几种杀菌剂对桃软腐病菌的室内药效试验

明倩倩，游 勇，王 闯，张志元

(1长沙健硒保生物科技有限公司，长沙410022;2长沙市植保植检站，长沙410013;3长沙学院生物工程与环境科学系，长沙410022)

桃，隶属蔷薇目，梅亚科，桃属。桃软腐病是由黑根霉菌(Rhizopus nigricans)引起初生浅褐色水渍状圆形至不规则形病斑，扩展很快，病部长出疏松的白色至灰白色棉絮状霉层，致果实呈软腐状，后产生暗褐色至黑色菌丝、孢子囊及孢囊梗[1，2]。桃采收期集中在高温的7、8月份，再加上贮运过程中易受损伤，很容易发生软腐病，造成大量烂果[3]。因此严格把关保证桃安全贮藏，研究防治桃软腐病的有效药剂，减少初侵染对桃贮藏尤为重要。本试验采用4种药剂对桃软腐病菌的抑菌能力进行研究，旨在为果园病害防治和桃贮藏前的药剂处理提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 桃软腐病病原菌分离

取长有白色霉层的桃果实，采用组织分离法，在无菌条件下，切病健交界处组织成边长为0.5 cm的小块，放在培养皿中，用灭菌的镊子夹小块桃在75%酒精中消毒10 s，再用0.1%升汞液适量表面消毒1 min，再经无菌水漂洗3次，过火焰去除部分水分后，放入培养基平板上，每个培养皿3～4块组织均匀排放，将培养皿用封口膜封好，置于28℃培养箱中倒置培养。36 h后选择培养皿中长出黑根霉的菌落，在显微镜下检测，确定为黑根霉后用接种钩挑取一小块菌丝，转入试管斜面培养基中，置于28℃培养箱中培养，待长出白色菌丝后移入冰箱中冷藏保藏[4]。

1.2 4种杀菌剂对桃软腐病菌的抑菌试验

(1)供试药剂及使用浓度。40%地无菌(阜城津金农药有限公司);20%五氯硝基苯(山西省临汾有机化工厂);硫酸铜(分析纯);生物农药水生康(长沙高新区千力农业生物科技有限公司)。

(2)不同杀菌剂对桃软腐病菌菌丝生长的影响试验

试验设5个处理，重复3次。处理1:40%地无菌2 g/L;处理2:20%五氯硝基苯2 g/L;处理3:硫酸铜(分析纯)2 g/L;处理4:生物农药水生康2 g/L;处理5:对照组(无菌水)。

采用生长速率法[5]测定杀菌剂对桃软腐病病菌的杀菌效果。首先将桃软腐病菌活化，将试管中的菌种接种到培养基中，置于28℃培养箱中培养36 h后菌种即已活化。然后，将供试药剂分别用无菌水稀释成所需的浓度待用。在灭菌培养皿中倒入PDA培养基12 mL，培养基凝固后，取100 uL杀菌剂稀释液倒入培养基中(直径为75 mm)，用三角玻棒将药液均匀涂布到培养基上。用打孔器(直径为12 mm)制取已活化的病菌菌饼，菌丝面朝下接种于表面有药的PDA培养基中央，置于28℃恒温培养箱内黑暗培养。

(3)试验结果调查。培养3 d后测量供试病菌在含不同药剂培养基上的菌落直径，与对照组比较计算各药剂处理对菌落扩展的生长抑制率[6]，分析比较不同杀菌剂对菌丝生长的影响。

2 结果与分析

2.1 不同杀菌剂对桃软腐病病菌菌丝生长的抑制效果

试验结果表明，各处理对桃软腐病菌的抑菌效果具有极显著性差异，20%五氯硝基苯2 g/L对桃软腐病菌的抑制效果最好，处理4对桃软腐病菌也有一定的抑菌作用(表1)。

表1 不同杀菌剂对桃软腐病病菌的抑制效果

2.2 不同浓度的20%五氯硝基苯的杀菌作用

根据上述不同杀菌剂培养皿中菌丝生长的情况，20%五氯硝基苯2 g/L的杀菌效果最好。为了进一步探索20%五氯硝基苯抑菌效果的最佳浓度，研究了不同浓度的20%五氯硝基苯杀菌作用影响的试验。结果表明:抑菌效果随使用浓度的提高而增强，但当浓度至2 g/L时，再提高浓度至4 g/L，抑菌效果增加值就很小了(表2)。因此，生产上使用20%五氯硝基苯最佳浓度为2 g/L。

表2 五氯硝基苯不同使用浓度的抑制效果

3 讨论与小结

20%五氯硝基苯溶液对桃软腐病的抑制效果最好，该化合物可有效地抑制菌丝的生长，最适宜的使用浓度为2 g/L。实际生产中，在冬季，桃树要进行枯枝清理并烧毁，减少初侵染来源，在春季喷施浓度2 g/L的20%五氯硝基苯溶液可以抑制病原真菌的生长，降低桃果实带菌率，从而减少桃贮运期病害的发生，减少果实的腐烂损失。

[1]方中达.植病研究法[M].北京:农业出版社，1998.117－120.

[2]刘明久，许桂芳.三种入侵植物浸提液对桃软腐病菌菌丝生长的抑制作用[J].氨基酸和生物资源，2008，30(2):9－11.

[3]张晓宇，王春生 ，赵桂芳，等.桃果实采后生理研究及贮藏保鲜技术应用进展[J].中国农学通报，2008，24(5):117－120.

[4]胡海文，杨海清，王 朋，等.桃褐腐病菌拮抗细菌的分离筛选与鉴定[J].中国农学通报，2009，25(12):195－200.

[5]郝永娟，刘春艳.几种杀菌剂对葡萄白腐病的室内外药效评价[J].现代农药，2002，1(6):34－35.

[6]钟丽娟，赵新海，张庆华，等.甘薯软腐病菌的分离鉴定及室内抑菌试验[J].山东农业科学，2009，(7):87－88.