兔球虫病
2013-01-25付贵财
付贵财
(黑龙江省嫩江县九三管理局尖山农场兽医院,嫩江 161444)
兔球虫病
付贵财
(黑龙江省嫩江县九三管理局尖山农场兽医院,嫩江 161444)
兔球虫病是由孢子虫纲真球虫目艾美尔科艾美尔属的一种或几种艾美尔球虫寄生于兔体内引起的一种以腹泻为主要症状的疾病。该病对养兔业的危害极大,我国把其列为二类动物疫病,与兔瘟、兔布氏杆菌病、兔疥螨病一同被称为四大兔病。
1 病原体
早在1674年列文虎克利用显微镜观察兔的肝脏,无意间发现了球虫卵囊,斯氏艾美尔球虫成为最早发现的原生动物。在1879年,国外学者Leuckart将兔球虫分为肝型球虫和肠型球虫,并分别命名为斯氏艾美尔球虫和穿孔艾美尔球虫。随着现代生物技术的发展,人们通过球虫纯培养鉴定,用分子生物学手段分析验证,确定了11个兔球虫虫种,其余为同种异名[1,2]。其中只有斯氏艾美尔球虫寄生于兔的胆管上皮细胞内,其余均寄生于肠黏膜上皮细胞内。虽然兔球虫是目前已知发现最早的原虫,但对其的研究要远远落后于鸡球虫。由于养兔业发展,兔球虫的研究也越来越深入。
2 分子分类学研究
Kvicerova et al.(2008)[1]利用18S rDNA序列进行对11个兔球虫有效种进行了系统发育的研究。研究结果与形态学和生物学研究的结果并不完全一致。用进化理论分析将兔球虫分为2个谱系,2者之间存在的主要差异在于是否存在卵囊残体,与其他一些因素如卵囊形态,大小,有无卵膜孔,致病性,潜隐期,孢子化时间,裂殖生殖代数及感染位点等因素没有明显相关性。斯氏艾美耳球虫与其他球虫同源性在91.7%~92.9 %,寄生于大肠的黄艾美耳球虫与梨形艾美耳球虫同源性最高,可达99.7%。其他小肠球虫之间同源性在97.1%~99.8%之间。2011年方素芳[3]等人对肠艾美尔球虫进行单卵囊培养,利用ITS-1序列建立了一种鉴定球虫种类的新方法;随后2012年顾小龙[4]等人成功分离到大型艾美尔球虫、黄艾美尔球虫及肠艾美尔球虫单卵囊,并成功克隆ITS-1序列,与GeneBank中发表的序列相比对,同源性分别达到97.4%、97.9%和96.9%。基于ITS-1序列构建了系统发育树,结果显示兔球虫形成一个单系群,根据寄生部位又可分为2个姊妹群。
3 临床症状及病理变化
兔球虫病一年四季都可感染发生,但以夏秋高温潮湿季节多发,且分布及流行极为广泛。经人工感染105和104个兔球虫卵囊,家兔死亡率可高达80%和40%[5]。兔球虫临床症状分为肠型、肝型2种,临床上以肝肠混合型感染最为常见。患兔贫血、消瘦、发育停滞,最终极度衰弱而死亡。临床症状的严重程度与球虫种类、食入卵囊数量和兔年龄阶段有关。
肝型症状是由斯氏艾美尔球虫所引起。因为肝脏是机体的重要器官,慢性肝病削弱动物的抵抗力,易导致继发性感染,斯氏艾美尔球虫对机体健康的影响最大。肝型球虫病患兔的胆管上皮增生,增生细胞填补了胆道毛细血管。胆道血管异常扩张并充满碎屑和球虫卵囊使胆汁变浑浊。斯氏艾美尔球虫结节被炎性细胞浸润,出现实质性病变,后期胆管纤维素变性、增生,导致肝脏边缘极度肿大并出现肉眼可见的黄色结节[6]。
肠球虫的特征性病变是顽固性腹泻,病兔采食和排粪量减少,腹泻导致家兔脱水,体重降低,严重者甚至死亡。由于长期腹泻,使家兔体内离子代谢受到影响,流失大量的钾离子,可导致低钾血症[5]。兔球虫导致的肠炎还常继发大肠杆菌和轮状病毒感染[7~8]。
4 感染途径
Coudert和Pakandl报道[9~10],一般情况下,小于20日龄的幼兔不能感染兔球虫。可能因泌乳时有母源抗体的存在,哺乳期幼兔得到了相应的保护。经Dürr and Pellérdy研究发现[11],在足够大感染剂量的情况下,泌乳期1~9日龄的幼兔也可感染兔球虫。蒋金书等[12]对北京地区的不同年龄家兔感染兔球虫情况进行调查,发现家兔最早在25日龄才可感染兔球虫。据林孟初等报道[13],不同球虫卵囊在不同年龄家兔中的分布也不同,幼兔以斯氏艾美尔球虫、中型艾美尔球虫和穿孔艾美尔球虫居多,成年兔以无残艾美尔球虫、梨形艾美尔球虫和大型艾美尔球虫居多。Pakandl和Hlaskova 研究表明[10],用黄艾美尔球虫和肠艾美尔球虫感染哺乳期幼兔后,卵囊产生数量与幼兔的年龄呈正相关。同时发现人工接种19日龄与22日龄幼兔,其对兔球虫的抵抗力存在较大差异,这可能与19~22日龄时的幼兔正处于从哺乳转变为饲料喂养阶段,其小肠内环境发生改变有关。
5 免疫
家兔抗球虫免疫应答发生的主要场所是肠道相关淋巴组织(GALT)和肠系膜淋巴结。家兔肠道球虫感染时起主要作用的是肠道细胞免疫,而体液免疫无明显作用,或仅起辅助性作用。具有极强免疫原性的肠艾美耳球虫初次感染家兔后第14 d,在肠系膜淋巴结、十二指肠(入侵部位)和回肠(发育部位)中的CD8+T细胞比例明显升高,CD4+T细胞比例仅出现短暂升高;从感染后第7~21 d,肠系膜淋巴结淋巴细胞对兔球虫的特异性抗原具有很强的增殖活性。虽然血清中的IgG水平在感染后有所升高,但是与免疫保护率无相关性,脾脏中CD8+T细胞和CD4+T细胞比例和活性也无明显变化[14~15]。
6 预防
保持良好的卫生条件,可以在球虫孢子化之前将球虫全部杀灭,有效预防球虫感染。但在实践中,不可能将所有的球虫卵囊消灭,如果通过卫生清洁可以显著的减少环境中球虫数量,降低球虫感染力,对控制球虫病具有重要意义。而且,小剂量的卵囊感染是获得抵抗球虫免疫力的最好途径,这种生产技术对防控兔球虫病,效果很好。但药物控制仍是控制球虫病的最有效方法。
2008年底,法国、意大利和西班牙已经授权地克珠利为兔饲料添加剂,然而,依照鸡球虫模式来研制的抗球虫药物,有的对兔球虫效果并不好。常用于预防兔球虫病的有效药物有氯苯胍、地克珠利和盐霉素;治疗药物有磺胺类药物和妥曲珠利。
抗球虫药物通常混合在颗粒料中饲喂,像磺胺类或妥曲珠利通过饮水给药效果更好。但要注意磺胺药易产生耐药性,不能用于预防兔球虫病。药物使用要注意防止中毒,注意对环境的污染和耐药株出现。中草药具有不易产生耐药性,毒副作用小,还有促进生长作用。李佩国等人报道[16],在选用盐霉素的基础上,添加抑菌中草药、硒、维生素E及生化黄腐酸配合而成的新药“兔健宝”,具有抗兔球虫和抗菌双重作用。王秋梅等报道[17],用白头翁鲜草喂兔可预防和减少球虫病的发生。李树荣等[18],用葫芦茶提纯物对兔球虫的卵囊进行杀灭试验,结果表明,Cyclokievitone和葫芦茶素D效果明显,葫芦茶素A效果较差。张西臣等[19],中草药制剂球虫消治疗兔球虫试验,结果表明球虫消不仅可以有效的杀灭球虫,而且还可以提高动物的平均增重。
7 展望
目前,球虫病仍然是危害家兔最严重的疾病之一。因抗球虫药物的滥用引起耐药虫株的产生,药物在兔肉中残留等问题仍然存在。开发廉价、有效、较少药物残留的新抗球虫药是未来研究方向。国外已有6种兔球虫的早熟株选育成功,兔球虫早熟弱毒苗一旦上市,可更有效的控制兔球虫病。