3种植物提取剂对土蜗杀灭效果的初步研究
2012-11-02吕中芳林守敏史建南汪彦愔
吕中芳,林守敏,史建南,汪彦愔
(福建师范大学生命科学学院,福建 福州 350108)
土蜗(Galla)属软体动物门(Mollusca)、腹足纲(Gastropoda)、肺螺亚纲(Pulmonata)、基眼目(Basommatophora)、椎实螺科(Lymnaeidae)、土蜗属(Galla)[1]。它和椎实螺科的另一个属萝卜螺属(Radix)是大多数动物血吸虫的中间宿主。土蜗属的小土蜗(Galbapervia)和截口土蜗(G.ttruncatula)是牛、羊肝片吸虫(Fasciola hepatica)、东毕属(Orientobilharize)吸虫以及包氏毛毕吸虫(Trichobilharziapaoi)等人、畜、鱼类寄生吸虫的中间宿主,对传播寄生吸虫病起着极其重要的作用,危害极大[2-3]。因此消灭这些中间宿主成为防治这些寄生吸虫病的重要措施。
大蒜是百合科植物蒜(AlliumSativumL.)的鳞茎,其主要生物活性成分大蒜素(Allicin),含多种烯丙基有机硫化物,具有杀菌抗癌的作用[4-5],也有较强的杀灭钉螺(Oncomelaaniahupensis)的作用[6]。落叶乔木植物苦楝(MeliaazedarachL.)的皮、叶及果实中都还有的四环三萜类杀虫成分苦楝素[7]。苦参碱(matrine,MAT)是豆科植物苦参(SophoraflavescensAit)所含的主要生物碱之一,具有抗菌杀虫的作用[8]。本研究选取这3种植物的有效成分提取物对土蜗进行室内浸杀试验,初步确定这3种植物的灭螺效果。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 灭螺植物提取剂 3种植物提取剂均购自陕西昂盛生物医药科技有限公司,分别为1%的大蒜素粉末,2.5%的苦楝素和4%的苦参碱的浸膏。
1.1.2 土蜗 采自福建省福州市闽侯县大学城福建工程学院校园内。
1.2 方法
1.2.1 灭螺植物提取剂 取2g 1%的大蒜素粉末、2g 2.5%的苦楝素、1.7g 4%的苦参碱分别溶于100mL的去氯水,配成200mg/L(以有效成分大蒜素计)的大蒜提取液、500mg/L(以有效成分苦楝素计)的苦楝提取液、680mg/L(以有效成分苦参碱计)的苦参提取液,作为母液备用。将母液分别稀释成0.5mg/L、1mg/L、2mg/L、4mg/L、8mg/L的大蒜素稀释液,5mg/L、10 mg/L、20mg/L、40mg/L、80mg/L的苦楝素稀释液,以 及 2.8mg/L、5.6g/L、11.2mg/L、22.4mg/L、44.8mg/L的苦参碱稀释液,并分别进行灭螺试验,以无氯清水浸泡为对照。
1.2.2 浸杀试验 将采集回来的土蜗在实验室内用去氯水饲养一周,选取活力较强的成螺每10只为1组,装入自制的尼龙小网袋中。放置于盛有1L不同浓度的稀释液和无氯清水(CK)的玻璃钢中,每个浓度处理组另设2个平行实验组,每组各分别放入4袋,分别于24h、48h、72h、96h各取出一袋。将每次取出的螺用无氯清水清洗3次再放入盛有无氯清水的烧杯中复苏24h,鉴定死亡情况,分别记录各平行组死亡数,取其平均值计算死亡率。
1.2.3 土蜗死活的鉴别方法 参照文献 [9]中的方法,将复苏24h后的土蜗用镊子轻轻夹出置于玻璃培养皿中,有明显爬动行为的判断为活,无动静的用镊子触其厣部放在解剖镜下观察有无反应,若其足部变白且软体部分无任何反应的即为死亡。
1.2.4 数据处理 用Microsoft Excel 2010测算3种植物提取液的灭螺效果,并用SPSS 17.0计算LC50。
2 结果与分析
2.1 3种植物提取剂对土蜗的浸杀效果
大蒜、苦参和苦楝提取剂对土蜗的浸杀效果见图1~图3。无氯清水对照组的死亡率均为0,处理24h的杀灭效果也不是很明显,但随着处理时间的延长土蜗的死亡率也越来越高,如浓度为8 mg/L的大蒜提取液48h的杀螺率达70%,浓度为80mg/L的苦楝提取液浸杀土蜗48h的死亡率达90%,而经浓度为44.8mg/L的苦参提取液处理72h后土蜗的死亡率也达到60%,这3种植物提取物对土蜗都有一定的杀灭效果。
图1 大蒜提取物的灭螺效果
图2 苦参提取物的灭螺效果
图3 苦楝提取物的灭螺效果
2.2 3种植物提取剂的灭螺效果比较
大蒜提取液浸杀土蜗48h和96h的LC50分别为4.96mg/L和1.62mg/L(表1),而苦参提取液为45.60mg/L和10.09mg/L,苦楝提取液则为37.46mg/L和12.45mg/L,由此可以得出大蒜对土蜗的杀灭效果最好,苦楝次之,苦参最弱。但是96h的苦参比苦楝杀灭土蜗效果好。
表1 3种植物提取物灭螺效果比较
3 小结与讨论
已有研究表明,大蒜对钉螺有较强的杀灭作用[6],本研究结果证实了大蒜对土蜗具有较强的杀灭作用,48h浸杀土蜗的LC50为4.96mg/L。同时,本研究结果也表明苦楝和苦参对土蜗也有较好的杀灭作用,苦楝96h浸杀土蜗的LC50为10.09 mg/L,苦参96h浸杀土蜗的LC50为12.45mg/L。3种植物提取剂中大蒜的灭螺效果较苦楝和苦参好,其中苦楝24h、48h、72h的浸杀效果都比苦参要好,但浸杀96h以上的效果不及苦参,这可能是苦参提取物中的有效杀螺成分随着浸泡时间的增长作用效果越来越明显。但就目前而言,采用植物有效成分提取液进行灭螺还有制约因素,比如成本较高、毒杀作用慢等[10]。
已有研究显示,大蒜对钉螺的酯酶同工酶有一定的影响[6],而苦楝和苦参的灭螺机理还有待进一步研究,因为直接用新鲜灭螺植物的水浸液易造成环境污染[10],本研究直接采用3种植物的提取剂进行灭螺试验,且结果相对于直接用植物的水浸液效果要好,更具参考意义,在一定程度上能够对进一步研究这些植物的灭螺机理提供参考。
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