复方多西环素缓释药膜的制备与临床应用

2012-09-17陈松军陈才军

中国药业 2012年3期

陈福，陈松军，陈才军

(1.浙江省舟山医院，浙江舟山 316004; 2.浙江省舟山市食品药品检验所，浙江舟山 316000)

牙周炎、冠周炎为口腔常见病、多发病，目前临床主张尽量采用局部用药，并认为控、缓释抗菌药物是较理想的剂型。多西环素对牙周炎有较好的治疗作用[1]，替硝唑对牙周袋及龈盲袋内的厌氧菌有强大的抑制和杀灭作用[2]。为此，我院制备了复方多西环素缓释药膜，经临床应用观察，对治疗牙周炎、冠周炎有显著的疗效。现报道如下。

1 仪器与试药

Agilent 1100型高效液相色谱仪。盐酸多西环素(武汉合中生化制造有限公司);替硝唑(珠海蔚蓝医药有限公司);多西环素对照品(中国药品生物制品检定所，批号为0485－9901，含量86.0%);替硝唑对照品(中国药品生物制品检定所，批号100336 －200402，含量 100.0%);聚乙烯醇(PVA，江苏启东精细化工厂，相对分子质量8×104，平均聚合度为1 750±50);羧甲基纤维素钠(CMC－Na，武汉健民药业集团股份有限公司)。

2 方法与结果

2.1 处方与制备

2.1.1 处方

多西环素2 g，替硝唑3 g，聚乙烯醇12 g，羧甲基纤维素钠8 g，甘露醇，甘油，糖精钠1 g，纯化水适量。

2.1.2 制备

称取聚乙烯醇，用适量纯化水浸泡，溶胀24 h，在水浴上加热溶解成胶状，加羧甲基纤维素钠搅拌溶解，待用;称取多西环素、替硝唑，加甘油和适量纯化水，研匀，再加入到已溶解的成膜材料浆液中，加入甘露醇、糖精钠的水溶液，搅拌均匀，置约60℃水浴中保温、脱泡30 min，将膜料倾入预先用75%乙醇搽洗的玻璃板上，铺成2 000 cm2的药膜，放置于10万级洁净室中，待自然干燥后，分割成2 cm×2 cm的小片(每片约含多西环素4 mg和替硝唑6 mg)，密封、包装即得。

2.2 一般质量控制

2.2.1 性状

本品为淡黄色半透明薄膜，有一定的韧性。

2.2.2 鉴别

在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰(替硝唑、多西环素)保留时间与对照品溶液主峰保留时间一致。

2.2.3 检查

应符合2010年版《中国药典(二部)》附录ⅠM膜剂项下有关的各项规定。

2.3 含量测定

2.3.1 色谱条件与系统适用性试验

色谱柱:Agilent zorbax－Extend C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm);流动相:0.05 mol/L 草酸铵溶液－二甲基甲酰胺－0.2 mol/L磷酸氢二铵溶液(65∶30∶5)，用氨试液调节 pH 为(8.0 ±0.2);流速:1.0 mL/min;柱温:25 ℃;检测波长:280 nm;进样量:20 μL。在上述色谱条件下，多西环素、替硝唑色谱峰分离良好，辅料对主成分测定无干扰，色谱图见图1。

图1 高效液相色谱图

2.3.2 溶液制备

取多西环素、替硝唑对照品各适量，精密称定，加0.01 mol/L盐酸溶液溶解并稀释成每1 mL中含多西环素0.24 mg、替硝唑0.36 mg的对照品溶液。取样品适量，精密称定，加流动相溶解并定量稀释成每1 mL中约含多西环素0.08 mg、替硝唑0.12 mg的溶液，滤过，作为供试品溶液。

2.3.3 方法学考察

线性关系考察:分别精密量取对照品溶液 1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 mL，置 10 mL 容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。照上述色谱条件，精密量取20 μL，注入液相色谱仪，记录峰面积。以峰面积 A对质量浓度 C进行线性回归，得多西环素回归方程A=92.12+795.86 C，r=0.999 5(n=5);替硝唑回归方程 A=56.80+403.83 C，r=0.999 4(n=5)。结果表明，多西环素质量浓度在 0.024 ～0.12 g/L、替硝唑质量浓度在 0.036 ～0.18 g/L范围内与峰面积呈良好的线性关系。

精密度试验:精密吸取同一份对照品溶液20 μL，按上述色谱条件重复进样6次，测定峰面积。结果多西环素的 RSD为0.46%，替硝唑的 RSD为0.34%(n=6)，表明仪器精密度良好。

稳定性试验:取同一份供试品溶液，分别于 0，1，2，4，8，12 h时进样，测定峰面积。结果多西环素的 RSD为 0.95%，替硝唑的 RSD为 0.74%，表明供试品溶液在室温下稳定性良好。

重复性试验:对同一批样品(批号为090317)平行取样6份，制备供试品溶液，按上述色谱条件测定。结果多西环素和替硝唑平均含量分别为 97.70%和 100.35%，RSD分别为 0.85%和0.65%(n=6)，表明方法重复性良好。

回收率试验:按处方比例精密称取多西环素和替硝唑对照品各适量，加入处方量的辅料，加流动相溶解并稀释成每1 mL中分别含多西环素和替硝唑约 0.064 mg 和 0.096 mg，0.08 mg 和0.12 mg，0.096 mg和 0.144 mg的溶液各 3 份，依法测定含量，计算回收率。结果多西环素低、中、高质量浓度的回收率分别为99.0% ，99.7% ，100.4% ，RSD 分别为 0.35% ，0.58% ，0.55%;替硝唑低、中、高质量浓度的回收率分别为98.7%，99.9%，99.2% ，RSD 分别为 0.46%，0.29%，0.63%。

2.3.4 样品测定

取样品适量，依法制备供试品溶液，按拟订的色谱条件测定，记录色谱图;另取多西环素、替硝唑对照品适量，精密称定，同法稀释和测定，按外标法计算。结果批号为090317，090412，090425的样品中多西环素相对标示含量分别为97.2%，98.9%，95.4%，替硝唑相对标示含量分别为101.1%，99.4%，101.2%。

2.4 药膜中多西环素体外溶出试验

将盛有10 mL纯化水的试管置36℃恒温水浴中预热，精密称取10片药膜，置上述试管中，同时开始计时。每隔5 min精密吸取试管中溶液2 mL，加流动相溶解并定量稀释成每1 mL中约含多西环素0.08 mg的溶液，滤过，按拟订的色谱条件测定，同时补充同体积同温度的溶出介质2 mL，计算平均累积溶出百分率。结果溶出时间为 5，10，15，20，25，30 min 时，平均累积溶出百分率分别为(20.5±4.1)%，(59.2±6.8)%，(79.7±5.3)%，(88.0 ±5.4)%，(97.3 ± 5.1)%，(101.1 ± 3.4)%(n=5)。