膀胱移行细胞癌中Survivin的表达及临床意义

孙友文 宣 强 肖 俊 周林玉 诸禹平

Survivin是近来新发现的凋亡抑制蛋白家族的一员，为迄今发现的作用最强的凋亡抑制因子［1］。研究表明，Survivin与恶性肿瘤的发生发展密切相关。本研究对膀胱移行细胞癌(bladder transitional cell carcinoma，BTCC)组织中Survivin表达情况进行了检测，探讨了Survivin表达与BTCC病理分级、临床分期、淋巴结转移、复发等之间的关系，以期对BTCC的早期诊治、转移复发的监测和预后判断提供依据。

1 材料与方法

1.1 一般资料

所有实验标本均为本院2009年1月～2010年12月经病理学检查证实的BTCC组织石蜡包埋标本，共68例。男性41例，女性27例。患者年龄42～81岁，平均60.8岁。病理分级按WHO分级标准:Ⅰ级24例，Ⅱ级30例，Ⅲ级14例;临床分期按UICC-TNM标准:浅表型38例(Ta期16例，T1期22例)，浸润型30例(T2期19例，T3期11例);初发肿瘤40例，复发肿瘤28例;淋巴结阳性者17例，阴性者51例。另取10例非BTCC患者的正常膀胱黏膜组织作为对照组。

1.2 Survivin表达的检测

采用免疫组织化学SP法，SP试剂盒购于北京中山生物技术有限公司，用兔抗人Survivin多克隆抗体检测Survivin的表达，严格按照说明书进行操作。已知阳性膀胱移行细胞癌切片作为阳性对照，PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照。

1.3 结果判定

Survivin表达阳性结果判定标准:细胞胞质出现黄至棕黄色颗粒为阳性细胞，组织切片于400倍镜下计数500个细胞，阳性细胞占比≥10%为阳性片，＜10%为阴性片。

1.4 统计学方法

采用SPSS10.0统计学软件。计数资料及组间率的比较采用χ2检验，相关分析采用Spear-man等级分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 BTCC组和正常对照组Survivin的表达结果

10例正常膀胱黏膜组织中未见Survivin表达，阳性表达率为0%;而68例BTCC组织中有49例Survivin表达阳性，阳性率为72.1%，2组间差异有统计学意义(P ＜0.05)。

2.2 Survivin表达与BTCC临床病理特征的关系

BTCC组织中Survivin阳性表达率随着病理分级的增高而升高，两者之间显著正相关，Ⅰ级分别与Ⅱ级、Ⅲ级比较，Survivin阳性表达率差异有统计学意义(γ =0.402，P ＜0.05)。浅表型与浸润型、初发与复发、淋巴结转移阳性与阴性等组之间Survivin阳性表达率差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

表1 Survivin表达与BTCC临床病例特征的关系(例，%)

3 讨论

膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤，其中90%以上来自膀胱黏膜移行细胞。膀胱移行细胞癌(BTCC)具有复发率较高的特点，而且部分肿瘤复发后恶性程度增高，浸润和转移等恶性行为增强，治疗比较棘手，效果不满意。因此，研究膀胱移行细胞癌的发生、发展机制，寻找与其发生、发展密切有关，并且能够有效预测其生物学行为的分子指标，对BTCC的诊治和预后判断具有重要意义。Survivin是1997年耶鲁大学的Ambrosini等在研究效应细胞蛋白酶受体时发现的［1］。它是1种新的凋亡抑制基因，是凋亡抑制蛋白(IAP)家族中的一员，抑制凋亡的作用最强。研究表明，Survivin具有抑制细胞凋亡，调节细胞有丝分裂和参与血管生成等多重作用［2］。Survivin的表达分布具有明显的组织细胞选择性，在正常成人体内除胸腺、生殖腺中有微量表达外，所有分化成熟的组织中均无表达［3］。Survivin的表达还具有细胞周期性，只在细胞周期的 G2/M 期表达［4］。

人们随着对恶性肿瘤、细胞凋亡研究的逐步深入，认为肿瘤的发生发展与细胞凋亡的抑制有密切关系［5］。研究表明，Survivin作为作用最强的凋亡抑制因子，在恶性肿瘤的发生发展中起着重要作用，包括膀胱癌在内的大多数恶性肿瘤组织中均存在Survivin显著表达［6］，如胃癌、卵巢癌、膀胱癌、鼻咽癌［7］等。本研究结果显示，10例正常膀胱黏膜组织中未见Survivin表达，而68例BTCC组织中Survivin表达阳性率为72.1%，显著高于正常组(P ＜0.05)，提示 Survivin在BTCC组织中的表达显著上调。其机制可能是BTCC组织中，Survivin在转录水平被 NF-KB、AKT、SAST-3等因子上调，导致转录、翻译的蛋白产物增多。Survivin表达上调抑制了异常突变细胞的凋亡，从而扰乱了细胞的正常生长和凋亡途径，促使异常突变细胞逃离监控，对BTCC的发生发展起一定的促进作用。

Survivin的表达强度与BTCC的病理分级、临床分期之间的相关性，不同文献报道不尽一致。本研究表明，Survivin的阳性表达率与BTCC的病理分级、临床分期密切相关。随着BTCC病理分级和临床分期的增高，Survivin的阳性表达率也逐渐升高;Ⅰ级分别与Ⅱ级、Ⅲ级比较及浅表型与浸润型比较，均存在显著性差异(P＜0.05)，前者均显著低于后者。由于Survivin特异的表达于细胞周期的G2/M期，在此期内通过与细胞有丝分裂纺锤体的微管结合，参与对细胞基因的转录调节，使肿瘤细胞异常增殖和分化程度降低［8］。另有研究表明，Survivin还参与新生血管的生成。Survivin高表达主要是促进血管内皮生长因子诱导的内皮细胞增殖和三维毛细血管网的形成［9］。肿瘤的生成和发展依赖于新生血管的生成，新生血管的生成是肿瘤细胞生长、侵袭、转移的必要条件之一。本研究中，淋巴结转移阳性的BTCC组织中Survivin阳性表达率显著高于淋巴结转移阴性者(P＜0.05)，提示Survivin表达与BTCC的淋巴结转移密切相关。Survivin可能通过参与肿瘤新生血管的形成调节在肿瘤转移过程中发挥作用。本研究结果还显示，复发性BTCC的Survivin阳性表达率显著高于初发者(P＜0.05)，提示Survivin表达与BTCC的复发也存在密切关系;可能与BTCC复发后病理分级、临床分期会增高有关。

本研究表明，Survivin阳性表达率随着BTCC组织病理分级的增高，临床分级的增加，淋巴结转移阳性和复发等恶性行为的发生而明显升高，与文献报道基本一致［10］。Survivin阳性表达率越高，预示 BTCC可能有较高的恶性度和侵袭性，较易发生转移和复发，而且预后不良。因此，Survivin可以作为判断BTCC发生发展、转移、复发及预后情况的指标之一。通过分子靶向治疗手段抑制肿瘤组织中Survivin表达而促使肿瘤细胞凋亡可能是临床治疗BTCC的1个新方向。

［1］Ambrosini G，Adida C，Altieri DC.A novel anti-apoptosis gene，survivin，expressed in cancer and lymphoma〔J〕.Nat Med，1997，3(8):917.

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［3］Lehner R，Lucis MS，Jarboc EM，et al.Immunohistochemical localization of the IAP protein survivin in bladder mucosa and transitional cell carcinoma〔J〕.Appl Immunohistochem Molmrphol，2002，10(2):134.

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［9］Mesri M，Mbrales RM，Ackemann EJ，et al.Suppression of vascular endothelial growth factor mediated endothelial cell protection by surviving targeting〔J〕.Am J Pathol，2001，158(5):1757.

［10］袁源湖，刘佛林，邵晓峰，等.凋亡抑制基因存活素在膀胱癌组织中的表达及意义〔J〕.实用癌症杂志，2007，22(6):574.