UF1000尿沉渣全自动流式细胞仪误差研究

孟艳平 张生 曹兴华

UF1000尿沉渣全自动流式细胞仪误差研究

孟艳平 张生 曹兴华

目的比对UF-1000尿沉渣全自动流式细胞仪、尿11A干化学法、尿显微镜镜检法三种方法检测结果，总结影响因素。方法留取本院800例住院患者新鲜晨尿，同时用三种方法检测。结果UF-1000尿沉渣全自动流式细胞仪检测尿液红细胞、白细胞、管型方面均有误差。结论三种方法联合应用，降低检验误差，提高尿液检验质量。

UF-1000尿沉渣全自动流式细胞仪；尿11A干化学法；显微镜镜检法

随着医学检验技术的发展,尿沉渣自动分析技术逐渐推广。日本sysmex公司的UF-1000是采用流式细胞仪的工作原理,将一定量的尿液中各种有形成分用荧光染料染色后,进入流式通道,测定激光照射下各种有形成分的前向散射光强度、侧向散射光强度和脉冲幅度、荧光强度和荧光脉冲幅度和细胞电阻值的大小,由计算机根据特定分析软件区别和计算各种有形成分。该仪器使用起来快速、简便，具有很高的临床价值。但是,任何仪器都有它的局限性。在我们的临床工作中发现尿中的真菌、结晶、细菌等可能会影响UF-1000尿沉渣全自动流式细胞仪的检测结果。为排除其误、漏诊因素,提高尿沉渣检验的准确性。本文就尿检中使用UF-1000流式细胞仪、干化学法、显微镜法三种方法做一对比研究。现结果如下。

1 临床资料

1.1仪器和试剂 日本sysmex公司UF-1000流式细胞仪及其原装试剂，URIT-1500优利特干化学分析仪，优利特干化学试纸，Cχ21FS1光学显微镜。

1.2标本来源和方法 收集河南省漯河市中心医院患者新鲜中段晨尿800份，混匀后倒10 ml入洁净玻璃管，先在URIT1500优利特干化学分析仪上进行干化学分析，再在UF-1000流式细胞仪上进行尿沉渣自动分析，最后1500r/min离心5 min后弃去上清液做尿沉渣显微镜检查。

1.3判断标准 UF-1000流式细胞仪红细胞参考范围为0-25/μl,白细胞参考范围为0-25/μl，管型0-3/μl[1]；尿干化学阳性结果为异常，阴性结果为正常；尿沉渣镜镜检红细胞正常范围0-3/HP,白细胞正常范围0-5/HP，生理性管型偶见。超出正常范围的为阳性结果。

1.4统计学方法 对阳性结果进行χ2检验(P<0.05)为差异具有统计学意义。

2 结果

UF-1000流式细胞仪红细胞阳性例数126，阳性率15.8%，白细胞阳性例数192，阳性率24%，管型阳性率例数44，阳性率5.5%。干化学法红细胞阳性例数108，阳性率13.5%，白细胞阳性例数163，阳性率20.3%。显微镜法红细胞阳性例数94,阳性率11.8%，白细胞阳性例数154，阳性率19.2%。

3 结论

UF-1000流式细胞仪检测阳性率偏高，与干化学法和显微镜法进行χ2检验，(P<0.05)，提示差异有统计学意义。

4 讨论

4.1红细胞误差原因 UF-1000流式细胞仪与其他两种方法比较红细胞结果不符标本共26例，其中假阳性24例,假阴性2例.

4.1阳性 尿中有形成分是靠流式细胞仪的散射光和荧光区分的。尿液中成分复杂，其形态，大小，染色性只要与红细胞相似，都可能被仪器误认为红细胞。大致可分为以下几种：①菌尿。尿中含有大量细菌时(主要为球菌和链球菌)，仪器会将较大细菌误认为是红细胞而出现假阳性[2]。此时应结合干化学潜血试验和显微镜检查作出准确判断。在此研究中菌尿导致的假阳性标本共2例。②尿中含有类酵母菌时，仪器会将类酵母菌误认为是红细胞而做出假阳性结果[3]。此时应结合干化学潜血试验和显微镜检查。特别是插尿管的患者尿中易产生类酵母菌，有时干化学潜血阴性，但尿沉渣仪器检测到的红细胞数量非常多，所谓的红细胞大部分都是类酵母菌，对这种患者尽量要做尿显微镜检查。在这次试验中有6例假阳性结果就是由于患者尿中含大量酵母菌引起的。③尿中含有精子时,其大小形态与红细胞相似,荧光强度与散射光强度也与红细胞相似,常被尿沉渣分析仪误认为红细胞。在此研究中精子引起的红细胞假阳性共3例。④尿中含有结晶时，主要是草酸钙结晶和无定型盐结晶，草酸钙结晶形状多为球形或哑铃形,无定形盐常凝集成团,这些结晶形状类似红细胞,经常会被仪器误认为红细胞而使结果出现假阳性。尿中含有结晶时颜色比较浑浊,所以遇到浑浊尿时应尽量做显微镜检查作出准确判断。结晶尿引起的红细胞假阳性较高,在此研究中共占13例,所占比率为54%.

4.1.2假阴性 尿液中红细胞如果破碎或数量很少,所产生的荧光很弱,处于低荧光区, UF-1000流式细胞仪检测不到,结果就会为阴性,此时干化学隐血试验非常有效的弥补这一不足.

4.2白细胞误差原因 UF-1000流式细胞仪与其他两种方法比较白细胞结果不符标本共46例，其中假阳性38例,假阴性8例.

4.2.1假阳性 尿中含有小圆上皮细胞时，其形态大小与白细胞相似,尿沉渣仪器会将其误认为白细胞而出现假阳性结果，此时应结合干化学法及显微镜检查作出准确判断。在此研究中小圆上皮细胞引起的白细胞假阳性共30例。

4.2.2浑浊尿 尿中含非晶形结晶或大量细菌时,这些物质凝集成团,尿沉渣仪器会将其误认为白细胞而出现假阳性结果，在此研究中小圆上皮细胞引起的白细胞假阳性共18例。

4.2.3假阴性 干化学法检测白细胞是通过白细胞中的白细胞酯酶与干化学试纸条上的化学试剂反应检测的，当白细胞受各种外因发生破碎时，干化学试纸条可以检测到白细胞但尿沉渣仪器却不能测到。另外还有一种情况，即淋巴细胞中的白细胞酯酶含量很低，如果患者患有尿中以淋巴细胞为主的疾病，如肾结核，器官移植术后等，尿中白细胞多数是淋巴细胞，干化学检测会出现假阴性结果。而尿沉渣仪器此时却可以检测到，显示阳性结果。所以当干化学法与尿沉渣法两者结果不相符时要仔细做尿显微镜检查，仔细鉴别是哪种情况引起的白细胞假阴性。

4.3管型误差原因 尿中含有粘液线时，由于其形状与管型很相似,并易附着被荧光染料着色的物质。尿沉渣仪器很容易将其误认为管型而作出假阳性结果。另外尿液中含有较多杂质时，尿沉渣仪器也会误认为管型造成假阴性，与文献报告一致[4]。

综上所述，流式细胞仪速度快，重复性好，简便易操作，可以精确计数，能节省大量人力物力，但其灵敏度太高，红细胞和管型容易出现假阳性，适合做大批量的筛查。干化学法快速，简便，对红细胞和蛋白检测灵敏度高。但不能定量检测，也不能检测出淋巴细胞。可见再先进的仪器都有其不足之处，都代替不了人工的显微镜检查，因此建议在平时工作时应将三种方法结合起来，在减低工作量，提高工作效率的同时也要减少检验误差，提高检验质量。

[1] 丛玉隆，马俊龙，李云莲，等.尿沉渣测定四种方法的参考范围调查.中华医学检验杂志，1997，20：229-231.

[2] 吴教仁，林敏，李杨.UF-100全自动尿沉渣分析仪检测尿液红细胞的应用预防医学论坛，2005，11(4)：421-422.

[3] 马丽，袁汉尧，王小梅.酵母菌对UF-100全自动尿沉渣分析仪红细胞检测结果影响.上海医学杂志，2001，16(3)：161-162.

[4] 郑宇琼，焦晓阳.流式尿沉渣全自动分析仪，尿干化学分析仪及显微镜的临床意义探讨.江西医学检验杂志，2001，19(1)：5-6.

462000 河南省漯河市中心医院检验科