家兔低血压状态下静脉注射多巴胺致TNF－a、IL－6的表达及局部病理改变的研究

陶明 肖祖碧 孙全林 左娟 田林 王菁 李溁戎 杨忠娴

（1.遵义医学院附属医院心内科，贵州 遵义563003；2.遵义医学院机能实验室）

多巴胺在临床应用极为广泛，静脉注射多巴胺引起的组织损伤与防治受到高度关注。有动物实验证明幼兔安全使用多巴胺时间为4h［1］，较多临床报道也认为持续使用多巴胺的病人更换注射部位的安全时间为2～4h或更长［1－4］。然而有部分病人使用多巴胺后约30min开始出现沿血管走向皮肤发白现象［2］，以低血压病人居多。目前尚未见有关低血压状态与正常血压状态下静脉注射多巴胺致组织损伤的发生时间及反应程度是否存在差异的研究报道。为此，本实验将低血压与正常血压家兔在使用多巴胺后不同时间做血清炎性因子测定与局部组织病理学观察，探讨低血压状态下静脉注射多巴胺机体炎症反应发生的时间、损伤程度，为临床安全使用多巴胺提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物与分组 由遵义医学院动物实验中心提供的健康成年家兔72只，体重2.3～3.3kg。随机分为A、B、C三组。A组：直接静脉输入生理盐水；B组：静脉输入20mg多巴胺加100ml生理盐水；C组：低血压状态下静脉输入20mg多巴胺加100ml生理盐水。

1.2 实验主要药物 多巴胺由江苏亚邦强生药业有限公司出产，规格20mg／支（2ml）。

1.3 实验方法 按照4ml／kg体重经耳缘静脉注射25%乌拉坦全麻后固定，于对侧耳缘静脉另建实验用药通道。C组行颈总动脉插管，连接多导生理监护仪后采用放血法制作低血压休克模型：15min内放血至平均动脉压（40±5）mmHg。实验中如动物死亡或液体渗漏均被剔除。

1.4 标本采集与保存

1.4.1 血液标本 每组分别于用药后四个时间段即0.5h、1h、2h、4h采集动脉血2ml，血液凝固后放入4 000转速离心机中离心10min，取上清液置－80℃冰箱保存。

1.4.2 组织标本 在各时间段采集完血液标本后，立即以静脉穿刺点为中心采集长0.25cm、宽0.25cm含注射血管的组织于4%甲醛液溶液中固定。

1.5 测量仪器及观察指标 采用中科大中佳公司提供的GC－2010γ计数器、北京普尔伟业生物科技有限公司提供的试剂盒进行血清炎性因子（TNF－a、IL－6）放射免疫测定。血管及周围组织经HE染色后作光镜病理学观察炎症反应情况，把血管扩张充血、慢性炎细胞浸润、嗜酸性粒细胞浸润、可疑血栓形成、组织疏松水肿、灶状出血作为病理学观察指标。

2 结果

2.1 不同时间三组TNA－F、IL－6的比较（表1）

表1 不同时间三组血清炎性因子的表达（±s，ng／ml）

表1 不同时间三组血清炎性因子的表达（±s，ng／ml）

注：＊与A组有差异，P＜0.05；＃与B组有差异，P＜0.05；▲与0.5h有差异，P＜0.05；△与1h有差异，P＜0.05；◆与2h有差异，P＜0.05

组别 0.5h TNF－a IL－6 1h TNF－a IL－6 2h TNF－a IL－6 4h TNF－a IL－6 A组 15.51±2.12 0.027±0.009 16.48±3.07 0.030±0.004 15.67±2.75 0.026±0.00916.16±2.59 0.027±0.009 B组 16.25±4.50 0.030±0.004 15.62±1.80 0.035±0.004 16.25±2.85 0.045±0.005▲△ 30.82±1.76＊▲△ 0.049±0.004＊C组 14.82±1.46 0.032±0.006 15.84±2.59 0.037±0.006 36.21±6.02＊▲△ 0.048±0.019＊＃▲△ 43.781±3.41＊＃▲△◆ 0.055±0.004＊▲△◆

2.2 不同时间三组局部组织及血管病理学阳性率比较（表2）

表2 不同时间三组局部组织及血管病理学阳性率比较n（%）

3 讨论

TNF－a、IL－6是介导炎症反应最重要的细胞因子［3］，根据其浓度变化可以帮助判断炎症反应发生、发展过程及反应程度。本实验结果组间比较提示，在0.5h、1h时间段机体未通过 TNF－a、IL－6表达多巴胺诱发的炎症反应；于2h开始C组TNF－a浓度明显高于A、B两组，至4h呈显著上升趋势（P＜0.05）。组内比较显示，B组于4h炎性因子浓度明显高于其他时间段（P＜0.001），C组各时间段比较均有差异（P＜0.05），提示正常血压组于4h出现炎症反应，低血压组于2h出现。三组病理学观察示总体有差异性（P＜0.001），其中C组总阳性率及相同时间内阳性率均高于B组（P＜0.05），B组总阳性率及相同时间内阳性率均高于A组（P＜0.05）。以上结果表明，向正常血压与低血压状态的家兔静脉注射多巴胺都可以使机体产生炎症反应，但低血压组时间早、程度重。

低血压组与正常血压组比较存在炎症反应差异可能与以下因素有关：首先是低血压状态下组织缺氧，当多巴胺兴奋血管的α受体后产生的缩血管作用加重了局部缺血缺氧而诱发炎症反应；其次是低血压状态下血流相对缓慢，药液在局部不断积聚、浓度升高，致血管内压力升高，部分血浆成分渗出血管壁，这些成分中有较大浓度的多巴胺兴奋毛细血管α受体，使血管收缩，加重血管壁及周围组织缺血；再次是多巴胺本身对血管具有刺激性，在组织本身缺氧状态下可诱发机体产生炎症反应，炎症又可以使血管壁通透性增加［3］，从而加重多巴胺从血管内渗出而引起周围组织损伤。

本实验结果及较多临床报道提示，在肉眼可见的异常情况出现前，多巴胺对血管及周围组织的炎症刺激就持续存在，且随着时间有延长损伤程度加重。结合国外文献报道［4］高剂量与低剂量多巴胺都会引起组织损伤，护士应高度重视无渗漏情况下由多巴胺引起的组织损伤。一旦使用多巴胺就要高度重视炎症损伤的早期预防，尤以低血压状态下损伤发生更早。本实验中50%的动物于用药30min时发生病理改变阳性反应。因此，提示护士为低血压病人使用多巴胺应从开始用药就同步干预，用药过程中密切观察，避免药物损伤给病人带来痛苦以及发生医患纠纷。

本实验因研究时间较短、样本例数较少等原因，未完整地测定炎症因子表达及组织病理学改变的动态变化；未能复制出临床上常见的肉眼可见的异常改变；需在以后的研究中继续探索，同时寻求更好防治损伤的方法。

［1］ 夏淳和，陈丽萍，许敬，等.多巴胺、多巴酚丁胺静脉注射对幼兔外周静脉及周围组织的影响［J］.中华护理杂志，2001，36（11）：805－807.

［2］ 陶明，肖祖碧，邓宗琴，等.输注多巴胺后出现局部皮肤颜色改变的观察及处理［J］.遵义医学院学报，2009，32（6）：614－616.

［3］ 李玉林.病理学［M］.北京：人民卫生出版社，2010：60.

［4］ Chen－JL，O＇Shea－M.Extravasation injury associated with lowdose dopamine［J］.The annals of pharmacotherapy.1998，32（5）：545－548.