注射用凯西莱在不同输液中稳定性研究＊

杨 辉，覃志高，陈建琴，莫 迎 ，许凯柔

(1.广西壮族自治区南宁食品药品检验所，广西 南宁 530001;2.广西中医学院2006级实习生，广西 南宁 530001)

凯西莱(tiopronin)化学名为N－(2－巯基丙酰基)－甘氨酸，为20世纪60年代日本研制的一种甘氨酸衍生物，其侧链上的游离巯基被认为是人体新陈代谢的保护剂[1]。1998年在我国上市，主要作为化疗及放疗保护剂、保肝剂及重金属解毒剂应用于临床。随着其临床的广泛应用，不良反应的报道也逐渐增多，国内报道的不良反应发生率为3.5% ～17%[2]，目前，其不良反应机理尚不清楚。本试验旨在通过考察凯西莱与5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液及氯化钠注射液配伍后，在各时间点对其外观、pH、不溶性微粒数及含量等变化情况进行分析，从药品质量方面评价凯西莱与不良反应发生的关系，为规范临床操作及保证临床安全用药提供依据。

1 仪器与试药

LC－20AB型高效液相色谱仪(日本岛津公司);威玛色谱数据工作站;AE240电子天平(梅特勒－托利多仪器＜上海＞有限公司;FE20实验室pH计(梅特勒－托利多仪器＜上海＞有限公司;ZWF－J6型激光注射剂微粒分析仪(天津天河医疗仪器有限公司);HH－S6型数显恒温水浴锅(金坛市医疗仪器厂)。注射用凯西莱及专用溶剂(河南省新谊药业股份有限公司，规格为0.1 g/支，批号为091103－2);5%碳酸氢钠注射液(河南省新谊药业股份有限公司，规格为2 mL/支，pH=8.5，批号为090808);5%葡萄糖注射液(安徽丰原药业股份有限公司，规格为100 mL∶5 g，批号为090425134)、10%葡萄糖注射液(广西南宁百会药业集团有限公司，规格为100 mL∶10 g，批号为0908002);氯化钠注射液(广西科宏药业有限公司，规格为500mL∶4.5g，批号为09092703);甲醇为色谱纯，高纯水。

2 方法与结果

2.1 样品溶液配制

为便于比较，按注射用凯西莱使用说明书要求，均配制为每250 mL含0.1 g的临床常用质量浓度。取注射用凯西莱3支，分别加入随药附带的专用溶剂(5%碳酸氢钠注射液，pH=8.5)2 mL溶解，然后分别加入到250 mL的5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、氯化钠注射液中，充分摇匀，经微孔滤膜(0.45 μm)过滤后制成A，B，C配伍溶液，备用。

2.2 外观观察

分别取在 10，15，20，25，30，35，40 ℃条件下配制的配伍溶液A，B，C 适量，以配伍的相应溶剂为空白溶液，分别于 0，0.5，1.0，3.0，6.0，12.0 h 时观察其外观。结果配伍、空白溶液均透明澄清、无颜色变化、无沉淀、无气体生成。

2.3 不溶性微粒测定

分别取在 10，15，20，25，30，35，40 ℃条件下配制的配伍溶液A，B，C 适量，以配伍的相应溶剂为空白溶液，分别于 0，0.5，1.0，3.0，6.0，12.0 h 时取各空白、配伍溶液，翻转 20 次，使溶液混匀，立即小心开启容器，先倒出部分供试液冲洗开启口及取样杯，将供试液倒入取样瓶中，超声处理(80～120 W)30 s脱气或静置于取样器中，依法测定[3]。结果配伍液放置不同时间、温度与空白溶液不溶性微粒无显著性差异。

2.4 pH 测定

取5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、氯化钠注射液及配伍溶液 A，B，C 适量，在 10，20，30，40 ℃条件下，测定各自在 0，0.5，1.0，3.0，6.0，12.0 h 时的 pH。结果见表 1，配伍溶液的 pH随着时间、温度的升高逐渐增大。

表1 配伍溶液放置不同时间、不同温度对pH值的影响(n=3)

2.5 含量测定

邹雪等[4]的研究表明，用高效液相色谱法测定注射用凯西莱中的凯西莱，质量浓度线性范围在0.1～1.0 mg/mL。而本研究仅考察凯西莱在不同溶剂的含量随着时间、温度而变化的情况，故试验拟订开始时的含量为100%，而后各时间点的峰面积与该点峰面积的比值即得出各时间点样品溶液中凯西莱的相对百分含量。

色谱条件:色谱柱为 Phenomenex C18柱(150 mm×4.6 mm，5 μm);流动相为甲醇 － 水(5 ∶95)，用磷酸调 pH 至 2.5;柱温30 ℃;检测波长 205 nm;流速 1.0 mL/min;进样量 20 μL。理论板数按凯西莱峰计算应不低于2 000。

测定:取配伍溶液 A，B，C 适量，在 10，15，20，25，30，35，40 ℃条件下，测定各自在 0，0.5，1.0，3.0，6.0，12.0 h 时的峰面积。结果见表2。配伍溶液A，B，C中凯西莱在不同溶剂、同一检测点，随着时间延长和温度升高，其含量发生显著变化，表明注射用凯西莱随着温度的升高和时间的延长水解或氧化反应越严重。

3 讨论

由试验结果可知，临床采用5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、氯化钠注射液配伍溶剂对凯西莱进行配伍扩容，在相同条件下，其配伍溶液之间的外观、不溶性微粒、pH及含量等均无显著性差异，说明临床采用5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、氯化钠注射液配伍溶剂是合理可靠的。

凯西莱含有巯基、羧基，为酸性化合物，较容易被氧化[5]。在临床应用上，其治疗方案也复杂繁多，对于药物稳定性的研究一般限于6 h或8 h内，但因为凯西莱的疗程往往有4周，时常会出现先滴注用凯西莱配伍溶液一段时间，然后换成其他输液，最后再换回注射用凯西莱配伍溶液的治疗方案，大大延长了注射用凯西莱配伍溶液的使用时间，有时甚至超过12 h，故本次研究时间设为12 h。从表2可以看出，随着配伍后存放时间的延长，配伍液中凯西莱的含量明显下降。笔者认为，导致凯西莱含量迅速降低的原因，可能与该药发生水解或氧化反应有关，反应所生成的物质化学结构不明，在本试验条件下并未检测到杂质峰。但从凯西莱结构分析，其分解产物可能是小分子的物质。因此，配伍溶液在放置不同温度和时间后在外观上无明显改变，不溶性微粒数也未见明显增加。试验结果显示，凯西莱与5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、氯化钠注射液配伍后存在一定的不稳定性，提示临床使用该药时，应现配现用，最好控制在1 h内滴完。同时建议，国家食品药品监督管理部门对现行的药品使用说明书重新考察和修订，对配伍溶液的使用时间加以警示，给予规范，以确保临床用药的安全、有效。

表2 配伍溶液放置不同时间和温度对凯西莱含量的影响(相对百分含量，%)

本次研究设置了不同的温度点进行考察，根据化学反应的有关反应速度原理[6]，温度每升高10℃，反应速度则增加2～4倍。从表3看，随着温度升高，注射用凯西莱配伍溶液的氧化分解速度会进一步增大，并在试验中得以证实。提示临床使用时，应注意环境温度的影响，在温度较高的地区和季节，配伍溶液的使用时间的控制就显得更为重要。

综上所述，凯西莱与5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、氯化钠注射液配伍后，随着放置时间的延长，温度的升高，含量迅速下降，导致药物疗效降低，发生不良反应的概率增大，试验结果对临床安全合理使用凯西莱具有一定的参考价值。

[1]徐立新，凌勇武.凯西莱治疗乙型肝炎肝硬化临床疗效观察[J].交通医学，2002，16(6):624－625.

[2]丁小丽，雷招宝.硫普罗宁致过敏性休克38例文献分析[J].药物不良反应杂志，2005，7(5):336－339.

[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:化学工业出版社，2005:附录61.

[4]邹 雪，罗 娟.HPLC法测定注射用硫普罗宁中硫普罗宁的含量[J].中国药师，2006，9(4):383 －384.

[5]黄 静，尹燕杰，黄海伟，等.HPLC测定硫普罗宁注射液含量及其有关物质[J].中国药学杂志，2009，44(14):1 108 －1 111.

[6]刘幸平.物理化学[M].北京:中国中医药出版社，2008:172.