大豆皂甙对糖尿病大鼠心、肝、肾组织细胞酶活性作用的影响

白 雪，石 搏，王元春，黄可欣＊

（1.吉林大学白求恩医学院 形态学中心，吉林 长春130021；2.中国解放军第二零二医院；3.吉林大学中日联谊医院）

我国有悠久的大豆栽培历史，大豆产品是我国人民日常生活不可缺少的食品。大豆不仅富含优质蛋白质和油脂，且还含有大量具有生理活性的物质，包括大豆皂甙、大豆磷脂、低聚糖类等［1］；其中对大豆皂甙的研究，近年来有资料表明大豆皂甙能降低血糖、保护心血管系统、抗癌症以及抗衰老作用［2］，但大豆皂甙对糖尿病大鼠心、肝、肾组织细胞酶活性的研究在国内外尚未见相关报道，本实验旨在观察大豆皂甙对糖尿病大鼠心、肝、肾的作用，为大豆皂甙广泛应用于临床和预防保健提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物和主要试剂 190－210g健康雄性Wistar大鼠45只，由吉林省药品检验所提供（合格证号960101032）；大豆皂甙（SS）由吉林省中医中药研究所提供；实验用大豆皂甙用生理盐水稀释；链脲佐菌 素 （STZ）购 于 Sigma 公 司、GOT、GPT、GLDH、ICDH、CK、LDH、HBDH、LAP、AKP试剂盒购于南京建成生物有限公司。

1.2 糖尿病模型制备 在实验分组前，首先制备糖尿病模型，随机取实验动物35只，腹腔注射STZ（用新配制的枸橼酸缓冲液溶解）50mg／Kg；48小时后采尾血测空腹血糖，浓度大于16.7mmol／L为模型复制成功［3］，该模型成功30只。

1.3 实验分组及给药 取未造模的10只动物做正常对照组，造模成功的30只动物随机分为糖尿病对照组（15只）、大豆皂甙给药组（15只），大豆皂甙给药组每日灌胃大豆皂甙10mg／Kg，正常对照组及糖尿病对照组均每日给与等剂量生理盐水，连续给药3个月。在实验过程中糖尿病对照组动物死亡4只、大豆皂甙给药组动物死亡1只。

1.4 实验后的处理 各组均取10只动物取材，实验结束次日清晨处死，称量体重。取心、肝、肾组织50mg，加2.0ml pH7.4PBS，手动匀浆，2000g离心，留上清待测［4］；测试仪器为日本日立牌7150型生化自动分析仪检测。

1.5 统计学分析 大鼠体重及心、肝、肾组织的各指标（GOT、GPT、GLDH、ICDH、CK、LDH、HBDH、LAP、AKP）均以表示，应用SPSS19.0统计软件进行统计学处理，多个样本均数间比较采用方差分析。

2 结果

2.1 大鼠的体重 对照组：大鼠精神状态好、皮毛光滑、体重明显增加、反应灵敏；糖尿病组：大鼠明显消瘦，精神萎靡，毛皮无光泽，反应迟钝。大豆皂甙给药组：大鼠体重、精神状态、毛皮光泽和反应度较对照组差，但明显好于糖尿病组。

2.2 大鼠心肌组织酶活力的变化检测 检测心肌组织可见GOT、GPT、GLDH、ICDH、CK值在对照组、大豆皂甙给药组和糖尿病模型组呈递减趋势（P＜0.01），LDH、HBDH、LAP、AKP在组间无显著性差异（P＞0.01）。见表1。

表1 各组心肌组织各指标的比较（n＝10，，U／g）

表1 各组心肌组织各指标的比较（n＝10，，U／g）

＊P＜0.01compared with control group；＃P＜0.01compared with ss treatment group

Group Control Diabetic model ss treatment GOT 46.32±3.14 20.19±2.85＃ 32.47±5.31＊GPT 8.62±1.74 4.31±1.28＃ 6.13±2.08＊LDH 348.23±4.86 320.17±5.46 314.52±4.29 HBDH 287.19±2.37 293.44±3.56 290.37±2.95 LAP 0.72±0.08 0.69±0.11 0.67±0.14 GLDH 3.45±0.98 1.77±0.48＃ 1.41±0.72＊ICDH 28.26±1.38 11.47±2.31＃ 20.13±1.55＊CK 569.75±4.39 328.71±3.22＃ 526.93±4.76 AKP 1.34±0.07 1.28±0.13 1.31±0.08

2.3 大鼠肝脏组织酶活力的变化检测 检测肝组织糖尿病模型组与对照组、大豆皂甙给药组比较GOT、GPT显著升高（P＜0.01），对照组与大豆皂甙给药组无显著差异（P＞0.01）；大豆皂甙给药组与对照组、糖尿病模型组比较LDH、HBDH、LAP和ICDH明显降低（P＜0.01），对照组与糖尿病模型组无显著差异（P＞0.01）；GLDH、CK、AKP在组间无显著性差异（P＞0.01）。见表2。

表2 各组肝脏组织各指标的比较（n＝10，，U／g）

表2 各组肝脏组织各指标的比较（n＝10，，U／g）

＊P ＜0.01compared with Diabetic model group；＃P ＜0.01 compared with ss treatment group

Group Control Diabetic model ss treatment GOT 70.36±2.43＊ 121.18±3.91 71.28±2.39＊GPT 65.71±3.65＊ 135.74±2.58 71.69±3.17＊LDH 452.15±5.63＃ 446.92±5.81＃ 357.13±6.21 HBDH 172.34±4.19＃ 178.81±3.67＃ 127.36±5.22 LAP 0.62±0.11＃ 0.58±0.13＃ 0.36±0.09 GLDH 10.17±0.86 9.65±0.34 9.32±0.87 ICDH 33.38±1.06＃ 31.42±2.07＃ 22.09±1.31 CK 12.36±2.51 11.09±1.83 13.09±2.59 AKP 0.33±0.01 0.37±0.04 0.31±0.03

2.4 大鼠肾组织酶活力的变化检测 检测肾组织可见GOT、LAP、ICDH、CK值在对照组、大豆皂甙给药组和糖尿病模型组呈递减趋势（P＜0.01），GPT、GLDH、LDH、HBDH、AKP在组间无显著性差异（P＞0.01）。见表3。

表3 各组肾脏组织各指标的比较（n＝10，，U／g）

表3 各组肾脏组织各指标的比较（n＝10，，U／g）

＊P＜0.01compared with control group；＃P＜0.01compared with ss treatment group

Group Control Diabetic model ss treatment GOT 21.35±2.35 6.58±1.16＃ 12.26±1.74＊GPT 2.46±0.37 2.35±0.61 2.42±0.53 LDH 95.34±3.21 89.35±2.41 98.26±3.54 HBDH 115.31±1.12 108.34±1.68 100.86±3.52 LAP 18.89±1.67 11.26±2.48＃ 13.19±1.56＊GLDH 12.39±2.15 11.88±2.24 12.05±3.01 ICDH 13.56±1.82 8.53±1.39＊ 8.11±2.08＊CK 23.83±2.47 13.25±2.17＃ 15.38±1.61＊AKP 70.15±2.36 67.27±3.14 68.81±2.73

3 讨论

大豆皂甙有降血脂、抗氧化、抑制肿瘤、抗血栓、抗病毒、免疫调节、减肥、调节糖代谢等多种生物活性［5－8］。以往研究还表明大豆皂甙具有降血糖及促进胰岛素分泌的作用［9］。本实验在这些研究的基础上进一步研究大豆皂甙对糖尿病大鼠心、肝和肾组织细胞酶活性的变化，观察大豆皂甙对糖尿病时心、肝和肾的损伤具有一定的保护作用。糖尿病时它的继发损伤多见于心、肾，而肝脏也是它的累及器官，主要是因为它们与多种酶的合成有关［10］。本实验所检测的九种酶：GOT（谷草转氨酶）、GPT（谷丙转氨酶）、GLDH（谷氨酸脱氢酶）、ICDH（异柠檬酸脱氢酶）、CK（细胞角蛋白）、LDH（乳酸脱氢酶）、HBDH（羟丁酸脱氢酶）、LAP（肽水解酶）、AKP（磷酸单酯水解酶）都主要存在于心、肝、肾组织中。通过对心肌组织的检测可见GOT、GPT、GLDH、ICDH、CK值在对照组、大豆皂甙给药组和糖尿病模型组呈递减趋势（P＜0.01），LDH、HBDH、LAP、AKP在组间无显著性差异（P＞0.01），说明大豆皂甙能调节糖尿病大鼠心肌组织中GOT、GPT、GLDH、ICDH、CK酶的代谢而对LDH、HBDH、LAP、AKP没有显著作用（P＞0.01）；通过对肝组织的检测可见糖尿病模型组与对照组、大豆皂甙给药组比较GOT、GPT显著升高（P＜0.01），对照组与大豆皂甙给药组无显著差异（P＞0.01），大豆皂甙给药组与对照组、糖尿病模型组比较LDH、HBDH、LAP和ICDH明显降低（P＜0.01），对照组与糖尿病模型组无显著差异（P＞0.01），GLDH、CK、AKP在组间无显著性差异（P＞0.01），说明大豆皂甙能调节糖尿病大鼠肝组织中GOT、GPT、LDH、HBDH、LAP、ICDH、CK酶的代谢而对GLDH、AKP没有显著作用（P＞0.01）；通过对肾组织的检测可见GOT、LAP、ICDH、CK值在对照组、大豆皂甙给药组和糖尿病模型组呈递减趋势（P＜0.01），GPT、GLDH、LDH、HBDH、AKP在组间无显著性差异（P＞0.01），说明大豆皂甙能调节糖尿病大鼠肾组织中GOT、LAP、ICDH、CK酶的代谢而对 GPT、GLDH、LDH、HBDH、AKP没有显著作用（P＞0.01）。总之，大豆皂甙能够调节糖尿病大鼠心、肝和肾组织的细胞酶代谢，并对糖尿病时心、肝和肾的损伤具有一定的保护作用，其具体的调节机制、保护机理及各组织之间的调节是否具有相关性还有待于进一步的研究。

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