胃Hp阳性人群与口腔Hp和牙周病发生关系的研究

王淑芳 任吉芳

上海市松江区中心医院口腔科，上海 201620

幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp）是一种重要的胃肠道致病菌，近年来，陆续有学者报道从口腔中发现幽门螺杆菌，经分离培养后发现与胃Hp类似[1-5]。调查发现，幽门螺杆菌可能与多种口腔疾病的发生有关联[2]，Hp可能是一种条件致病菌，广泛地存在人类口腔环境中。许多学者认为牙周袋内环境利于幽门螺杆菌生存[5]，可能成为其储存池，并再次对胃部进行感染[3-4]。在对感染胃Hp的患者进行药物感染控制后，经过一段时间又会复发感染，提示口腔内的Hp与胃Hp感染存在一定的关系[6]，本文欲通过对特定人群的研究，探讨牙周炎与口腔Hp、胃Hp的相互关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2012年1月～5月上海市松江区中心医院14C-尿素呼气实验阳性并有上腹部不适症状的患者102例，其中男50例，女 52例；年龄 30～46 岁，平均（38±8）岁；排除妊娠及哺乳期妇女。所有患者均行胃镜下活检术及病理检查，以明确胃Hp感染情况。

1.2 纳入与排除标准

①全口牙不少于20 颗；②一年内未接受牙周治疗及其他口腔护理者；③无全身性疾病和其他系统性疾病；④3个

月内未服用质子泵抑制剂、胶体铋复合制剂、H2受体阻断剂、抗生素；⑤女性需排除妊娠及哺乳期。

1.3 牙周炎诊断标准

牙周炎诊断标准依照《牙周病学》第三版诊断标准进行诊断[7]。

1.4 口腔检查与分组

1.4.1 口腔检查 由同一位口腔临床医师检查全部患者口腔健康情况。记录患者探诊深度（probing depth，PD）、出血指数（bleeding index，BI）、菌斑指数（plaque index，PLI）和松动度，如有必要行X线检查，进行诊断与鉴别诊断。

1.4.2 分组 ①牙周炎组（n=60）：至少4 颗牙牙周平均探诊深度≥3 mm，牙周有探诊出血，附着丧失≥ 1 mm，牙龈质软、暗红、水肿；②牙周健康组（n=42）：要求牙周探诊深度＜2.5mm，每个牙的牙周无探诊出血，无附着丧失，附着龈坚韧，成粉红色。

1.5 牙菌斑与含漱液取样及检测方法

口腔所有标本均在行胃内镜检查前提取，以防撤镜时导致口腔内污染。要求所有患者至少12 h以上未作任何口腔清洁及护理工作。每例取4个象限的第一磨牙颊侧近中位点（第一磨牙缺失记录第二磨牙）的龈沟内菌斑及含漱液。所有患者的临床检查与标本的取样均由同一位口腔临床医师操作。

1.5.1 牙菌斑的采集 消毒棉卷隔湿、消毒三用枪吹干后，用消毒牙签取龈上牙菌斑混合放置于1.5mL的无菌EP管（内事先放有30 μL生理盐水）中，做标记与记录，-80℃保存。

1.5.2 含漱液的收集 让患者含漱生理盐水20 s，用5mL EP管收集4 mL含漱液，做标记与记录，-80℃保存，当日送实验室提取DNA。

1.5.3 实验室检测 以尿素酶C基因与CagA基因为引物做PCR实验[7]，行凝胶电泳。对每个样品各行3次PCR检测口腔Hp，以其中至少两次结果阳性者为Hp阳性者。

1.6 统计学方法

应用SPSS 13.0 软件进行数据统计分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示，计数资料以率表示，采用 χ2检验，采用直线相关分析并计算OR值，以P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 口腔Hp检测结果

根据牙菌斑、含漱液样本中口腔Hp阳性的判定标准，102例研究对象中，牙菌斑Hp阳性者58例，总阳性率为56.86%（58/102）；含漱液Hp阳性者 53例，总阳性率为51.96%（53/102）。所有患者口腔牙菌斑或含漱液中至少一项Hp阳性则定为口腔Hp阳性，故本研究中口腔Hp阳性者为64例，口腔Hp总阳性率为62.75%（64/102）。PCR法检测牙菌斑、含漱液中尿素酶C和CagA基因表达结果见图1。

2.2 胃Hp病理活检检查结果

胃Hp阳性者为72例， 阳性率为70.59%（72/102），PCR法检测胃黏膜中尿素酶C和CagA基因表达结果见图1。

2.3 口腔Hp阳性与胃Hp阳性的关系

口腔和胃中Hp均阳性者52例，占口腔Hp阳性的81.25%（52/64），胃 Hp 阳性的 72.22%（52/72）。口腔 Hp 阳性与胃 Hp阳性为正关联（χ2=9.406，OR=3.90，P=0.002）。见表1。

表1 口腔Hp检出与胃Hp检出比较（例）

2.4 口腔Hp在两组间分布

牙周炎组中，牙菌斑、含漱液检测口腔Hp阳性者49例，占牙周炎组患者的81.67%（42/60）；牙周健康组中，牙菌斑、含漱液检测口腔Hp阳性15例，占牙周健康组患者的35.71%（15/42）。两组口腔Hp阳性率比较，差异有统计学意义（P<0.05），说明牙周炎组口腔Hp阳性率高于牙周健康组口腔Hp阳性率，且口腔Hp检出与牙周炎为正关联 （χ2=5.571，OR=4.53，P=0.003），见表2。

表2 两组口腔Hp阳性率比较

3 讨论

1989年Krajden等首次从胃炎患者的牙菌斑中分离培养出Hp，并推测口腔可能是Hp在人体的另一个聚集地[8]。从此，口腔内Hp的研究也逐渐成为热点问题。国内胡文杰等[9]通过多聚酶链反应检测13例胃病患者口腔含漱液和6个牙位的龈上及龈下菌斑，结果发现6例患者（46.2%）的含漱液和11例患者（84.6%）的至少一份菌斑样品中检测出Hp，龈下菌斑中Hp的检出率（38.5%）显著高于龈上菌斑（19.2%），据此推测龈沟或牙周袋可能是口腔Hp聚集的适宜环境。

Souto等[10]对69例慢性牙周炎患者和56例牙周组织健康的对照者进行了研究，结果发现有24%的受试者被检测到有Hp感染，并且患病组在唾液和龈下检测到的Hp感染情况显著高于正常对照组，证实了牙周炎患者口腔中存在Hp，并推测这类Hp可能更易于定植于牙周袋中[11]。胡文杰等[9]发现随着牙周炎症状程度加重，牙菌斑Hp检出阳性率升高，提示从受检者的多个存在炎症、中等深度的牙周袋中取样可能提高Hp的检出率。陈骏等[12]通过唾液样本分别检测牙龈出血组、牙结石组及牙周袋组Hp的检出率，发现其差异有统计学意义，表明Hp在口腔中生存与牙周病变程度有关。

本研究表明口腔内Hp的存在与胃Hp感染呈正相关关系（P=0.002）。口腔内Hp与牙周病变有明显正相关关系（P=0.003）。支持口腔可能为Hp一个重要寄居地（尤其牙周炎者）的观点。鉴于口腔中Hp感染与胃Hp关系密切，或二者互相感染，提示在临床治疗时，需口腔与胃Hp同时治疗，避免Hp复染；同时，也提示口腔内的幽门螺杆菌与牙周病有密切关系，在牙周炎临床治疗时，除考虑口腔局部因素外，需要考虑患者的全身情况，除目前已知的糖尿病等疾病外，还尤其要注意胃Hp感染情况，多学科联合治疗将更利于患者疾病的控制。

[1] Zou QH，Li RQ.Helicobacter pylori in the oral cavity and gastric mucosa：a meta-analysis[J].J of Oral Pathol Med，2011，40（4）：317-324.

[2] Namiot DB，Leszczyńska K，Namiot Z，et al.The occurrence of Helicobacter pylori antigens in dental plaque；an association with oral health status and oral hygiene practices[J].Adv Med Sci，2010，55（2）：167-171.

[3] Martinez GJ，Diouf A，Lakhssassi N，et al.Absence of Helicobacter pylori in the oral cavity of 10 non-dyspeptic subjects demonstrated by real-time polymerase chain reaction[J].Oral Microbiol Immunol，2006，21（6）：407-410.

[4] Kignel S，Almeida PF，Andre EA，et al.Occurrence of Helicobacter pylori in dental plaque and saliva of dyspeptic patients[J].Oral Dis，2005，11（1）：17-21.

[5]Souto R，Colombo AP.Detection of Helicobacter pylori by polymerase chain reaction in the subgingival biolm and saliva of non-dyspeptic periodontal patients[J].J Perodontol，2008，79（1）：97-103.

[6] 高静，朱声荣，刘贤，等.慢性牙周炎与口腔幽门螺杆菌的相关性研究[J].临床口腔医学杂志，2011，27（1）：5-7.

[7] 孟焕新.牙周病学[M].3版.北京：人民卫生出版社，2008：156.

[8] Krajden S，Fuksa M，Anderson J，et al.Examination of human stomach biopsies，saliva，and dental plaque for Campylobacter pylori[J].J Clin Microbiol，1989，27（6）：1397-1398.

[9] 胡文杰，曹采方，孟焕新，等.胃病患者口腔中的幽门螺杆菌[J].现代口腔医学杂志，1999，13（4）：261-263.

[10] Souto R，Colombo AP.Detection of Helicobacter pylori by polymerase chain reaction in the subgingival biofilm and saliva of non-dyspeptic periodontal patients[J].J Periodontol，2008，79（1）：97-103.

[11] Gebara EC，Pannuti C，Faria CM，et al.Prevalence of Helicobacter pylori detected by polymerase chain reaction in the oral cavity of periodontitis patients[J].Oral Microbiol Immunol，2004，19（4）：277-280.

[12] 陈骏，何祥一，吴凌莉，等.幽门螺杆菌口腔定植和胃肠疾病的关联性研究[J].华西口腔医学杂志，2011，29（4）：351-354.