中老年维持性血液透析患者动脉僵硬度与炎症细胞因子及氧化应激的关系

任红旗 周 璇 栾智勇 骆晓梅 韩淑静 蔡 青 李 艳 李 玲

动脉粥样硬化(CAS)是终末期肾病(ESRD)患者心血管疾病(CVD)死亡的独立危险因素。参与ESRD患者动脉粥样硬化的因素很多，其中部分可逆。越来越多的证据表明动脉粥样硬化是一种慢性微炎症性病变［1－4］。

维持性血液透析(MHD)患者存在肾脏排泄功能障碍，代谢产生的毒素及细胞因子在体内蓄积，氧化系统与抗氧化系统失衡，导致氧自由基损伤和脂质过氧化，使糖基化终末产物及晚期氧化蛋白产物在体内积聚，并与单核巨噬细胞表面特异性受体结合释放黏附分子，激活核因子 κB(NF-κB)，分泌白细胞介素1(IL-1)、IL-6及肿瘤坏死因子α(TNF-α)等炎症细胞因子［5，6］。炎症细胞因子及氧化应激在MHD患者透析相关心血管事件进展中起重要作用［7，8］。

有关MHD患者动脉僵硬度与炎症因子及氧化应激间的关系研究较少，本文旨在进一步研究这一问题。

对象和方法

研究对象 选取2006年10月至2012年2月解放军第97医院MHD患者62例，其中男性43例，女性19例，年龄45～76岁(59.4±7.6岁)，透析龄3～61岁(中位数34月)。所有患者均符合以下条件:(1)年龄≥45岁;(2)透析时间≥3月;(3)入组前3月内未发生心血管事件;(4)排除急性感染征象;(5)无严重营养不良［血清白蛋白(Alb)＞30 g/L］;(6)透析4h/次，3 次/周，尿素清除指数(Kt/V)≥ 1.2［9，10］。本研究入选患者均知情同意，同时获得医院伦理委员会批准。

入选患者根据有无动脉僵硬度分为CAS组和非CAS组。CAS组42例，其中男性31例，女性11例，年龄45～73岁(57.2±7.8岁)，透析龄3～61月(中位数34月);其中慢性肾小球肾炎32例，糖尿病肾病6例，间质性肾炎2例，原发性高血压2例。非CAS组20例，其中男性12例，女性8例，年龄47～76岁(56.2±8.7岁)，透析龄3～56月(中位数32月);其中慢性肾小球肾炎13例，糖尿病肾病4例，原发性高血压3例。均采用费森尤斯4008B血液透析机，F6聚砜膜透析器，透析器膜面积1.3m2，透析液流量500 ml/min，血流量200～300 ml/min，碳酸氢盐透析液(钠138 mmol/L、钾2.5 mmol/L、钙1.5 mmol/L、镁0.5 mmol/L、碳酸氢根32 mmol/L)。

正常对照组为12例健康体检者，其中男性7例，女性5例，年龄45～68岁(57.9±7.8岁)。

血生化 患者透析当天空腹采集静脉血3 ml，健康对照者同样体检当天空腹采血3 ml。应用日立7600全自动生化分析仪检测Alb、钙、磷、总胆固醇(CH)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、三酰甘油(TG)、血糖、尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)及C反应蛋白(CRP)等指标。

血清 TNF-α，IL-6，8 异前列腺素(8-isoprostane)F2α浓度检测 患者透析当天空腹采集静脉血7ml，健康对照者体检当天同样空腹采血7 ml。室温静置30 min后，3 000 r/min离心15 min，取上清于－20℃冰箱保存;收齐标本后一次送检。检测前使样本置于室温或冷水中复融，取血清测定。采用ELISA 法检测血清 TNF-α，IL-6，8-isoprostane F2α 浓度。TNF-α，IL-6试剂盒购自 eBioscience公司，8-isoprostane F2α试剂盒购自 Cayman Chemical公司，操作按说明书执行。

颈总动脉硬化参数β及脉搏波传导速度(PWV)的测定 颈总动脉硬化参数β作为评价大动脉僵硬度指标。应用飞利浦IU 22彩色多普勒超声诊断仪高分辨血管探头(频率5～13 MHz)在透析结束后1h，先观察右侧颈动脉管壁情况，在长轴切面中调节M取样线位于颈总动脉窦部下方2 cm处，并使M线位于动脉中外膜处使M线与动脉壁平行，后启动ET功能，待获得连续3～5个以上稳定波形后存储图像，后处理中输入即时血压，仪器会自动计算出该侧颈总动脉硬化参数β及PWV。根据文献将颈总动脉硬化参数β＞10定义为颈总动脉僵硬［11－13］。

统计学分析 运用SPSS 15.0软件进行数据分析。计量资料采用均数±标准差表示，配对资料用t检验，以P＜0.05为差异统计学意义，P＜0.01为统计学差异显著。

结 果

一般情况 CAS组和非CAS组患者在年龄、透析龄、舒张压、BUN、SCr、CH、TG、HDL、LDL、血红蛋白(Hb)方面无明显差异，但CAS患者收缩压高于非CAS患者(P＜0.05)(表1);此外，CAS组颈总动脉硬化参数β及PWV均高于非CAS组及正常对照组(表2)。

表1 CAS组、非CAS组及正常对照组患者的一般情况

表2 CAS组、非CAS组及正常对照组患者动脉硬化指标

血清 TNF-α，IL-6，8-isoprostane F2α 浓度 CAS组患者8-isoprostane水平高于非CAS组［(68.8±45.9)pg/mL vs(25.6 ±27.5)pg/mL，P ＜0.01］。两组患者血清CRP、TNF-α、IL-6水平均高于正常对照组水平，但两组间比较无显著统计学差异(表3)。

表3 CAS组、非CAS组及正常对照组患者血清 TNF-α，IL-6，8-isoprostane F2α水平

讨 论

在生理状况下，血管内径随着血流的速度改变而变化，随动脉僵硬度增加，血管在收缩期和舒张期变化幅度减小，因此通过检测血管壁的运动振幅，可准确判断管壁的僵硬度。采用超声Echotracking技术测定颈总动脉僵硬度被认为是评价大动脉僵硬的可靠方法。颈总动脉硬化参数β是评价颈总动脉僵硬度的常用指标［9－11］。影响 ESRD患者大动脉僵硬的因素很多，既往研究发现收缩压、年龄、高血钙及糖尿病是中老年MHD患者颈总动脉僵硬的独立危险因素［12，13］。我们采用超声 Echotracking技术测定颈总动脉僵硬度，根据结果将MHD患者分为CAS组和非CAS组，以期研究MHD患者炎症细胞因子及氧化应激与颈总动脉僵硬度间的关系。

慢性肾衰竭(CRF)患者存在代谢毒素及细胞因子排泄障碍，使糖基化终末产物及晚期氧化蛋白产物在体内积聚，因而体内处于微炎症状态。而MHD患者由于容量超负荷、透析膜生物不相容性、透析液微生物污染、血管通路及潜在感染等因素，进一步加重了炎症反应的进展［5，14－18］。本研究发现 CAS 组和非CAS组患者血清CRP、TNF-α、IL-6水平均高于正常水平，说明MHD患者体内普遍存在微炎症状态，但统计学分析发现两组患者之间并无明显差异，说明在动脉硬化形成过程中，炎症因子可能参与其中，但可能非主要作用。

由于CRF患者体内抗氧自由基系统与氧自由基产生系统之间失衡，可导致氧自由基损伤和脂质过氧化，在MHD患者透析相关心血管事件过程中起一定作用［7，8］。近年来，8-isoprostane F2α 是评估过氧化损伤的研究热点，8-isoprostane F2α是不饱和二十烷脂肪酸，位于磷脂的SN-2位置。缺氧可激活磷脂酶A2，使细胞膜上的磷脂水解释放花生四烯酸(AA)，也可能激活磷脂酶C，使三磷酸肌醇分解释放AA。AA通过非环氧化酶途径，即氧自由基作用于细胞膜上的AA，经β裂解重组形成8-iso-PGF2α。8-iso-PGF2α可特异、准确地反映机体内的脂质过氧化情况，提示氧自由基损伤的严重程度，可作为评价氧自由基损伤和脂质过氧化反应理想的生物学指标［19］。本研究发现CAS组患者8-isoprostane水平高于非CAS组患者，说明在CAS形成过程中，氧化应激可能起一定作用。

ESRD患者普遍存在高血压，多项研究显示，ESRD患者大动脉硬化参数与高血压密切相关［20，21］。本研究结果也显示，在中老年MHD患者中收缩压与颈总动脉硬化参数β及PWV密切相关。大动脉僵硬时，PWV增快，反射波抵达中心大动脉的时相从舒张期提前到收缩期，出现收缩期延迟压力波峰，导致收缩压升高，舒张压降低，脉压增大。血压升高又可引起动脉内皮功能受损导致动脉壁舒缩功能的变化［22］及动脉中层平滑肌细胞增生和纤维化，并刺激胶原过度合成，使管壁增厚，僵硬度增大，因此高血压与大动脉硬化互为因果，相互作用。

总之，本研究表明收缩压、氧化应激与颈总动脉僵硬度关系密切，因而在动脉僵硬形成中可能起主要作用，而炎症细胞因子尽管在MHD患者体内高于正常，但由于组间比较无差异，说明炎症细胞因子在颈总动脉僵硬形成过程中所起作用尚不明了，需进一步研究探讨。

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