天蚕素抗菌肽对断奶仔猪生长性能和猪瘟及伪狂犬抗体水平的影响
2013-01-21蒋桂韬邱美珍戴求仲
蒋桂韬,杨 俊,邱美珍,张 旭,戴求仲*
(1.湖南省畜牧兽医研究所动物营养与饲养技术研究室,湖南长沙410131;2.湖南省畜牧兽医研究所兽医与兽药研究室,湖南长沙410131)
仔猪因消化器官发育尚不健全,断奶后由于环境、饲料形态和营养成分的突然改变而出现免疫力低下、腹泻和生长发育滞缓等断奶应激综合症,严重影响其健康和生长。生产上普遍采用在饲料中高剂量添加抗生素实现抗病促生长作用,然而抗生素的超量用会导致细菌产生耐药性和药物残留等后果。天蚕素抗菌肽是生物防御系统产生的一类对抗外源性病原体的防御性肽类活性物质,也是动物免疫防御体系的重要组分[1],对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌以及DNA、和RNA 病毒均有很强的抑制作用[2-4],具有耐热性和耐酸性[2],且不易产生耐药性和无毒副作用等特点。近年来,国内学者报道饲粮中添加天蚕素抗菌肽具有提高断奶仔猪生长性能、机体免疫力和降低腹泻等积极作用[5-11],但对于疫苗免疫效果影响的报道较少。为此,本试验用天蚕素抗菌肽替代其他霉素,研究其对断奶仔猪生长性能、腹泻和猪瘟及伪狂犬病抗体的影响,为天蚕素抗菌肽在生产中的应用提供试验依据。
1 材料与方法
1.1 试验动物与分组
选择120头胎次相近、健康的初始体重相近的杜×大×长三元断奶仔猪,随机分为2个处理,每处理6个重复,每重复10头猪。
1.2 试验饲粮及营养水平
试验基础饲粮参照NRC(1998)8~20kg猪的营养需要,以玉米、豆粕等为主要原料配制而成,其组成及营养含量见表1。对照饲粮为基础饲粮添加50%吉他霉素140mg/kg和10%硫酸粘杆菌素540 mg/kg,试验饲粮则在对照饲粮基础上用天蚕素抗菌肽(预混料专用型)160mg/kg替代吉他霉素,其它成分均保持一致。50%吉他霉素和10%硫酸粘杆菌素均在市场上购买,预混料专用型天蚕素抗菌肽由北京中农颖泰生物技术有限公司提供。
表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets(air-dry basis)
1.3 饲养管理
试验在湖南省畜牧兽医研究所试验猪场进行,试验全期为44d。试验猪饲养在封闭式保育猪舍内,水泥地面、漏逢地板各半,通风良好,各栏环境一致。试验期间每天上午和下午各加料一次,自由采食和饮水,按该场常规程序进行免疫(分别在试验第15d和第30d进行猪瘟和猪伪狂犬活疫苗免疫接种)及饲养管理。
1.4 测定指标及方法
1.4.1 生长性能 分别于试验开始和结束时,按重复称仔猪初始和终末空腹体重,计算仔猪平均日增重;试验期以栏为单位准确记录喂料量和剩料量,计算仔猪平均日采食量和料重比。每天下午和傍晚观察记录各栏仔猪腹泻头次(以粪样呈糊状或水样并明显粘于仔猪肛门外为准),并按每栏内腹泻仔猪头日数占栏内仔猪总头日数的百分比计算腹泻率。
1.4.2 猪瘟和伪狂犬抗体水平 在试验结束当天从每栏随机抽取1头试猪通过前腔静脉采血,静置30min 后分离血清。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测猪瘟、猪伪狂犬病抗体,参照ELISA诊断试剂盒说明书进行。试剂盒购自美国IDEXX公司。
判定标准:猪瘟抗体阻断率40%及上者为阳性,60%及上者为免疫合格;猪伪狂犬抗体S/N 值在0.6及以下者为阳性,0.3及以下者为免疫合格。
1.5 数据处理及统计
各组数据先用Excel 2010 进行整理和初步计算,再采用SPSS 19.0统计软件作独立样本t检验。
2 结果与分析
2.1 天蚕素抗菌肽对断奶仔猪生长性能和腹泻的影响
由表2知,各组试猪初始体重差异不显著(P=0.91),但试验组仔猪末重和平均日增重比对照组分别高出0.71kg和16.14g/d,提高幅度达3.01%(P>0.05)和4.94%(P>0.05);试验组平均日采食量、料重比和腹泻率均低于对照组,其中料重比较对照组降低了5.13%(P<0.05),而腹泻率降低了18.66%(P>0.05)。
2.2 天蚕素抗菌肽对断奶仔猪血清猪瘟和伪狂犬病抗体水平的影响
由表3知,在断乳仔猪饲粮中添加天蚕素抗菌肽替代吉他霉素可提高仔猪的猪瘟抗体水平。其中,试验组阻断率达62.80%,比对照组的28.87%提高了117.53%,差异显著(P<0.05);试验组变异系数为28.48%,小于对照组的48.56%;试验组猪瘟抗体阳性率和合格率分别为100%和50.00%,分别比对照组高出499.88%和30%。
表2 天蚕素抗菌肽对断奶仔猪生产性能和腹泻的影响Table 2 Effects of cecropins on growth performance and diarrhea incidence in weaned piglets
表3 天蚕素抗菌肽对断奶仔猪血清猪瘟抗体水平的影响Table 3 Effects of cecropins on the antibody level against CSFV in weaned piglets
由表4可以看出,在断奶仔猪饲粮中添加天蚕素抗菌肽160g/t替代吉他霉素140g/t对于仔猪伪狂犬病抗体水平没有明显影响。试验组和对照组试猪血清的伪狂犬病抗体S/N 值分别为0.28 和0.29,变异系数均在60%以上,阳性率和合格率为100%和50%。
表4 天蚕素抗菌肽和抗生素对断奶仔猪血清伪狂犬病抗体水平的影响Table 4 Effects of cecropins and antibiotics on the antibody level against PRV in weaned piglets
2.3 天蚕素抗菌肽对断奶仔猪的经济效益分析
在对断奶仔猪每千克增重经济效益分析中,因2组间人工、栏舍、易耗物料等成本因素基本相同而将其忽略不计,主要考虑每千克增重的饲料成本。饲料原料按当时行情计算,基础饲粮+10%硫酸粘杆菌素540mg/kg的成本为4.20元/kg,其中对照组饲粮添加吉他霉素140mg/kg的成本为元0.031元/kg,试验组饲粮添加天蚕素抗菌肽160 mg/kg的成本为0.0304元/kg;根据表2中各组料重比计算的对照组和试验组仔猪每kg增重饲料成本分别为7.70元和7.32元,试验组比对照组降低了0.38元。表明本试验中使用天蚕素抗菌肽替代吉他霉素可获得更好的经济效益。
3 讨论
3.1 天蚕素抗菌肽对断奶仔猪生长性能和腹泻的影响
抗菌肽作为一种生物活性肽,与传统抗生素抑菌作用机制不同,它可能是通过在细菌细胞膜上穿孔形成离子通道,破坏细胞膜结构,引起胞内水溶性物质大量渗出,导致菌体自溶而死亡,从而发挥其抗菌促生长的作用。陈香等[7]报道,仔猪饲粮中添加天蚕素抗菌肽制剂250 mg/kg组在提高饲料转化率、降低饲料成本方面较之抗生素组效果更好。刘丁健等[8]报道,保育猪饲粮中添加0.1%抗菌肽与0.3%阿莫西林组饲喂效果相当。宋青龙等[9]发现,试验2组平均日增重和平均日采食量均显著高于对照组(P<0.05)。此外,抗菌肽既能独立发挥抗菌作用,也可以和传统抗生素等其他抗菌物质协同作用,发挥更高活性[12]。刘扬科等[10]报道,仔猪日粮中添加天蚕素抗菌肽300 mg/kg 与常用抗生素(10%杆菌肽锌500 mg/kg+10%硫酸粘杆菌素400mg/kg)配伍可显著提高断奶仔猪末重、平均日采食量和平均日增重,且抗菌肽组平均末重和平均日增重略高于高剂量抗生素组(10%杆菌肽锌800 mg/kg+10%硫酸粘杆菌素1000 mg/kg),而料肉比略低于高剂量抗生素组。本试验证明,断奶仔猪饲粮中添加天蚕素抗菌肽160 mg/kg替代吉他霉素与硫酸粘杆菌素配伍使用,可提高平均日增重和显著降低料重比,进一步印证了前人的观点。
宋青龙等[9]试验表明日粮中添加天蚕素抗菌肽显著改善仔猪腹泻(P<0.05)。黄茂侠[11]报道,饲粮中添加抗菌肽制剂0.6%~0.8%对降低仔猪腹泻率有显著效果,且比添加阿莫西林300mg/kg组效果更好。刘扬科等[12]发现,天蚕素抗菌肽与抗生素配伍使用能有效降低腹泻,该效果显著优于高剂量抗生素单独使用的效果。本试验中,天蚕素抗菌肽组仔猪腹泻率虽较抗生素组有所降低,但差异不显著。由于本试验观察到的仔猪腹泻多集中在断奶后1周内,这提示从教槽料开始使用天蚕素抗菌肽抗腹泻效果是否会更好?值得进一步研究验证。
3.2 天蚕素抗菌肽替代抗生素对断奶仔猪血清猪瘟和伪狂犬病抗体水平的影响
宋青龙等[9]发现添加抗菌肽后第15d和25d可以显著提高断奶仔猪的猪瘟抗体阳性率(P<0.05)。皮灿辉等[13]报道,使用添加抗菌肽制剂的饲粮连续饲喂母猪6个月能显著提高母猪血清中的猪瘟抗体水平。本试验也得到了一致结果:添加天蚕素抗菌肽的试验组的猪瘟抗体阻断率由28.86%显著提高到62.80%,且变异系数较小,而100%的阳性率和83.33%合格率均较对照组的16.67%有大幅度提升。这表明饲粮中添加天蚕素抗菌肽替代抗生素能增强仔猪对猪瘟的免疫效果,且使其抗体保护处于相对稳定状态。Marr等[12]指出,与传统抗生素对细胞的作用靶点通常是单一的个体或者族群不同,抗菌肽的作用靶点并不特定而且更多,这可能是抗菌肽在先天及获得性免疫方面发挥重要作用的原因。
研究表明,猪伪狂犬病活疫苗免疫健康敏感猪7d后抗体水平开始上升,35d后达到高峰[14]。本试验中,2组试猪伪狂犬病抗体水平差异不明显,可能是由于本试验仔猪伪狂犬疫苗接种仅14d,其抗体水平仍处于上升期,故未观察到差异。
4 小结
断奶仔猪饲粮中添加160 mg/kg天蚕素抗菌肽替代140mg/kg吉他霉素(50%)与10%硫酸粘杆菌素配伍使用,可提高饲料转化率、猪瘟抗体水平和经济效益。
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