兽用生物制品支原体检验项近5年抽检情况分析

刘轶秋，徐 磊，张瑞婷

(中国兽医药品监察所，北京 100081)

近几年，随着兽药市场需求的不断加大，兽用生物制品的产量和品种也在持续增长。支原体污染是兽用生物制品生产中的一个常见问题，监督抽检对保障产品质量有着重要作用。为了解全国兽用生物制品支原体污染情况，笔者汇总了近5年(2007-2011年)中国兽医药品监察所抽检的全国26家企业生产的22个品种141批制品的支原体检验情况，并对抽检结果进行了分析，提出了提高生物制品支原体质量监测工作的几点建议。

1 总体抽检结果

1.1 各年度生物制品支原体检验项合格率 各年度合格率见表1。抽检的141批生物制品中支原体检验项合格批数为113批，不合格28批，合格率为80.1%。

表1 各年度生物制品支原体检验项抽检情况

1.2 不同品种生物制品支原体检验项合格率 抽检的22种生物制品中有16种支原体检验抽检合格率100%，占抽检品种的72.7%(表2)。

表2 不同品种生物制品支原体检验项的抽检情况

1.3 各年度生物制品企业支原体检验项抽检情况被抽检的26家企业生产的141批生物制品中，有8家生产企业存在支原体检验不合格项，不合格企业占被抽检企业总数的30.8%。

2 结果分析

2.1 支原体检验抽检合格率逐年提高 2007-2011年，中监所抽检的生物制品企业覆盖了全国17个省、市、自治区，包括北京、河北、山东、辽宁、黑龙江、吉林、江苏、浙江、江西、湖北、湖南、四川、重庆、甘肃、福建、青海、新疆。2007-2010年抽检的生物制品中，均有不同批次的支原体检验项不合格制品，尤以2008年合格率最低，为63.3%。2009年开始合格率有所提高，2009年、2010年、2011年制品合格率分别为75.0%、86.4%、100%。

2.2 支原体检验抽检覆盖面有待提高(表3) 目前检验项目中涉及支原体检验的生物制品共82种，而2007-2011年共抽检品种22种，抽检品种仅占全部品种的26.8%。各年度抽检产品种类不多，禽、猪、羊和犬用疫苗抽检比例不均衡，且有很多种类产品多年未进行监督抽检。

表3 生物制品抽检品种统计 个

2.3 支原体检验不合格品种较为集中 抽检的141批生物制品中，禽用疫苗54批，全部合格。猪用疫苗37批，14批不合格;羊用疫苗14批，9批不合格;其他制品36批，5批不合格。支原体检验不合格制品集中在猪用疫苗、羊用疫苗和其他类制品上，共计6个品种:狂犬病活疫苗、水貂犬瘟热活疫苗、猪乙型脑炎活疫苗、山羊痘活疫苗、猪伪狂犬病活疫苗(SA215株)、猪传染性胃肠炎-流行性腹泻二联活疫苗(图1)。因此，应对此类制品加强监督抽检。

图1 6种不合格制品抽检批数与合格批数比例图

2.4 企业越来越重视生物制品支原体污染问题2007年开始出现不合格制品企业，被抽检的6家企业中有1家企业存在不合格制品;2008年被抽检的14家企业中有6家企业存在不合格制品，不合格企业占抽检企业的42.8%，达到近几年的最高峰。生物制品污染支原体会给企业带来巨大的经济损失，越来越多的企业开始重视支原体污染问题。故自2008年之后被抽检的生物制品不合格企业成下降趋势，2009年不合格企业占被抽检企业的40%，2010年不合格企业占被抽检企业的12.5%，直至2011年被抽检的10家企业中，不合格企业为0家。

3 建议

3.1 制定合理的监督计划，加强监督抽检力度为了更好的监测生物制品质量，应制定科学的抽检计划，加大抽检的覆盖面，使生物制品抽检率上升到3%～5%。增加抽检产品的种类，使抽检覆盖品种达到80%以上。加强兽用生物制品流通环节的监督抽检。对抽检不合格的企业重点监督，对不合格的产品加大抽检数量。定期召开全国生物制品监督抽检结果分析会议，分析抽检工作中存在的问题，充分发挥监督工作的技术效能。

3.2 建立并完善生物制品信息溯源监督机制 将国内各生物制品企业信息、生产基本情况组成兽药监管信息发布平台，将产品抽检结果及时在网上公布。对不合格产品、抽检存在不合格产品的企业在网上公示，为生物制品行业提供及时准确的监控信息，及时反映全国兽用生物制品的整体质量状况，为增强政府宏观调控能力提供参考。

3.3 提高兽用生物制品质量，防止支原体污染 生物制品的支原体污染［1］是生产中比较常见的问题，常给企业带来巨大的经济损失。引起支原体污染的原因很多，如原材料本身受到污染、人员操作不慎、实验室交叉污染等因素。实验室应制定严格的管理制度，定期对质检部门检验人员进行培训，不断提高检验水平操作技能，强化无菌意识，严格按照GMP规定和实验室规范进行操作。

3.4 开展检验新方法的研究 根据《中国兽药典》规定，支原体检验采用培养法［2-3］，此种方法是目前的“金标准”，但其检验周期较长，为29 d，操作也较繁琐。因此很多生物制品企业在做相关产品检验时，为了等待检验结果，而不得不影响产品的销售时间。为了使支原体检验更及时、准确，还应不断开展其他方法的研究与验证。目前可供参考的方法如 DNA 荧光染色法［4-5］、PCR 法［6］、瓜氨酸检验法［7］等，这些方法各有利弊，最终哪一种方法更及时、准确，适于操作，并能最终取代培养法，还需进行大量的实验研究来确证。

［1］朱庆虎，刘兰刚，康二勇.生物制品中的支原体污染［J］.畜牧兽医科技信息，2010，6:9-11.

［2］中国兽药典委员会.中华人民共和国兽药典二○○五年版三部［S］.

［3］中国兽药典委员会.中华人民共和国兽药典二○一○年版三部［S］.

［4］李晶梅，张 萍，秦红刚，等.DNA荧光染色和 PCR技术在PRRSV冻干疫苗中支原体检测的应用［J］.中国预防兽医学报，2011，33(12):957-960.

［5］余 华，杜永凤，严玉宝，等.DNA荧光染色法和培养法在支原体检测中的比较［J］.安徽农业科技，2010，38(8):4039-4041.

［6］李菁竹.支原体污染的巢氏PCR检测法的摸索及其初步验证［D］.武汉:武汉生物制品研究所，2010.

［7］梁少东，黄小乐，严 媛，等.一种快速判定细胞培养中支原体污染的方法——瓜氨酸测定法［J］.生物技术通讯，2008，19(6):892-894.