血液分析仪计数低值血小板的误差分析

余 蓉，邱少红，李传恒，管红霞，潘 虹 (石首市人民医院检验科，湖北 石首 434400)

血液分析仪计数低值血小板的误差分析

余 蓉，邱少红，李传恒，管红霞，潘 虹 (石首市人民医院检验科，湖北 石首 434400)

目的：探讨血液分析仪对低值血小板的计数误差。方法：2011年11月至2012年2月间用CD-1800血液分析仪检测的1670例新鲜血液常规标本中，检测出血小板数<100×109/L的血标本91例，以及同期用Sysmex XE-2100D型血液分析仪测定的5980例新鲜血液常规标本中，检测出血小板数<100×109/L的血标本397例，分别与手工血小板计数法比较检测的一致性；用同时在两机上进行复查检测的69例血小板数<100×109/L血标本,采用Kappa统计学方法分析血液分析仪对低值血小板检测的准确性。结果：全自动血液分析仪在血小板计数(0～99)×109/L时，总符合率>90%,Kappa值均>0.80。但在BPC(51～99)×109/L时XE-2100D与手工法计数血小板的符合率仅达84.6% ；CD-1800型血液分析仪在血小板计数<15×109/L时，与实际值符合率仅50%，Kappa值95%的可行限下限均<0.8。结论：全自动血液分析仪对低值血小板计数的准确性较好，但随着血小板数值的降低，其准确性有所下降。当血小板计数<15×109/L时，血液分析仪对血小板的计数有一定误差，应重视血涂片复审。有条件时建议用流式细胞术(FCM)复核。

低值血小板； 血液分析仪； 手工血小板计数法

准确计数低值血小板已成为检验医学领域一个亟待解决的问题。国际血液标准委员会(ICSH)推荐的血小板计数国际参考方法[1-2](流式细胞计数法)未在基层医院普及，所以对低值血小板的复核多为手工计数法复核。目前国际上尚未可供溯源性计量的血小板标准品，对低值血小板的复核标准也各不相同。血小板减少有真性与假性减少之分，近年来对EDTA依赖性假性血小板减少屡见报道。本研究旨在探讨本科室的复核标准，以期杜绝假性血小板减少对临床的误导，减少病人的痛苦。

1 材料与方法

1.1新鲜全血标本

收集我院2011年11月20日至2012年2月1日病房和门诊血常规检测中血小板数<100×109/L的血标本，其中CD-1800检测出91例，XE-2100D检测出397例。对血小板计数偏低的标本除用两仪器进行相互比对外，均采取手工计数法复核。复核前，须涂片瑞氏染色镜检，观察全片血小板分布情况，若有血小板聚集现象者，换用肝素抗凝管重新采集静脉血标本，用仪器和手工计数法[3]复核。患者年龄0～90岁，中位年龄46岁。男性 31例，女性 38例。采血后5h内完成检测。

1.2仪器和试剂

美国雅培CD-1800型血液分析仪，日本Sysmex XE-2100D型血液分析仪。仪器使用质控品为天津美德太平洋全血质控物，试剂为山东兰桥稀释液，溶血剂、鞘液为日本原装进口。使用前各仪器分别用原装校准品校准，并需先检测质控品，在控后，再检测新鲜全血标本。

1.3方法

新鲜全血标本经充分颠倒混匀后再经校准的CD-1800和XE-2100D型血液分析仪上分别计数血小板，并观察有无血小板报警信号出现及出现的类型。

1.4根据手工法计数的BPC计数结果进行分组

第1组：血小板计数(51～99)×109/L；第2组：血小板计数(16～50)×109/L；第3组：血小板计数(0～15)×109/L。

1.5统计学分析

应用Kappa统计学方法[4]进行数据分析。

2 结 果

各组用血液分析仪与手工计数血小板结果符合率和Kappa检验结果见表1、表2、表3。

表1 CD-1800与手工计数血小板结果比较

注：Kappa=0.894 , s=0.184 ,95%可信限下限=0.584。

表2 XE-2100D与手工计数血小板结果比较 (单位：×109/L)

注：Kappa=0.969, s=0.267 ,95%可信限下限=0.446。

表3 CD-1800与XE-2100D血小板结果比较(单位：×109/L)

注：Kappa=0.901 , s=0.218 ,95%可信限下限=0.473。

表1～3显示，无论CD-1800或XE-2100D，在BPC<100×109/L时，全自动血液分析仪与手工法计数血小板结果总符合率>90%,Kappa值均>0.80。但在BPC<15×109/L时，CD-1800与手工法计数血小板的符合率仅达50%，95%Kappa可信限下限均<0.8；在BPC<(51～99)×109/L时XE-2100D与手工法计数血小板的符合率仅达84.6%。原因可能是CD-1800本身对低值血小板的计数准确性偏低，所以科室员工对此仪器检测出的低值血小板的复核警觉性偏高；而XE-2100D符合率偏低，可能原因是对EDTA导致的假性血小板所致的血小板减少的筛查率偏低，偶然误差使其准确率偏低有关。

3 讨 论

由以上研究可以初步制定我科低值血小板的复核标准：凡发现全自动血液分析仪检测BPC<100×109/L时，均须涂片瑞氏染色镜检，观察全片血小板分布情况，若有血小板聚集现象者，均换用肝素抗凝管重新采集静脉血标本，用仪器和手工计数法复核。以排除因EDTA导致的血小板假性减少的误报率，正确指导临床诊断，避免误诊误治酿成医疗纠纷。低值血小板是正确指导临床，判断患者是否需要输注血小板的一个重要指标，所以准确的计数血小板已成为一个迫切需要解决的问题。因手工复核尚存在很多技术上的问题[5-6]，2001年ICSH推荐了间接法血小板计数的新的国际参考方法(FCM)，以弥补手工法复核的不足。我们的研究与国内许蕾等的文献报道[7]在BPC<50×109/L时，血液分析仪与FCM法的总符合率>90%,Kappa值>0.8基本相符。本研究在BPC<15×109/L时，血液分析仪与手工法计数血小板的一致性有些不足，如要求更为准确的结果而条件又具备时，则此类标本可用FCM复核。

[1]ICSH.Cytometry panel platelet counting by RBC /platelet ratio method[J].AJCP,2001，115(3):460-464.

[2]Harrison P,Ault K A,Chapman S ,et al .AN interlaboratory study of a candidate reference method for platelet counting[J].AJCP，2001，115(3):448-449.

[3]叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程[M].3版.南京：东南大学出版社，2006：136-137.

[4]颜虹，徐勇勇.医学统计学[M].北京：人民卫生出版社，2005：214.

[5]朱忠勇.准确计数血小板方法学研究进展[J].国外医学:临床生化和检验分册，2002，23(30)：131-132.

[6]从玉隆，乐家新.现代血细胞分析技术与临床[M].北京：人民军医出版社，2005：10-15.

[7]许蕾，宋颖，沈薇，等.血液分析仪计数低值血小板的误差[J].临床检验杂志，2010，28(2)：151-152.

10.3969/j.issn.1673-1409(R).2012.08.024

R446.11

A

1673-1409(2012)08-R049-03

2012-05-23

余蓉(1969-)，女，湖北石首人，副主任检验技师，硕士，主要从事临床免疫学及质量控制工作。

[编辑] 何 勇