ANA、抗ENA抗体法联合检测214例自身免疫性疾病的结果分析
2012-11-23吴风
吴 风
(无锡市第二人民医院 检验科,江苏 无锡214002)
自身免疫性疾病(autoimmune diseases,AID)患者的血清中存在多种特异性或相关性自身抗体[1],本试验采用间接免疫荧光法(IIF)和免疫印迹法(IBT)对AID患者血清中的抗核抗体(ANA)和抗ENA多肽抗体谱进行检测,结果报道如下。
1 对象与方法
1.1 对象 2009年1月-2010年6月我院门诊和住院AID患者214例,年龄15-89岁。系统性红斑狼疮(SLE)108例、干燥综合征(SS)27例、混合性结缔组织病(MCTD)15例、类风湿性关节炎(RA)45例、原发性胆汁性肝硬化(PBC)5例、系统性硬化症(PSS)7例、特发性血小板减少性紫癜(1TP)7例。诊断符合美国风湿病协会诊断标准。40例正常对照组均为体检健康者。
1.2 试剂与方法 抗核抗体谱(IgG)检测试剂盒采用欧蒙印迹法,由德国欧蒙公司提供,可检测抗nRNP、Sm、SS-A、Ro-52、SS-B、SCL-70、PM-Scl、JO-1、CENP-B、PCNA、dsDNA、核小体、组蛋白、核糖核蛋白、AMA-M2等15种不同IgG类抗体,按试剂盒说明进行检测,抗核抗体(ANA)采用间接免疫荧光法(IIF),以 Hep-2/猴肝为抗原基质,按照试剂盒操作,荧光显微镜观察结果,细胞或组织内出现特异性荧光判为阳性。测定4个滴度:1∶100、1∶320、1∶1 000、1∶3 200。
2 结果
2.1 AID患者和正常对照组血清中ANA滴度检测结果见表1。
2.2 AID患者和正常对照组血清中ANA和抗ENA抗体结果见表2。
3 讨论
ANA是真核细胞的细胞核、细胞浆、细胞膜多种组分自身抗体的总称[2]。不同的自身免疫病有不同的抗核抗体谱。ANA的敏感性高于抗ENA抗体(见表2)但其特异性差,不能确诊疾病。ANA滴度检测可作为AID活动性的一项重要指标,在观察SLE患者中发现,ANA滴度与抗ENA抗体阳性条带数呈正相关,在SLE活动期抗ENA抗体阳性条带数增加,ANA滴度也显著增高,随着SLE病情缓解,抗ENA抗体阳性条带数减少,ANA滴度也随之下降。
ANA由于其靶抗原多样性,因此一些特异性的ANA系列抗体对诊断或鉴别AID有一定的临床意义。在抗核抗体谱检测的15种不同抗原IgG类抗体中,抗Sm、抗dsDNA和抗核小体抗体均是SLE的特异性抗体。其中抗dsDNA抗体对SLE具有较高的特异性,本文中检测率达到86.1%。抗Sm抗体仅在SLE中出现,其特异性高被认为是SLE的标记抗体。在108例SLE患者中有40例抗Sm抗体阳性,其他组中未出现阳性结果,与文献报道一致[3]。抗核小体抗体在本文中检出率为84.3%,一般出现在SLE中早期。联合检测ANA和抗ENA抗体有助于早期鉴别诊断SLE,对SLE的病情判定,追踪和预防也具重要作用
表1 214例AID患者和40例正常对照组血清中ANA滴度检测结果
表2 214例AID患者和正常对照组血清中ANA和抗ENA抗体结果
抗SSA抗体和抗SSB抗体是诊断SS的标记性抗体,两者联合检测可提高SS诊断率[4]。抗R0-52抗体可用于鉴别SLE与SS患者,仅3.7%SLE患者可单独检测出抗R0-52抗体。
抗RNP抗体是MCTD的标志性抗体,本文中检出率为80.0%,但特异性较差,其他AID患者中也可检测到此抗体。抗SCI-70抗体是进行性系统性硬化症特异性抗体,与肺部受累、皮肤硬化及肿瘤发生相关。本文抗SCI-70抗体在ITP患者中有71.4%检出率,在PSS患者中检出率为57.1%。抗CENP-B抗体主要与PSS相关,本文中检出率为14.3%。抗AMA-M2抗体是PBC的特异性标志抗体,本文中检出率为60.0%,主要为低滴度,与文献报道基本一致[5]。抗JO-1抗体是多肌炎的标志性抗体,具有高度特异性,在其他AID患者中检测不到此抗体。RA患者血清中可检测出ANA,但检出率低(55.6%),其中抗 CENP-B 抗体在 RA 患者中有4.4%的检出率,较罕见。在以往文献中未见详细报道,有待进一步研究。抗ENA抗体中也没有发现具有诊断价值的特异性抗体,因此ANA和抗ENA抗体检测对RA诊断价值不大。
[1]张蜀谰,佟大伟,李永哲.自身抗体检测新进展[J].中华医学检验杂志,2008,31:1209.
[2]马东来,张少静.(德)斯特克/自身抗体及其免疫荧光模式[M].北京:北京科学出版社,2000:32-38.
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[4]冀春梅,王振明,马局凤.抗核抗体谱检测在自身免疫性疾病中的意义[J].实用医技杂志,2008,15(5):583.
[5]周淑芬,刘树业,丁 贤.134例自身免疫性肝病患者自身抗体的分析[J].天津医药,2006,8(34):534.