非小细胞肺癌患者血清肝细胞生长因子及转化生长因子-β的检测及临床意义*

陈志军，史莉瑾，赵国昌，王忠民

（1.新乡医学院第一附属医院胸外科，河南新乡， 453100；2.新乡医学院第一附属医院神经内科，河南新乡， 453100）

非小细胞肺癌（non-small cell lung caner，NSCLC）是临床最常见的肺癌类型，是恶性肿瘤死亡的首要原因，已成为威胁人类生命健康的重要疾病。化疗是NSCLC治疗最重要的手段之一，然而由于NSCLC具有早期复发和转移的特点，其疗效并不理想，5年生存率在8.9%～15.0%之间[1-2]。NSCLC的转移涉及癌基因、抑癌基因、生长因子和黏附分子等，是一个复杂的过程。癌细胞的运动和侵袭是肿瘤细胞转移的关键因素，许多细胞因子在肿瘤转移中扮演重要角色[3]。肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor，HGF）是一种在肝、肾组织受损后促进再生的生长因子，HGF还对多种癌细胞的运动和侵袭也具有促进作用[4-5]。转化生长因子β（transforming growth factor-β，TGF-β）是目前公认的重要的促纤维化因子，它与多种恶性肿瘤的形成、侵袭、转移和预后有关[6]。但目前有关HGF和TGF-β在NSCLC血清中的表达及其与临床病理资料之间的相关研究少见报道。因此，本研究通过检测NSCLC血清中HGF和TGF-β的表达与NSCLC临床病理学参数之间的关系，进一步阐明NSCLC的发病机制和为NSCLC的治疗寻找新的思路。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析了2005年3月～2010年5月在我院行肺癌根治术收的73例NSCLC患者为研究对象，均有完整的临床资料并成功完成随访。纳入标准：所有患者均经病理组织学和/或细胞学诊断为NSCLC，并按肺癌国际分期标准（UICC，2002）为Ⅲ～Ⅳ期，KPS评分≤60分，预计生存期≥3个月，既往未接受过抗肿瘤治疗或者距离末次抗肿瘤治疗时间2个月以上。73例患者中，男44例，女29例；年龄36～78岁，平均（62.6±11.2）岁；病理类型：鳞状细胞癌58例；腺癌15例；Ⅲ期57例，Ⅳ期16例。另选同期在我院体检的健康查体者70例为对照组，男40例，女 30例；年龄 35～75岁，平均（61.8±14.3岁）。NSCLC组与对照组在性别和年龄构成方面差异无显著性（P＜0.05），具可比性。

1.2 方法

分别取NSCLC患者手术前空腹12 h清晨肘静脉血，对照组取体检日空腹12 h清晨肘静脉血，样本量为3mL，3000 r/min离心15min后分取血清，置-80℃冰箱保存待测。采用酶联免疫吸附剂测定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA） 方法检定血清HGF、TGF-β水平，所用HGF和TGF-β试剂盒为深圳晶美公司产品，严格按试剂盒说明操作。

1.3 统计学方法

采用SPSS13.0统计分析软件进行数据分析，计量资料（均数之间的比较）用t检验，以P＜0.05为差异有显著性。所有计量资料采用均数±标准差（）表示。检验水准为α=0.05。

2 结果

2.1 NSCLC组和对照组血清HGF和TGF-β水平比较

NSCLC组血清HGF、TGF-β均显著高于对照组，相比较差异有显著性（t=4.046，3.994，P ＜0.05）。结果见表1。

表1 NSCLC组和对照组血清HGF、TGF-β 水平比较 （）

表1 NSCLC组和对照组血清HGF、TGF-β 水平比较 （）

注：†与对照组比较，P＜0.05

组别n HGF/（pg/mL）TGF-β/（ng/mL）对照组 70 198.78±16.12 1.02±0.08 NSCLC组 73 373.94±30.32† 2.64±0.21†t值 4.046 3.994 P＜0.05 ＜0.05

2.2 HGF、TGF-β表达与NSCLC临床病理指标的关系

临床分期Ⅳ期的血清HGF、TGF-β水平显著高于Ⅲ期，相比较差异有显著性（t=3.941，3.898；P＜0.05）；肿瘤低分化组血清HGF、TGF-β水平显著高于高中分化组，相比较差异有显著性（t=3.471，3.656；P ＜0.05）；发生肿瘤转移组血清 HGF 和TGF-β水平显著高于肿瘤未转移组，相比较差异有显著性 （t=3.357，3.615；P ＜0.05）。血清 HGF、TGF-β水平在性别、年龄和肿瘤病理类型之间比较差异无显著性（P＞0.05）。结果见表2。

表2 HGF和TGF-β表达与NSCLC临床病理指标的关系 （）

表2 HGF和TGF-β表达与NSCLC临床病理指标的关系 （）

n HGF/（pg/mL）t P TGF-β/（ng/mL）t P性别男44 385.46±31.25 2.326 ＞0.05 2.84±0.23 2.610 ＞0.05女29 356.46±28.90 2.34±0.19年龄＜60岁 23 367.81±29.82 2.203 ＞0.05 2.57±0.21 2.234 ＞0.05≥60岁 50 376.76±30.55 2.67±0.22病理类型鳞癌 58 370.99±30.08 2.234 ＞0.05 2.60±0.21 2.308 ＞0.05腺癌 15 385.35±31.25 2.79±0.23临床分期Ⅲ期 57 316.25±25.64 3.941 ＜0.05 2.24±0.18 3.898 ＜0.05Ⅳ期 16 579.45±46.98 4.06±0.33分化程度高中分化 52 317.81±25.77 3.471 ＜0.05 2.20±0.18 3.656 ＜0.05低分化 21 512.93±41.59 3.74±0.30肿瘤转移有41 447.69±36.30 3.357 ＜0.05 3.21±0.26 3.615 ＜0.05无32 279.45±22.66 1.91±0.15

3 讨论

手术根治性切除仍然是NSCLC主要的治疗方法，但由于NSCLC易转移，大多数患者术后死于肿瘤转移和肺癌复发。传统的肺癌TNM分期作为评估患者术后转移和复发的指标很难做出准确的估计。近年来随着肿瘤分子生物学水平研究的不断发展，寻求NSCLC新的有效的预测指标，及早对NSCLC进行准确诊断，为患者争取手术时间、预测术后复发以及病情进展风险具有重要的现实意义。

由于肿瘤的发生与发展是一个多因素、多步骤的复杂病理过程，多种细胞因子与肿瘤的发生、肿瘤细胞增殖以及肿瘤分化密切相关[7]。研究发现HGF及TGF均是多效因子，在肿瘤的发生、发展中表现出多种生物学作用。HGF是一种在肝、肾组织受损后促进再生的生长因子，它具有刺激肝细胞再生的能力，并对上皮细胞集落有扩散作用[8]。TGF-β是一类多肽类生长因子超家族，具有多种生物学功能[9]。在多种肿瘤研究中均已证实HGF、TGF-β在肿瘤发生、发展中表现出多种生物学效应，有促进肿瘤细胞增殖、浸润转移的作用，有调节血管生长因子的表达和促进肿瘤血管生成的功能，有促进细胞增殖和抗凋亡作[10-12]。此外，HGF刺激可促进淋巴内皮细胞的增殖，促进淋巴管形成的作用[13]。TGF-β还具有免疫抑制作用，可以使高免疫原性肿瘤细胞逃脱免疫监视，从而形成肿瘤[14]。本研究结果显示：NSCLC患者血清HGF和TGF-β水平显著高于对照组（P＜0.05）。提示NSCLC患者血清存在HGF和TGF-β高表达。

本研究进一步对血清HGF和TGF-β水平与NSCLC患者临床病理指标之间关系进行研究，结果表明临床分期Ⅳ期患者的血清HGF和TGF-β水平显著高于Ⅲ期（P＜0.05），肿瘤低分化组血清HGF和TGF-β水平显著高于高中分化组（P＜0.05）。表明HGF和TGF-β在NSCLC血清中高表达，并随着肿瘤的恶性程度升高，其表达水平和强度增加。提示术前高水平的HGF和TGF-β意味着该患者可能处于肿瘤晚期，表明血清HGF和TGF-β水平作为监测肿瘤恶性程度是一个可行的指标。分析其原因可以在于：肿瘤进行晚期后，肺癌细胞丧失了对HGF和TGF-β负性调控作用的反应性，导致HGF和TGF-β无限增殖[15]。本研究结果显示：发生肿瘤转移组血清HGF和TGF-β水平显著高于肿瘤未转移组，相比较差异有显著性（P＜0.05）。表明术前高水平的HGF和TGF-β意味着该患者已发生远处转移或淋巴结转移，进而提示研究者需要做进一步的检查，以避免进行不必要的手术。本研究结果表明HGF和TGF-β水平在性别、年龄和肿瘤病理类型之间差异无显著性（P＞0.05）。提示HGF和TGF-β水平与NSCLC患者的性别、年龄和肿瘤病理类型无显著相关性。

综上所述，HGF和TGF-β在NSCLC血清中呈高表达，NSCLC患者术前血清HGF和TGF-β水平与肿瘤临床分期、肿瘤分化程度和肿瘤转移有关，高水平的HGF和TGF-β表明NSCLC疾病的侵袭和进展。因此，笔者认为血清HGF和TGF-β可以作为预测NSCLC疾病的侵袭和进展的一个新型指标。

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