HPLC法测定阿昔莫司分散片的含量

亢 玮，王文义，王友国

(鲁南制药集团股份有限公司，山东临沂276006)

阿昔莫司(acipimox)抑制游离脂肪酸自脂肪组织释放，降低血中极低密度(VLDL)和低密度(LDL)脂蛋白浓度，降低甘油三酯和总胆固醇水平。可用于高甘油三酯血症(IV型高脂蛋白血症);高胆固醇血症(Ⅱa型高脂蛋白血症);高甘油三酯和高胆固醇血症(Ⅱb型，Ⅲ型及Ⅴ型高脂蛋白血症)。在阿昔莫司分散片的质量研究过程中，本实验采用反相高效液相色谱法，建立其含量测定方法。本法简便，准确，专属性强，可用于阿昔莫司分散片的含量测定。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Agilent 1200高效液相色谱仪;VWD检测器。

1.2 试药 阿昔莫司对照品(纯度为100.0%);阿昔莫司分散片(规格:0.25 g 批号:090601，090602，090603)(鲁南贝特制药有限公司);乙腈为色谱纯，硫酸氢四丁基铵溶液为分析纯。

2 色谱条件与色谱图

色谱柱:Agilent C18(150 mm ×4.6 mm)，流动相:0.005 mol·L－1的硫酸氢四丁基铵溶液(用氢氧化钠试液调节pH值至6.0)－乙腈(90∶10)，检测波长为 269 nm，流速为 1.0 mL·min－1。进样量为20 μL。在上述条件下，按阿昔莫司峰计算理论板数不低于2 000。样品溶液色谱图见图1。

图1 样品溶液色谱图

3 方法学验证

3.1 辅料干扰实验 取处方量辅料适量，按“3.6”项下操作。另取阿昔莫司对照品适量，用流动相溶解并定量配制成10 μg· mL－1的溶液，进样测定。实验结果表明辅料不干扰阿昔莫司的测定。

3.2 线性范围 取阿昔莫司对照品适量，精密称定，加流动相溶解并稀释成每1 mL含0.1 mg的溶液作为贮备液。精密量取贮备液0.1，0.5，1.0，2.0，5.0 mL 置10 mL 容量瓶中，用流动相定容至刻度，摇匀。在上述色谱条件下，进样20 μL记录色谱图。以阿昔莫司浓度C(μg· mL－1)为横坐标，峰面积A为纵坐标，进行线性回归，得回归方程:A=－22.808+81.063C，r=0.999 9。

实验结果表明，阿昔莫司在1～50 μg· mL－1浓度范围内，峰面积与浓度线性关系良好。

3.3 精密度实验 取“3.6”项下的对照溶液连续进样5次，以峰面积计算，RSD为0.3%。

3.4 回收率实验 按处方量取高(120%)、中(100%)、低(80%)3种浓度的阿昔莫司对照品，每个浓度分别称3份均加入处方量辅料，制成溶液，按“3.6”项下操作，计算回收率，结果见表1。

3.5 稳定性实验 按含量测定方法，取“3.6”项下的样品，分别在 0，1，2，4，6，8 h 进行测定，记录峰面积，RSD 为0.5%，说明样品溶液在8 h内稳定。

3.6 含量测定 取本品10片，精密称定，研细，混合均匀;精密称取适量(约相当于阿昔莫司10 mg)置于100 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液1 mL置于10 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，作为供试品溶液。另取阿昔莫司对照品适量，用流动相溶解并定量稀释制成每1 mL含10 μg的溶液，作为对照溶液。分别取对照品溶液和供试品溶液各20 μL注入高效液相色谱仪，记录峰面积，按外标法计算供试品中阿昔莫司的含量，3批样品(090601，090602，090603)标示量的百分含量分别为99.8%，99.7%，99.5%。

表1 阿昔莫司分散片回收率实验

4 讨论

有关文献［1］中流动相采用甲醇－水－冰醋酸(60∶40∶1)为流动相，本方法同时结合阿昔莫司分散片局颁标准中有关物质检测方法，最终采用0.005 mol·L－1的硫酸氢四丁基铵溶液(用氢氧化钠试液调节pH值至6.0)－乙腈(90∶10)为流动相，阿昔莫司的理论板数为7 231，保留时间为3.2 min左右.

［1］公方美，刘加中，孙聚香.HPLC法测定阿昔莫司原料的含量［J］.齐鲁药事，2004，23(7):27－28.