舒筋消痛丸中阿魏酸的含量测定

张伟奇

(河南省药品审评认证中心，河南 郑州450004)

舒筋消痛丸是经批准的医院制剂(批准文号:豫药制字Z05140092)，处方由桑寄生、木瓜、当归、熟地、红花、茯苓、地骨皮、羌活、独活、乳香(制)、没药(制)、桃仁、延胡索、五加皮等14 味药物组成，具有祛风除湿、通络止通之功能，用于气滞血瘀、经络不通所致的各种痛症，对风湿、类风湿性关节炎及骨质增生症疗效显著［1］。当归为方中主要药味，阿魏酸是其有效成分之一。为了进一步提高标准，保证制剂的稳定可靠，笔者采用高效液相色谱法对制剂中的阿魏酸进行了含量测定。

1 药品、试剂与仪器

舒筋消痛丸，由桑寄生、木瓜、当归、熟地黄、红花、茯苓、地骨皮、羌活、独活、乳香(制)、没药(制)、桃仁、延胡索、五加皮等14 味药物组成，商丘市中医院提供，批号为110404，1104013，110521;阴性对照样品，商丘市中医院提供。阿魏酸对照品，中国药品生物制品检定所，批号110773－200611;乙腈，色谱纯，天津市四友精细化学品有限公司产品，批号070226101;水为自制纯化水;甲醇，分析纯，国药集团化学试剂有限公司产品，批号T20080109;磷酸，分析纯，天津市化学试剂六厂产品，批号20010902。Agilent 1260 高效液相色谱仪，美国安捷伦科技有限公司产品;色谱柱Agilent－ C18(4．6mm ×150mm，5 μm)，安捷伦科技有限公司产品;AEU－210 电子天平，湖南湘仪仪器有限公司产品。

2 方法与结果

2．1 色谱条件

Agilent－C18色谱柱(150 mm×4．6 mm，5 μm)，流动相为乙腈－0．1%磷酸溶液(19∶81)，检测波长316 nm，柱温35 ℃，体积流量1．0 mL /min，进样量10 μL。

2．2 对照品溶液的制备

精密称取阿魏酸对照品12．42 mg，置25 mL 的棕色量瓶中，加甲醇溶解，并稀释至刻度，摇匀，精密量取4 mL，置100 mL 的量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

2．3 供试品溶液的制备［2］

取供试品，研碎混匀，取约1．0 g，精密称定，置具塞锥形瓶中;精密加入体积分数70%甲醇25 mL，称定质量;加热回流30 min，放冷，再称定质量;用体积分数70%甲醇补足减失重量，摇匀，滤过;取续滤液，用0．45 μm 微孔滤膜滤过，即得。

2．4 阴性对照品溶液的制备

除当归外，其他各药按供试品处方量投料，按舒筋消痛丸工艺制成阴性对照品，然后按供试品的制备方法，制成阴性对照品溶液。

2．5 系统适应性试验

2．5．1 阴性对照试验

取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照品溶液各10 μL，按照2．1 项色谱条件，分别进样测定，记录色谱图，结果表明其他成分对阿魏酸测定无干扰。见图1。

2．5．2 线性关系考察

分别吸取对照品溶液(19．87 mg/L)1，5．0，7．5，12．5，20 μL，注入液相色谱仪，记录峰面积分值，以阿魏酸峰面积积分值对进样量进行回归，得到回归曲线Y=493．37X－33．437，r=0．999 9。结果表明其线性关系良好，线性范围为:0．019 9～0．397 4 μg。

2．5．3 精密度试验

精密吸取供试品溶液10 μL，重复进样6 次，按上述色谱条件测定峰面积。结果RSD =0．68%，表明仪器精密度良好。

2．5．4 重复性试验

精密称取同一批(批号110404)样品6 份，照2．2项下方法制备供试品溶液，按上述色谱条件进样，测定。结果:平均含量为0．136 6 mg/g，RSD =0．87%。表明本方法重复性良好。

图1 阿魏酸对照品、样品及阴性对照品色谱图

2．5．5 稳定性试验

取供试品溶液(批号110404)，分别于0，1，2，4，8，12 h 各精密吸取10 μL ，按上述色谱条件测定峰面积积分值。结果:峰面积平均值732．628，RSD=0．76%。表明供试品溶液在12 h 内稳定。

2．5．6 加样回收率试验

取已知含量的样品9 份，各约0．5 g，精密称定，分别精密加入一定量的阿魏酸对照品，照2．3 项下方法制备供试品溶液，按上述色谱条件进样，测定，计算回收率。结果见表1。

表1 加样回收实验结果

2．6 样品含量测定

按上述含量测定方法测定样品中阿魏酸含量。结果见表2。

表2 舒筋消痛丸中阿魏酸的测定结果

3 小 论

在供试品制备的过程中，曾考虑到其他样品对当归提取以及含量测定的影响［3］，考察了用不同提取方法的提取［4］，分别设计了超声与回流不同提取方法和时间梯度，结果超声提取不完全，阿魏酸仅为0．078 4 mg/g，回流30 min，提取效果较好，所以本试验供试品的处理方法为体积分数70%甲醇回流提取30 min，与《中国药典》2010 版一部当归项下阿魏酸含量测定一致。舒筋消痛丸是医院制剂，经长期临床实践证明，具有良好的疗效，但是长期以来，仅以薄层鉴别作为该药的检验标准而没有定量的质量控制标准。当归是舒筋消痛丸的主药之一，本实验用HPLC 法对舒筋消痛丸中阿魏酸的含量进行了测定。通过以上实验，建立了该制剂定量的质量控制方法，该方法稳定可靠，操作简便，专属性较强，可以作为舒筋消痛丸的质量控制标准的参考。

［1］张其凤、王守英．HPLC 测定舒筋消痛丸中延胡索乙素的含量［J］．现代中药研究与实践，2008，22(1):44－45．

［2］国家药典委员会．中华人民共和国药典:一部［M］．北京:化学工业出版社，2010:124．

［3］尹华，董晓烨．当归药材的质量标准研究［J］．中医药学刊，2005，23(8):1501－1503．

［4］王春艳，李尚禹．浓缩当归丸的提取工艺研究［J］．分子科学学报，2005，21(3):21－24．