薏苡仁及其麸炒品对动物胃肠动力的影响

李 爽，沈晓庆，章 琦，伊丽波，贾天柱＊

（1.辽宁中医药大学 药学院，辽宁 大连 116600；2.国家中医药管理局中药炮制重点研究室，辽宁省中药炮制工程技术研究中心，辽宁 大连 116600）

薏苡仁，性甘、淡、凉，归脾胃肺经，具有健脾止泻、利水渗湿之功效［1］。《药品化义》载 ：“能健脾阴，大益肠胃，主治脾虚泄泻。”中药炮制学提出麸炒薏苡仁增强健脾止泻作用，用于脾虚泄泻，如治疗脾虚泄泻食少便溏的参苓白术散。而生薏苡仁更善于清热利水除湿，主治小便不利，湿热痹症，如湿热痹颗粒，且二者均被《中国药典》收录。本研究旨在了解薏苡仁炮制前后对动物胃肠动力的影响及其比较，以探讨其治疗脾虚泄泻的机制和炮制工艺的原理意义，为药品的生产和临床应用提供实验依据。

1 仪器＼试剂与实验动物

1.1 实验仪器

SUNRISE酶标仪：瑞士TECAN公司；UV－1800型紫外可见分光光度计：北京瑞利分析仪器公司；HH－4型数显恒温水浴锅：国华电器有限公司；TGL－16C型离心机：上海安亭科学仪器厂；电子天平：上海光正医疗仪器有限公司。

1.2 药材与试剂

薏苡仁生品购自四川、贵州，经本校中药鉴定教研室翟延君教授鉴定为禾本科；植物薏苡Coix lacryma－jobi L.var.mayuen（Roman.）Stapf的干燥成熟种仁，薏苡仁麸炒品，按照国家药典规定于中药炮制实验室自制；利血平注射液：购自天津金耀氨基酸有限公司，批号： 1003011；5%炭末混悬液（用10%的阿拉伯胶配制）；大鼠血管活性肠肽（VIP）酶联免疫检测试剂盒、大鼠胃泌素（GAS）酶联免疫检测试剂盒、大鼠胃动素（MTL）酶联免疫检测试剂盒、大鼠生长抑素（SS）酶联免疫检测试剂盒均购自美国R＆D公司。

1.3 实验动物

昆明种小鼠，雌雄各半，体重18～22g，由大连医科大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK辽2008－0002。SD大鼠，雌雄兼用，体重200～250g，由大连医科大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK辽2008－0002。

2 实验方法与结果

2.1 薏苡仁、麸炒薏苡仁混悬液制备

生品混悬液的制备：取薏苡仁生品，粉碎，将过120目筛粉末加蒸馏水制成浓度为0.8g·mL－1的生品混悬液。制品混悬液的制备：取麸炒薏苡仁样品，粉碎，将过120目筛粉末加蒸馏水制成浓度为0.8g·mL－1的制品混悬液。

2.2 统计处理

2.3 薏苡仁、麸炒薏苡仁混悬液对正常及利血平致脾虚小鼠肠推进和胃排空的测定［2，3，4］

60只小鼠随机数字表法分为6组：空白对照组A，正常小鼠薏苡仁生品混悬液组（0.8g／mL）B，正常小鼠麸炒薏苡仁混悬液组（0.8g／mL）C，脾虚小鼠薏苡仁生品混悬液组（0.8g／mL）D，脾虚小鼠薏苡仁生品混悬液组（0.8g／mL）E和利血平模型组F，10只／组，除空白对照组A和利血平模型组F外均按0.1mL／10g体重剂量灌胃给药，空白对照组和模型组给予等体积的生理盐水。连续灌胃7天后，除空白对照组外各给药组在给药同时还皮下注射利血平，注射用量为0.15mg／kg。模型组小鼠皮下注射利血平，注射用量为0.15mg／kg。每天给药1次，连续7天，末次给药前禁食不禁水24h。第7天给予生理盐水或给药及注射利血平30min后，灌胃给予小鼠新鲜配制的5%炭末混悬液。10min后，脱颈椎处死小鼠，开腹，结扎胃贲门和幽门，取胃，用滤纸拭干后称全重，然后沿胃大弯剪开胃体，洗去胃内容物后拭干，称净重。以胃全重和胃净重的差值为胃内残留物重，计算胃内残留物占所灌炭末混悬液重量的百分比为胃内残留率。结果见表1。同时迅速取出小肠，轻轻剥离肠系膜后铺平，测量小肠全长与炭末混悬液从幽门括约肌推至小肠末端的距离。以幽门至黑色炭末混悬液前沿的距离占幽门至盲肠部全长的百分率为小肠推进率。结果见表2。

表1 薏苡仁、麸炒薏苡仁混悬液对正常及脾虚小鼠肠推进的测定 （）

表1 薏苡仁、麸炒薏苡仁混悬液对正常及脾虚小鼠肠推进的测定 （）

注：与空白组比较，△P＜0.05；与模型组比较，＊P＜0.05

组别 n 小肠推进率（%）A 10 57.14±1.06正常薏苡仁生品组B 10 58.93±3.01正常薏苡仁麸炒组C 10 60.05±2.48脾虚薏苡仁生品组D 10 50.55±5.16＊△脾虚薏苡仁麸炒组E 10 56.63±4.05＊△脾虚模型组F 10 29.67±10.13空白对照组△

由表中数据可知，模型组小鼠相对于空白组小鼠小肠推进率明显降低，与空白组比较有显著性差异（P＜0.05）；生薏苡仁混悬液组和麸炒薏苡仁混悬液组也可明显提高利血平致脾虚小鼠小肠推进率，与模型组比较有显著性差异（P＜0.05）；薏苡仁麸炒品混悬液对小鼠小肠推进率的提高影响强于薏苡仁生品，且二者具有显著性差异（P＜0.05）；但是薏苡仁生品及麸炒品对于正常小鼠的小肠推进率影响无显著性差异。

表2 薏苡仁、麸炒薏苡仁混悬液对正常及脾虚小鼠胃排空的测定（）

表2 薏苡仁、麸炒薏苡仁混悬液对正常及脾虚小鼠胃排空的测定（）

注：与模型组比较，＊P＜0.05；与空白组比较，△P＜0.05

组别 n 胃排空率（%）A 10 58.42±3.02正常薏苡仁生品组B 10 59.67±1.17正常薏苡仁麸炒组C 10 60.45±4.43脾虚薏苡仁生品组D 10 46.51±6.26＊脾虚薏苡仁麸炒组E 10 51.63±7.05＊脾虚模型组F 10 28.98±10.83空白对照组＊△

模型组小鼠胃残留率相对于空白组小鼠明显升高，与空白组比较有显著性差异（P＜0.05）；薏苡仁生品混悬液组和薏苡仁麸炒品混悬液组也可明显降低利血平致脾虚小鼠胃残留率，与模型组比较有显著性差异（P＜0.05）；薏苡仁麸炒品混悬液对小鼠胃排空率的降低作用强于薏苡仁生品，且二者具有显著性差异（P＜0.05）；但薏苡仁生品及麸炒品对正常小鼠的胃排空率的影响无显著性差异。

2.4 薏苡仁、麸炒薏苡仁混悬液对脾虚小鼠腹泻指数以及脾虚指数的测定

2.4.1 薏苡仁、麸炒薏苡仁混悬液对脾虚小鼠腹泻指数的测定

40只小鼠随机数字表法随机分为4组：空白对照组A、脾虚模型组B、脾虚小鼠生薏苡仁混悬液（0.8g／mL）组C、脾虚小鼠麸炒薏苡仁混悬液（0.8g／mL）组D，10只／组，C、D组按0.1mL／10g体重剂量灌胃给药，A、B组灌喂等体积生理盐水，连续灌胃7天后，除空白对照组外各给药组在给药同时还皮下注射利血平，注射用量为0.15mg／kg。模型组小鼠皮下注射利血平，注射用量为0.15mg／kg。每天给药1次，连续7天，第7天给予生理盐水或给药及注射利血平后，把小鼠放在单个放有滤纸的鼠笼内，每隔1h换滤纸并记录小鼠稀粪点数，连续观察5h，比较组间腹泻指数。根据文献［5］，粪便次数以每粒或每堆为1次。

检测指标：腹泻指数＝稀便率×稀便级。稀便率＝每只动物所排稀便数与总便数之比。稀便级＝以稀便污染滤纸形成污迹面积的大小等级，分为4级，见表3。

表3 小鼠粪便分级

统计时先逐个统计每一堆稀便的级数，然后将该鼠所有稀便级数相加除以稀便次数，得到稀便的平均级数（稀便级数直径的测量：粪便形状为圆形则直接测量直径；若粪便形状为椭圆形则测量最长和近似圆的直径，相加除2）。结果见表4。

由表中数据可知，脾虚模型小鼠脾虚指数大于空白组，且具有显著性差异（P＜0.05），薏苡仁生品混悬液组和生品混悬液组与脾虚模型组比较均可降低腹泻指数，且麸炒品作用强于生品，均有显著性差异（P＜0.05）。

表4 薏苡仁，麸炒薏苡仁混悬液对脾虚小鼠腹泻指数的测定（）

表4 薏苡仁，麸炒薏苡仁混悬液对脾虚小鼠腹泻指数的测定（）

注：与空白组比较，＊P＜0.05；与模型组比较，△P＜0.05

A 10 0±0 0±0 0±0模型组B 10 1±0＊ 1.9±2.13＊ 1.9±2.13＊薏苡仁生品组C 10 0.87±3.24＊△ 1.7±5.24＊△1.48±4.76＊△薏苡仁麸炒品组D 10 0.63±2.89＊△ 1.1±2.77＊△0.69±2.81组别 只数 稀便率 稀便级 腹泻指数空白组＊△

2.4.2 薏苡仁、麸炒薏苡仁混悬液对脾虚小鼠脾虚指数的测定

将“2.4.1”实验记录完腹泻指数后的小鼠脱椎处死，解剖腹部，取出脾脏剥离表面脂肪，准确称重并计算脾指数：

脾指数＝脾重量（mg）／小鼠重量（g）×10，结果见表5。

表5 薏苡仁，麸炒薏苡仁混悬液对脾虚小鼠脾虚指数的测定（）

表5 薏苡仁，麸炒薏苡仁混悬液对脾虚小鼠脾虚指数的测定（）

注：与空白组比较，＊P＜0.05；与模型组比较，△P＜0.05

A 10 448±10.30 31±9.89 1.45±9.98模型组B 10 388±8.21＊ 28±3.57＊ 1.36±4.76＊薏苡仁生品组C 10 401±3.11＊△ 29±2.88＊△ 1.38±2.97＊△薏苡仁麸炒品组D 10 436±7.62＊△ 30±3.51＊△ 1.44±5.80脾指数空白组组别 只数 脾重量（mg） 体重（g）＊△

由表中数据可知，利血平致脾虚模型组小鼠脾指数低于空白组，具有显著性差异（P＜0.05），薏苡仁麸炒品和生品与模型组比较均可提高脾指数，且麸炒品作用强于生品，具有显著性差异（P＜0.05）。

2.5 薏苡仁、麸炒薏苡仁混悬液对脾虚大鼠胃肠激素的测定［6］

40只大鼠随机分为4组：空白对照组A，薏苡仁生品混悬液组（0.8g／mL）B，薏苡仁麸炒品混悬液组（0.8g／mL）C，和利血平模型组（0.5mg／kg）D，每组10只，各给药组均按0.7mL／100g体重剂量灌胃给药，空白对照组给予等体积的生理盐水，连续7天后，除空白对照组外各给药组在给药同时还腹腔注射利血平，注射用量为0.5mg／kg。每天给药1次，连续7天，末次给药前禁食不禁水24h。造模成功后，用眼眶取血法取血4mL。将2mL移至含10%肝素的EP管中，用高速台式离心机3 000转离心10min，取上清液即为血浆样品，转移至新EP管中，－20℃保存。剩余血液移入EP管中，离心10min（3 000转／min），取上清液即为血清样品，转移至新EP管中，－20℃保存。用ELISA试剂盒测定血浆中胃动素 （MTL）和血管活性肠肽（VIP）的含量；用ELISA试剂盒测定血清中胃泌素（GAS）和生长抑素（SS）的含量。具体操作按照试剂盒内说明进行。结果见表6。

表6 薏苡仁、麸炒薏苡仁混悬液对脾虚大鼠血浆MTL、VIP和血清GAS、SS含量的测定（）

表6 薏苡仁、麸炒薏苡仁混悬液对脾虚大鼠血浆MTL、VIP和血清GAS、SS含量的测定（）

注：与模型组比较，＊P＜0.05；与空白组比较，△P＜0.05

组别 n MTL（ng／L） VIP（ng／L） GAS（ng／L） SS（μg／L）8±15.75模型组B 10 11.02±0.49△ 76.82±8.91△ 110.17±17.96△ 109.54±8.51△薏苡仁生品组C 10 13.92±3.38△＊ 63.35±9.71△＊ 112.51±13.56△＊ 110.60±8.27△＊薏苡仁麸炒品组D 10 15.46±1.16△＊ 58.22±15.21△＊ 118.73±8.71△＊ 116.86±15.31空白组 A 10 16.20±3.12 51.54±6.07 127.36±9.05 118.0△＊

ELISA法检测各组大鼠血浆中MTL、VIP和大鼠血清中GAS、SS的含量，大鼠脾虚造模后，与空白组相比大鼠血浆中MTL含量显著降低，VIP含量显著升高。血清中GAS和SS含量均有显著降低。薏苡仁生品及麸炒品混悬液组均可以升高血浆中MTL含量，降低血浆中VIP含量，并升高血清中GAS和SS的含量。在MTL含量测定中薏苡仁生品组及麸炒品组与模型组均有显著性差异（P＜0.05）；在VIP含量测定中薏苡仁生品组及麸炒品组与模型组均有显著性差异（P＜0.05）；在GAS和SS含量测定中仅麸炒薏苡仁组与模型组有显著性差异（P＜0.05），但薏苡仁生品组与模型组之间未见显著性差异。

3 讨论

中医理论中提出，脾为后天之本，乃气血生化之源。脾胃虚弱，则受纳运化水谷失职，导致机体胃脘胀痛，腹痛，腹胀等症［7］。中药炮制理论中提出，薏苡仁生品长于利水渗湿，麸制后则长于健脾止泻，因此本次实验从脾虚病证入手，考察薏苡仁及其麸炒品对脾虚小鼠（大鼠）胃肠运动影响并进行比较，以便进一步解析薏苡仁经过麸炒后如何增强健脾止泻的功效。

利血平造成动物脾虚模型是较经典的方法之一，它所表现出的症状与临床脾虚症状十分相似，在一定程度上反映了与脾虚类似的病理变化，并且具有条件易控制、模型较稳定的特点。因此在本次实验中我们选择给动物注射利血平，造成脾虚模型，以便能更准确更真实地反应薏苡仁生制品对脾虚小鼠（大鼠）病症的影响。本次实验中利血平模型动物出现了脾虚证典型的摄食量减少，被毛粗糙，自发活动减少，倦卧嗜睡，便溏等症，说明此次利血平造模成功。

关于薏苡仁生品及麸炒品混悬液对利血平致脾虚小鼠肠推进率和胃排空的影响实验结果可以看出，薏苡仁生制品均可提高脾虚模型小鼠小肠推进率和胃排空率，麸炒薏苡仁混悬液较生品混悬液效果更好，但薏苡仁生制品对正常小鼠的小肠推进率和胃排空率无明显作用。说明炮制之后薏苡仁对小鼠胃肠促进作用有所提高，这一差别的药理机制还有待于我们进一步研究。

关于薏苡仁生制品对于脾虚小鼠的腹泻指数和脾指数的影响实验结果可以看出薏苡仁生制品均可降低脾虚小鼠的腹泻指数，提高脾虚小鼠的脾指数，且麸炒品作用明显强于生品。进一步验证了薏苡仁麸炒后健脾止泻作用增强的炮制原理。

脾胃学说从宏观把握脾胃生理病理规律，胃肠激素则补其不足，从微观入手。脾胃学说与胃肠激素两者结合，互补不足、相辅相成，为脾胃病的生理病理研究提供更好的研究思路8。脾虚证是中医脾胃证候中的常见证型，患者常因素体脾虚或饮食不节、情志因素、劳逸失调等原因引起脾胃的功能衰弱或不足。胃肠激素是由散在分布于消化道的内分泌细胞和肠神经系统神经元所分泌的起激素作用的生物活性肽，它们主要分布存在于胃肠道中［9］。许多胃肠激素对消化道运动有促进或抑制作用。因此在本次实验中，我们选择了MTL、VIP、GAS、SS这四个比较有代表性的胃肠激素，从微观层面揭示薏苡仁生制品对脾虚证相关胃肠运动的作用机制，为临床治疗脾虚证提供胃肠激素评价指标和依据。胃动素（MTL）是由22个氨基酸组成的直链多肽，具有促进胃肠收缩及小肠分节运动提高食管下括约肌紧张性的作用［10］。研究表明MTL与胃肠动力障碍密切相关。胃泌素（GAS）主要由胃窦和十二指肠的G细胞分泌，是由7个氨基酸组成的多肽，几乎对整个胃肠道均有作用，能刺激胃酸、胃蛋白酶的分泌，营养胃黏膜，促胃肠肌收缩，从而促进胃肠运动。血管活性肽（VIP）是调节消化系统功能的重要胃肠激素之一，它是由28个氨基酸组成的多肽。VIP具有舒张血管括约肌，刺激胰液和肠液分泌，保护肠粘膜，调节胃肠吸收等功能。血浆中VIP的含量，在一定程度上可反映胃肠道的运动状态。生长抑素（SS）是存在于胃黏膜、胰岛、胃肠道神经、垂体后叶和中枢神经系统中的肽激素。它能够抑制胃酸分泌、胃蛋白酶和胃泌素释放，进而抑制胃肠蠕动，并且还能抑制下丘脑及脑垂体中促生长素的释放。生长抑素能够抑制生理性内外分泌反应，抑制胃IMC和胃排空，抑制回肠和胆囊收缩以及抑制肠道内容物转运。利血平造模后出现SS升高，进而起到抑制大鼠胃肠蠕动以及回肠和胆囊收缩作用，导致消化功能抑制，而出现胃肠动力不足［11］。

实验结果表明脾虚模型组大鼠与空白组相比大鼠血浆中MTL含量显著降低，VIP含量显著升高。血清中GAS和SS含量均有显著降低。薏苡仁及其麸炒品能明显改善脾虚大鼠的状态，并均可升高血浆中MTL含量，降低血浆中VIP含量，在MTL和VIP含量测定中薏苡仁麸炒品作用强于生品，但GAS和SS含量测定中仅麸炒薏苡仁组与模型组相比有所提高，但薏苡仁生品组与模型组之间未见显著性影响。同为一种药材，但疗效有所不同，可能正是由于辅料麦麸的参与，在一定程度上改变了薏苡仁化合物的质与量造成的，对这一方面的研究还有待于我们更进一步考察。这一结果也为我们进一步研究薏苡仁生熟的异同提供了一个研究思路。

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