GC法测定肛安栓中冰片的含量

高 辉，徐丽华

(山东省食品药品检验所，山东济南250101)

肛安栓是由地榆炭、五倍子、盐酸小檗碱、人工麝香、冰片等5味中药组成的复方制剂，具有凉血止血，清热解毒，燥湿敛疮，消肿止痛功效，临床上用于湿热下注所致的内痔、混合痔以及炎性外痔。本品是烟台荣昌制药有限公司独家生产的品种，现行标准为国家食品药品监督管理局国家药品标准WS3－129(Z－129)－2001(Z)。冰片是肛安栓中的主要有效成分之一，具有清热止痛的作用，且冰片在制备、储存的过程中易挥发损失。为更好的控制肛安栓的内在质量，研究建立冰片的GC的含量测定方法。

1 仪器与试药

Agilent 6890N气相色谱仪(Agilent公司，美国)，Sartorius CP225D电子天平(Sartorius公司，德国);冰片由中国药品生物制品检定所提供，含量测定用，批号为110743－200504;样品和阴性对照均由烟台荣昌制药有限公司提供，样品批号为090501、090502、100101。乙酸乙酯为分析纯。

2 方法与结果［1～4］

2.1 色谱条件 色谱柱:Agilent HP－FFAP石英毛细管柱(0.25 mm ×30.0 m，0.25 μm)，柱温 130 ℃，进样口温度 180℃;检测器温度230℃;氢离子火焰检测器;恒流;分流比40∶1。冰片出峰后采用程序升温，以减少其他杂质在色谱柱中的残留。

表1 程序升温

2.2 溶液的制备 对照品溶液的制备:精密称取冰片对照品11.60 mg，加乙酸乙酯溶解并稀释至10 mL，作为对照品溶液(浓度为:1.16 mg·mL－1)。

供试品溶液的制备:取重量差异项下的本品，切细，取约2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙酸乙酯25 mL，超声处理(功率500 W，频率40 kHz)10 min，摇匀，滤过，滤液于4℃的冷藏室中放置3 h，取出，迅速滤过，取续滤液，即得。

2.3 线性关系的考察 分别精密吸取对照品溶液(C对为0.29 mg·mL－1)0.2、1、2、3、4、5 μL，注入气相色谱仪，分别测定峰面积。以冰片对照品的进样量为横坐标X，龙脑峰、异龙脑峰面积之和为纵坐标Y，进行线性回归，得回归方程Y=389.101X+16.285，相关系数 r=0.999 97。表明冰片进样量在0.058～1.450 0 μg之间与峰面积呈良好的线性关系。

2.4 仪器精密度试验 精密吸取冰片对照品溶液(C对为0.58 mg·mL－1)1 μL，注入气相色谱仪，连续进样 6 次，测定龙脑、异龙脑的峰面积之和，RSD为0.25%。结果表明仪器精密度良好。

2.5 样品稳定性试验 取2.2项下的供试品溶液，精密吸取1 μL，注入气相色谱仪，每隔2 h进样一次，测定龙脑、异龙脑的峰面积之和，共考察10 h，RSD为0.28%。表明供试品溶液在10 h内稳定性良好。

2.6 重复性试验 取肛安栓(山东荣昌制药股份有限公司，批号090502)约2 g，照2.2项下供试品溶液的制备方法，平行制备6份样品，按上述方法和条件进行测定，计算含量，结果平均含量为6.16 mg/粒，RSD为1.70%，表明本品含量测定方法的重复性良好。

2.7 加样回收率试验 取已测知含量的本品(山东荣昌制药股份有限公司，批号为090502，含量6.16 mg/粒，平均粒重1.004 6 g)约1 g，精密称定，共取6份，置具塞锥形瓶中，各分别精密加入冰片对照品5 mg，精密加入乙酸乙酯25 mL，超声处理(功率500 W，频率40 kHz)10 min，摇匀，滤过，滤液于4℃的冷藏室中放置3 h，取出，迅速滤过，取续滤液，即得。按上述条件进行测定，分别计算加样回收率，结果见表2。

表2 加样回收率试验结果

2.8 专属性试验 取处方中除去冰片的其他药味，按处方比例制成缺冰片的阴性对照样品。取阴性对照样品约2 g，同供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。

分别精密吸取上述对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液各1 μL，注入气相色谱仪进行测定。结果供试品色谱中，在与对照品色谱保留时间相同的位置上，有相应色谱峰，而阴性对照无干扰，结果见图1、2。

2.9 样品测定 按供试品溶液的制备方法及上述色谱条件对3批样品进行测定，结果分别为 6.0 mg/粒、6.2 mg/粒、6.0 mg/粒。

3 讨论

3.1 供试品溶液的制备 过程中考察了不同提取溶剂(环乙烷、乙酸乙酯和甲醇)，结果表明，乙酸乙酯提取冷藏后，基质凝固均匀，易除去，测得含量较高。故最终确定提取溶剂为乙酸乙酯。

图1 冰片对照品的GC色谱图

图2 供试品的GC色谱图

3.2 实验中考察了不同提取方式(超声后直接冷藏3 h、超声后滤过，－7℃冷冻30 min及超声后滤过，分别冷藏2 h、3 h和过夜)。结果表明，冷藏3 h基质凝固均匀，易滤过除去，且测得含量略高，故选之。

3.3 考察不同取样量(1.0、2.0、3.0 g)，结果表明，取1.0 g、2.0 g测得含量结果无显著性差异，3.0 g测得含量略低。结合溶液含冰片的浓度及考虑样品的均一性，确定取样量为2.0 g。

3.4 实验考察了两种色谱柱 Agilent HP－FFAP(0.25 mm×30.0 m，0.25 μm)键合和改性的交联聚乙二醇毛细管柱;Agilent INNOWAX(0.25 mm ×30.0 m，0.25 μm)键合/交联聚乙二醇固定相毛细管柱。按上述确定的方法和条件进行测定，两种色谱柱的测定结果表明用该色谱条件测定冰片，对称因子、分离度和理论板数等均能基本符合2010年版《中国药典》对气相色谱分析的有关要求，选择该色谱条件测定冰片，对色谱柱选择性不强，适用范围广。

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典2010年版(一部)［S］.北京:中国医药科技出版社，2010:附录38.

［2］蔡铝铝，潘金火，金芝兰.GC测定镇江巴布膏中冰片、薄荷脑、樟脑和水杨酸甲酯的含量［J］.现代中药研究与实践，2011，25(1):54 －57.

［3］秦臻，彭绍忠，陈海明.抗流感滴丸中新莪术二酮的含量测定［J］.中国实验方剂学杂志，2011，17(2):43－45.

［4］张淼，袁浩，冯丽.GC法测定拨云散眼药中龙脑、异龙脑的含量［J］.中国药事，2011，25(1):79－80.