CD133和CD44在前列腺癌中的表达及意义

冀 阳，胡新生，郭国营

（河南省新乡市中心医院 泌尿外二科，河南 新乡 453000）

前列腺癌（cancer of prostate）是西方国家发病率较高的恶性肿瘤之一[1]。近年来，随着我国人民的生活习惯及环境的改变，前列腺癌在我国的发病率呈现逐年增加的趋势，目前已位居泌尿系统肿瘤的第3位，仅次于膀胱癌和肾癌。因为前列腺癌早期的临床症状较为隐匿，出现临床症状时已有远处转移，导致预后不良，是临床治疗的难点。因此，寻找与前列腺癌细胞增殖，转移等生物学行为相关的靶基因，对于提高前列腺癌的早期和治疗方法具有重要的临床意义，为此本研究对存档的前列癌标本进行CD133和CD44的检测，以期为临床研究结直肠癌的的发病及转移提理论基础。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取2000年10月～2011年10月在我院确诊为膀胱癌并进行手术的患者作为观察组，共72例。纳入标准：①经过病理确认为前列腺癌；②术前患者均未进行激素、化疗和放疗等治疗；③并且所有患者临床资料包括肿瘤大小、数目、病理分级和临床分期等均齐全。排除标准：①合并其他器官恶性肿瘤的患者；②伴有消化系统其他疾病的患者。并且选取33例病理证实为正常前列腺组织作为对照组。

1.2 免疫组化染色方法

CD133和CD44试剂均购于武汉博士德生物工程有限公司，SP试剂盒、DAB显色剂均购于北京中杉金桥生物技术有限公司，严格按照试剂盒染色操作程序进行，具体步骤：石蜡切片脱蜡至水后，在 30 mL的 3%H2O2去离子水孵育10min以消除内源性过氧化物酶活性；抗原修复后分别滴加一抗，4℃过夜，PBS冲洗3次；滴加生物素标记的二抗工作液，37℃孵育 30min，PBS冲洗3次；滴加辣根酶标记链霉卵白素，37℃孵育 30 min，PBS冲洗3次；DAB显色；自来水充分冲洗、苏木复染、脱水透明和常规封片。用PBS代替-抗做阴性对照，操作全过程由同一病理技师完成，以避免人为误差。

1.3 判断标准

CD133和CD44结果判断按照免疫组化染色阳性肿瘤细胞比例和染色强度进行评分，无阳性细胞为0分，＜10%为1分，10%～50%为2分，≥50%为3分，无着色为0分，轻度着色为1分，中度着色为2分，重度着色为 3分，＜3分为阴性（-），≥3分为阳性（+）。

1.4 统计学方法

所有数据均经过专人校队后输入计算机，采用SPSS11.5建立数据库，单因素检验采用χ2检验，以P＜0.05为差异有显著性。

2 结果

2.1 两组患者CD133和CD44表达情况比较

CD133和CD44的在观察组中的表达表达阳性率均明显高于对照组，差异均有显著性（P＜0.01），详见表1。

2.2 CD133在不同临床病理指标中的表达的比较

表1 CD133和CD44在病例组与对照组中的表达 例（%）

表2 CD133在不同临床病理指标中的表达 例（%）

表3 CD44在不同临床病理指标中的表达

CD133表达与病理分级分期，T分期，远处转移等指标密切相关（P＜0.05），而与前列腺癌患者的年龄，肿瘤数目，组织分型无明显的相关性（P＞0.05），详见表2。

2.3 CD44在不同临床病理指标中的表达的比较

CD44表达与病理分级，T分期，远处转移，等指标密切相关（P＜0.05），而与前类型癌患者的年龄，肿瘤数目，组织分型无明显的相关性（P＞0.05），详见表3。

3 讨论

前列腺癌是老年男性常见的恶性肿瘤之一，因其起病隐匿，并且临床表现与前列腺增并无明显的区别，常常被误诊为前列腺增生，直到出现尿路症状和骨痛才去就诊，这时患肿瘤已发生了浸润或转移，预后较差。前列腺癌在西方国家癌发病率较高，2008年美国发病率和死亡率分别居男性恶性肿瘤的前两位[2]。近年来由于我国人民生存环境、饮食结构、生活方式的改变以及人口老龄化的加剧，前列腺癌患者的发病率和死亡率也呈明显增高趋势[3]。因此，研究前列腺癌的肿瘤学发生、发展及产生机制，对指导前列腺癌的治疗有具有重要意义。

近年来的研究显示：肿瘤干细胞在许多恶性肿瘤组织中存在，并且在肿瘤的发生和发展，复发及转移的中发挥着重要作用，其中CD133和CD44是最常见的肿瘤干细胞特征性的表面标志物之一[4-5]，研究显示：两种标志物在前列腺癌细胞中存在CD133和CD44的表达，其中CD133主要位于前列腺癌细胞浆和胞膜中，CD44主要表达于前列腺癌细胞膜上，其在前列腺癌组织中有较强的增殖能力、克隆形成能力、致瘤能力[6-7]，但CD133和CD44与前列腺癌病理分级，临床分期，肿瘤转移，组织分型等的相关性目前尚不清楚。为此本研究采用免疫组化的方法对72例前列腺癌患者组织中的CD133和CD44进行了分型，结果发现：CD133和CD44都在各级别的前列腺癌组织中均可以见CD133和CD44阳性细胞，并且随着前列腺癌的分级越高，病理分期越晚，CD133和CD44阳性细胞比例越高，并且有远处骨转移及其他器官转移的患者前列腺癌组织中两种标记物阳性比例也明显高于未发生转移的前列腺癌患者，这说明CD133和CD44与前列腺癌病理分级，临床分期，肿瘤转移密切相关，以往对于前列腺癌的实验室诊断主要依靠血清前列腺特异性抗原（PSA）是目前临床诊断前列腺癌主要方法之一，但存在一定的假阳性，限制了其在前列腺癌的诊断中的应用价值，而本研究显示CD133和CD44在前列腺癌与良性前列腺组织中的表达差异显著，并且与与前列腺癌的临床分期，病理分级，癌细胞转移密切相关，使CD133和CD44可能成为诊断前列腺癌的肿瘤标记物。但是本研究也存在局限性，未对前列腺癌患者进行随访，无法明确CD133和CD44与前列腺癌的预后是否存在相关性。为此，本研究在以后的研究中将重点关注CD133和CD44与前列腺癌长期生存率的相关性。

综上所述，前列腺癌患者中CD133和CD44异常表达，二者在前列腺癌的发生发展中具有重要作用，并且与前列腺癌的病理分级、临床分期和癌转移具有密切相关性。

[1]SINGH P,SRIVASTAVA A.Update in palliative management of hormone refractory?cancer of prostate[J].Indian J Urol,2007,23(1)：43-50.

[2]JEMAL A,SIEGEL R,WARD E,et a1.Cancer statistics[J].CA Cancer J Clin,2008,58(2)：71-96.

[3]叶定伟.前列腺癌流行病学和中国的发展趋势[J].中华外科杂志,2006,44(6)：362-364.

[3]YE DW.Epidemiology of prostate cancer and the development trend of China[J].Chinese Journal of Surgery,2006,44(6)：362-364.Chinese

[4]MÄRGÄRITESCU C,PIRICI D,SIMIONESCU C,et al.The utility of CD44,CD117 and CD133 in identification of cancer stem cells (CSC)in oral squamous cell carcinomas (OSCC)[J].Rom JMorphol Embryol,2011,52：985-993.

[5]CHETTY C,VANAMALA SK,GONDI CS,et al.MMP-9 induces CD44 cleavage and CD44 mediated cell migration in glioblastoma xenograft cells[J].Cell Signal,2012,24(2)：549-559.

[6]BOCCON GIBOD L,VAN DER K WAST TH,MONTIRONI R,et a1.Handling and pathology reporting ofprostate biopsies[J].Eur Urol,2004,46：177-181.

[7]MONTIRONI R,VELA-NAVARRETE R,LOPEZ-BELTRAN A,et a1.2005 update on pathology of prostate biopsies with cancer[J].Eur Urol,2006,49：441-447.