运输应激对AA肉鸡组织结构的影响

张 雷，岳顺利，吕芳璐，李 想，李剑虹＊

（1.东北农业大学生命科学学院，黑龙江哈尔滨150030；2.黑龙江职业学院，黑龙江双城150111；3.东北农业大学动物科技学院，黑龙江哈尔滨150030）

研究表明运输应激有着极其复杂的机制和多样的表现［1］，对机体免疫、消化代谢、血液循环、神经内分泌等方面均会产生影响。因此了解和研究运输应激的损伤特征和规律以及采取合理的措施以减少运输应激损伤对动物的危害具有重要意义。然而，目前对于运输应激的研究集中在主要机能代谢、神经内分泌和免疫学方面，在运输应激对鸡的组织损伤研究较少。本试验的主要目的在于通过对AA 肉鸡进行不用强度的运输应激处理，动态观察和了解运输应激造成的组织病变，探讨运输应激强度与鸡应激性损伤之间的相关性，为研究运输应激提供科学的理论基础和试验依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物及处理

选择健康1日龄艾维茵商品肉鸡100羽，舍内地面平养，饲养密度为10只／m2，严格按照AA 肉鸡的饲养标准进行饲养。经过49d的适应性饲养后，随机选取生长状况相似40只肉鸡，平均分成4组，每组10只做运输处理。运输前禁水禁食，运输过程中相对湿度70%，平均温度25℃箱运输车连续运输，装箱密度为5只／箱，平均车速约为60km／h，运输时间分别为2h、3h、4h和5h。

1.2 组织切牛制作与观测方法

对50日龄肉鸡宰杀即解剖取样，取心、肝、脾、肺、肾、胸腺等组织。4 ℃生理盐水中洗净残留的血液，分别于10%中性福尔马林溶液中预固定24h，组织修块后重新置于10%福尔马林溶液中性溶液中固定。常规石蜡包埋，H－E染色，5μm 连续切片，光学显微镜下观察组织病变并拍照。

2 结果

2.1 运输应激对心脏的影响

运输应激初期心肌纤维着色不均，横纹不清或消失，胞浆内充满许多微小红染的颗粒；运输应激3到4h时，心肌的病理性损伤与应激初期相比没有明显差异，但血管充血程度有所减轻；运输应激5h个别区域出现心肌纤维断裂（图1）。

2.2 运输应激对肝脏的影响

运输应激2h出现肝细胞肿大，肝细胞索排列紊乱和明显的脂肪变性和颗粒变性；运输应激3h存在大量炎细胞，个别肝细胞出现了散在的核浓缩，核溶解；运输应激4h仍然可见明显的脂肪变性和大量的炎细胞；运输应激5h出现核浓缩，核破裂，核溶解加重现象（图2）。

图1 运输应激对心脏组织结构的影响Fig.1 Effects of transport stress on heart tissues structure

图2 运输应激对肝脏组织的影响Fig.2 Effects of transport stress on liver tissues structure

2.3 运输应激对脾脏的影响

运输应激2h脾脏红髓和白髓界限比较清晰，红髓的毛细血管有不同程度的扩张，有红细胞出现；运输应激3h到4h，红髓白髓的界限慢慢模糊，淋巴细胞数目减少；运输应激5h淋巴细胞数目严重减少，脾小梁增多（图3）。

图3 运输应激对脾脏组织的影响Fig.3 Effects of transport stress on spleen tissues structure

2.4 运输应激对肺脏的影响

运输应激2h后肺组织呈粉红色，一些呼吸毛细管网扩张，出现较明显的、均质红染的浆液性渗出物，充有红细胞；运输应激3h到4h，呼吸毛细血管明显扩张，红细胞数目增多；运输应激5h多数呼吸性毛细管网极度扩张，充满大量的红细胞，甚至红细胞游离于间质组织中（图4）。

图4 运输应激对肺脏组织的影响Fig.4 Effects of transport stress on lung tissues structure

2.5 运输应激对肾脏的影响

运输应激2h出现肾小管上皮细胞肿胀，肾小管充有红细胞；运输应激3h到4h肾小球有大量的炎细胞浸润；运输应激5h肾小球萎缩，肾小管上皮细胞脱落，融合。管腔变小直至消失（图5）。

图5 运输应激对肾脏组织的影响Fig.5 Effects of transport stress on kidney tissues structure

2.6 运输应激对胸腺的影响

运输应激2h，胸腺小结结构疏松，出现少量巨噬细胞；运输应激3h到4h，淋巴细胞坏死，巨噬细胞增多；运输应激5h，巨噬细胞显著增多（图6）。

图6 运输应激对胸腺组织的影响Fig.6 Effects of transport stress on thymus tissues structure

3 讨论

3.1 运输应激对心脏的影响

运输应激初期，机体基础代谢水平加快，心肌细胞遭受到一定程度的损伤；运输3h到4h，血管扩张程度减轻，可能是组织细胞对运输产生一定程度的耐受性，但心肌纤维的损伤并未停止；运输应激5 h心肌纤维局部出现断裂，说明此时心肌纤维的损伤程度最为严重，心肌纤维的损伤可能是由于缺血的心肌纤维受其周围肌细胞压迫造成的［2］，可见运输应激会对心脏造成病理性损伤，虽然机体有一种平衡和适应能力，但运输时间的增加损伤会加重。

3.2 运输应激对鸡肺脏的影响

运输应激是多因素作用的问题［3］，运输过程中的往往伴随着热应激，运输应激对肺的影响较大的原因是肉鸡生产代谢快，且无汗腺。高温时不仅要进行气体交换还要散发热量［4］，病理组织学检查发现肺脏呼吸毛细管网和毛细血管明显扩张，细支气管及相应的呼吸毛细管网内出现多量均质红染的浆液性渗出物。

3.3 运输应激对肝脏的影响

肝脏细胞在运输应激过程中的病理性损伤不单纯是由于高热和应激引起的缺血而造成的，一些在应激中变化较大的激素、介质和细胞因子也参与了对这些脏器细胞的损伤［5］。其损伤机制由于应激破坏了细胞的抗氧化系统，使自由基在细胞内积累［6］。运输应激对鸡肝细胞的病理性损伤主要表现为炎细胞的大量出现以及不同程度的颗粒变性和脂肪变性，这种变性和轻度坏死在各阶段受试鸡肝脏内均可见到。

3.4 运输应激对肾脏的影响

运输应激对鸡肾脏的病理性损伤表现的较为明显，应激的初期即可见明显的肾小管上皮细胞显著肿胀［7］，严重时甚至发生肾小管上皮细胞的泛发性坏死，肾小球萎缩。应激过程中肾脏的病变表现随着应激时间的延长而有加重的趋势，这可能是因为肾脏的血液供应来自腹主动脉，运输应激时腹主动脉由于收缩以增加血压，因而使肾组织缺血较严重［8］。同时，运输过程中排出速度过慢尿酸会堆积在肾小管，阻碍正常排尿造成肾肿，也将加剧肾组织的病变。使肾功能衰竭。

3.5 运输应激对脾脏和胸腺的影响

机体的免疫功能要靠免疫器官、免疫组织和免疫细胞来维持和执行，胸腺是重要的中枢免疫器官，脾脏是主要的外周免疫器官，这两个免疫器官是细胞免疫因子合成和分泌的主要场所。运输应激对肉鸡的脾脏的病理性损伤明显的标志是淋巴细胞的减少，使胸腺中巨噬细胞的大量出现，这些都表明机体的免疫力在急剧下降。可见运输应激对机体的主要影响是免疫功能的减弱，这主要是由于神经内分泌激素对免疫的调节作用所致，应激时，下丘脑一垂体释放信号促使肾上腺系统释放皮质醇、去氧皮质酮等物质刺激免疫系统，从而抑制或损害具有免疫功能的T 细胞和B细胞，导致机体免疫能力下降［9］。

4 结论

随着运输时间的加长，组织损伤加重，适宜的运输时间应在2h之内为宜。

［1］徐仁宝，阮 鉴.热休克反应和热休克蛋白［J］.中国病理生理学杂志，1986，2（2）：112－114.

［2］王新谋，顾宪红，汪琳仙，等.高温对产蛋鸡血浆促黄体激素和孕酮水平的影响［J］.畜牧兽医学报.1994，25（4）：289－294.

［3］Schwartzkopf－Genswein K S，Faucitano L，Dadgar S，et al，Road transport of cattle，swine and poultry in North America and its impact on animalwelfare，carcass and meat quality：A review Meat Science［J］.92（2012）：227－243.

［4］李守军.肉鸡急性热应激损伤及其机理的研究［D］.北京：中国农业大学，2004.

［5］Thaxtonp C R，Gliek ler B.Immune response of following heat exposure or injection with acth［J］.Poul Sci，1968，47：1 462－1 472.

［6］李玉保.长途运输应激猪组织损伤与lisps mRNA 转录、HSPs表达相关性研究［D］.南京：南京农业大学，2006.

［7］谭 淼，邱仞之，蔡俊杰，等.热应激与热休克诱导兔肝、心和肾HsP70的表达［J］.工业卫生与职业病，1996，22（1）：29－31.

［8］付旭彬.肉鸡急性热应激损伤及其机理的研究［D］.南京：南京农业大学，2002.

［9］朱 琳.运输应激仔猪组织的应激性损伤及Hsp47、Hsp60表达［D］.南京：南京农业大学，2008.