、Caspase-8活性，探讨了其逆转耐药的机制，可能与诱导细胞凋亡有关。

3 中西药联合应用

猫人参［12］又名猫气藤、沙梨藤，属于一种中草药，原属于猕猴桃科猕猴桃属，植物镊合猕猴桃的根，其临床功效为清热解毒。国内外学者曾用其研究对不同肿瘤的抑制作用，有一定的效果。洪禹霖等［13］将猫人参灌胃大鼠获得不同药物浓度的大鼠血清，联合DDP作用于A549/DDP，通过MTT法对比检测单独使用DDP、单独使用猫人参和猫人参联合DDP分别对A549和A549/DDP细胞的抑制作用，结果单独使用DDP和猫人参对A549的杀伤作用很弱，而不同浓度猫人参大、中、小剂量联合DDP后使细胞杀伤作用分别提高 1.33、1.17、1.05 倍，具有显著的逆转耐药作用，且实验数据显示呈现剂量依赖性。

林胜友［14］等人以中药制剂参麦注射液(主要为红参和麦冬)与三苯氧胺及硝苯吡啶联合应用于70例MDR1表达阳性的非小细胞肺癌患者，以WHO的评价作为标准，观察疗效为总有效率46.9%，高于对照组(23.7%)，且差异显著，其中完全缓解者2例，部分缓解者13例，结果具有统计学意义。

4 展望

肺癌是全球高发的恶性肿瘤之一，虽有很多化疗药物应用于临床，但其耐药性一直困扰着临床医生与患者。中国古代医学认为肺癌是正伤肺虚，邪毒内蕴。近年来中医药治疗肺癌的耐药性已有很大的疗效，很多学者研究表明［15］，多种中药单体成分和复方有抗癌的作用，而中药成分与临床常用化疗药物(如DDP、阿霉素)联合应用逆转肺癌的耐药性，已经在科研项目中日渐增多，其逆转耐药的机制也在不断的研究中［16］。更多中药联合化疗药物应用于临床的研究，将成为日后研究的重点。

［1］Tonanr M，Carvalho E C.Cancer risk and preventive behavior:persuasion as an intervention strategy［J］.Rev Lat Am Enfenmagem，2008，16(5):864-870.

［2］Li X Q，Li J，Shi S B，et al.Expression of MRP1，BCRP，LRP and ERCC1 as prognostic factors in non-small cell lung cancer patients receiving postoperative cisplatin-based chemotherapy［J］.Int J Biol Markers，2009，24(4):230-237.

［3］徐 萌，周 蓓.汉防己甲素逆转肺癌化疗耐药和凋亡抗性的实验研究［J］.新中医，2006，38(6):59-62.

［4］农 丽，伍 钢，戴晓芳，等.吴茱萸碱逆转人肺癌细胞株A549/DDP耐药机理的实验研究［J］.临床肿瘤学杂志，2010，15(6):487-492.

［5］刘翠霞，周 坤，王亚珍，等.康莱特对人肺腺癌细胞A549增殖活性影响的实验研究［J］.时珍国医国药，2011，22(6):1437-1438.

［6］吕品田，萧 娟，周 坤，等.薏苡仁注射液对肺腺癌细胞多药耐药性逆转作用的机制研究［J］.中国全科医学，2010，13(26):2956-2958.

［7］吴智春，于华芸，季旭明，等.温下方联合顺铂对A549/DDP裸鼠移植瘤的抑制作用及对药物转运蛋白表达的影响［J］.中华临床医师杂志:电子版，2011，5(20):5884-5888.

［8］季旭明，江 涛，欧阳兵，等.温下方含药血清对肺腺癌耐药细胞内GSH、GST-π的影响［J］.山东中医药大学学报，2010，34(1):67-69.

［9］张 莹，贾英杰，杨 洁，等.消岩汤药物血清对A549/DDP多药耐药逆转作用的研究［J］.天津中医药，2010，27(4):334-336.

［10］李树君，王玉强，乔钦增，等.中药益气养肺方治疗中晚期非小细胞肺癌的临床研究［J］.中国药物与临床，2012，12(1):90-91.

［11］徐 萌，朱新海，盛良翮，等.益气养肺方干预肺癌化疗耐药的线粒体及半胱天冬酶机制［J］.中药材，2008，31(9):1396-1399.

［12］郑国银，辛海量，李 柏，等.Total saponin from root of Actinidia Valvata Dunn prevents the metastasis of human hepatocellular carcinoma cells［J］.Chin J Integr Med，2012，18(3):197-202.

［13］洪禹霖，魏 莉，熊一向.猫人参对人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP逆转作用的实验研究［J］.实用中西医结合临床，2010，10(6):87-88.

［14］林胜友，徐颖扉，吴良村，等.中西药联合应用对MDR-1表达阳性的非小细胞肺癌多药耐药逆转的意义［J］.中国中西医结合杂志，2002，22(9):712-713.

［15］李雪梅，荣 震.中药逆转肺癌治疗中的耐药性实验研究进展［J］.广西中医学院学报，2011，14(3):80-81.

［16］郭建辉.中医药治疗肺癌现状分析［J］.中医学报，2012，27(3):283-285.