血清VEGF水平与非小细胞肺癌相关性研究

袁永刚 张伟 马歌

[摘要] 目的 探讨非小细胞肺癌（NSCLC）患者血清血管内皮细胞生长因子（sVEGF）表达水平的临床意义。 方法 用酶联免疫吸附试验（ELISA法）检测71例NSCLC患者的sVEGF水平。 结果 NSCLC患者sVEGF水平与肿瘤大小无明显相关性。sVEGF在鳞癌与腺癌患者的表达水平分别是（163.4±22.4） pg/mL、（152.4±20.6） pg/mL（P < 0.05）。sVEGF在有或無淋巴结转移患者表达水平分别是（182.1±22.1） pg/mL、（137.2±19.1） pg/mL（P < 0.05）。 结论 sVEGF在NSCLC中表达与肿瘤病理类型、淋巴结转移有关，是NSCLC增生和转移的重要指标。

[关键词] 非小细胞肺癌；血管内皮细胞生长因子；酶联免疫吸附试验；相关性

[中图分类号] R446[文献标识码] A[文章编号] 1674-4721（2012）07（c）-0130-02

Research on correlation between sVEGF and NSCLC

YUAN Yonggang ZHANG Wei MA Ge

Yidu Central Hospital Affiliated to Weifang Medical College, Qingzhou 262500, China

[Abstract] Objective To investigate the clinical significance of the appearance of serum vascular endothelial growth factor(sVEGF) in non-small cell lung cancer (NSCLC) patients. Methods Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was used to detect the sVEGF level of 71 patients from Octoberm 2009 to Feburay 2012. Results There was no significant correlation between sVEGF in NSCLC patients and the tumor size. The sVEGF level of squamous carcinoma and adenocarcinoma were (163.4±22.4) pg/mL and (152.4±20.6) pg/mL respectively (P < 0.05). While the number in patients with or without lymph node metastasis were (182.1±22.1) pg/mL and (137.2±19.1) pg/mL respectively (P < 0.05). Conclusion The presence of sVEGF in NSCLC has relation wiht the tumor pathological type and lymph node metastasis. So it can be used as a significant index to reflect the tumor proliferation and metastasis.

[Key words] Non-small cell lung cancer; Vascular endothelial growth factor; Enzyme-linked immunosorbent assay; Correlation

肺癌是最常见的恶性肿瘤之一，及时准确地判定其转移具有重要意义。本文通过检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者的血清血管内皮细胞生长因子（sVEGF）水平，探讨其与NSCLC患者的肿瘤大小、组织学分型、淋巴结转移的关系和临床意义，以期为临床治疗提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2009年10月～2012年2月间在本院胸外科接受治疗、资料完整、术前未接受任何相关放化疗治疗，并经术后病理确诊为鳞癌或腺癌的71例NSCLC患者资料， 其中，男性49例，女性22例，年龄36～78岁，中位年龄62岁。TNM分期采用2003AJCC非小细胞肺癌分期系统的标准，ⅡA期4例，ⅡB期5例，ⅢA期14例，ⅢB期21例，Ⅳ期27例。

1.2 试剂及方法

采取外周静脉血3 mL，置于促凝管中，于4℃ 3 000 r/min离心10 min，分离血清，置-70℃冻存备测。血清VEGF检测采用酶联免疫吸附试验（ELISA法）。方法与步骤：（1）包被抗体；（2）洗涤，移去包被液，凹孔用洗涤缓冲液洗3次，每次5 min；（3）每凹孔加入0.2 mL用稀释缓冲液稀释的含抗原的被检标本，37℃作用1～2 h；（4）洗涤，重复步骤（2）；（5）加入0.2 mL用稀释缓冲液稀释的酶标记特异性抗体溶液，37℃作用1～2 h或由预试实验确定作用时间；（6）洗涤，重复步骤（2）；（7）加入0.2 mL底物溶液于每个凹孔，室温作用30 min（另作一空白对照，0.4 mL底物加0.1 mL终止剂）；（8）加终止剂；（9）观察记录结果：用酶标比色计测定OD值；（10）各孔OD值减去空白对照孔OD值为实际OD值；（11）以标准品浓度50、25、10、5、2.5、1 ng/mL之OD值为横坐标（对数坐标），OD值为纵坐标（普通坐标），绘出标准曲线；（12）根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；（13）敏感度为0.01 ng/mL；（14）正常值<1.5 ng/mL。

1.3 统计学处理

采用SPSS 13.0统计软件包，以x±s表示sVEGF的水平，两样本均数比较采用t检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

NSCLC患者sVEGF水平与肿瘤大小无明显相关性，与肿瘤病理类型及有无淋巴结转移有相关性。见表1、2、3。

3 讨论

3.1 VEGF与NSCLC

已有研究[1]表明肿瘤是血管生成依赖性疾病，几乎所有实体肿瘤的生长和转移均依赖于肿瘤血管的生成。目前研究表明，VEGF是作用最强、特异性最高的血管生成调控因子[2-3]。在约60%的肺癌患者中VEGF会特异性的表达增高，可由肿瘤细胞自分泌产生，或由肿瘤细胞异常增生使其处于缺氧条件下诱导产生，以旁分泌方式特异地作用于血管内皮细胞膜上的两种酪氨酸激酶受体，通过细胞黏附修饰蛋白，增加蛋白水解酶分泌，刺激新生血管的生成、增殖、迁移，并可显著地增加微血管的通透性[4]。

3.2 NSCLC患者sVEGF水平与各临床病理特征的关系

3.2.1 sVEGF的表达与NSCLC组织病理学类型关系本实验发现71例非小细胞肺癌组织中，鳞癌和腺癌的血清VEGF平均表达水平分别是（163.4±22.4） pg/mL和（152.4±20.6） pg/mL，两组比较，差异有统计学意义（P < 0.05）。国外在这方面也有类似研究，如Buttery等应用酶联免疫吸附试验分析研究sVEGF在47例非小细胞肺癌与18例小细胞肺癌中的表达，结果提示sVEGF在鳞癌中呈高表达（42/47），在腺癌中呈低表达（5/18）。

3.2.2 sVEGF的表达与NSCLC肿瘤大小的关系在本实验中，肿瘤≥5 cm患者平均sVEGF水平为(162.5±21.8) pg/mL，肿瘤<5 cm患者的平均sVEGF水平为（154.5±26.5） pg/mL，两组比较，差异无统计学意义（P > 0.05），提示NSCLC患者sVEGF水平与肿瘤大小无明显相关性。

3.2.3 NSCLC患者sVEGF表达与淋巴结转移的关系淋巴管转移是非小细胞肺癌转移的重要途径，是其预后不良的重要危险因素之一。将本组71例NSCLC标本按照有无淋巴结转移分组发现，sVEGF表达与淋巴结转移密切相关：sVEGF在有淋巴结转移组的表达高于无淋巴结转移组，而且淋巴结转移组sVEGF的强阳性表达远高于無淋巴结转移组。吕志强等[5]、Kajiat T等[6]、郭沁香[7]亦有相似发现。由此推论，sVEGF可能参与NSCLC远处转移。关于VEGF促进肿瘤的淋巴管生长及淋巴结转移的作用途径，多数研究认为VEGF与其受体结合后，引起内皮细胞的增殖和迁移，调控血管及淋巴管的生成从而在肿瘤的进展中发挥重要作用[8]。

[参考文献]

[1]Folkman J，Beckner K. Angiogenesis imaging[J]. Acad Radio，2000，7（10）：783-785.

[2]Borgstrom P，Hillan KJ，Sriramarao P，et al. Complete inhibition of angiogenesis and growth of microtumors by antivascular endothelial growth factor neutralizing antibody：novel concepts of angiostatic therapy from intravital videomicroscopy[J]. Cancer Res，1996，56（17）：4032-4039.

[3]张帅，胡立宽，许曼，等. 血清VEGF水平在非小细胞肺癌综合评价中的作用[J]. 山东大学学报（医学版），2008，46（12）：1177-1180.

[4]Dvorak HF，Nagy JA，Feng D，et al. Vascular permeabilityfactor/vascular endothelial growth factor and the significance of microvascular hyperpermeability in angiogenesis[J]. Curr Top Microbiol Immunol，1999，237（20）：97-132.

[5]吕志强，李海刚，谢德荣,等. 非小细胞肺癌组织中VEGF-C和VEGFR-3的表达及其临床意义[J]. 癌症，2005，24（9）：1132-1135.

[6]Kajiat T，Ohta Y，Kimura K，et al. The experssion of vascular endohetlial growth factor C and its receptors in non-small cell lung cancer[J]. Br J Cancer，2001，85（2）：255-260.

[7]郭沁香. VEGF、bFGF及抗血管生成疗法在肺癌诊断、治疗中的应用研究[D]. 山西医科大学，2008.

[8]Christoph W，Michael D. Pathways targeting tumor lymphangiogenesis[J]. Clin Cancer Res，2006，12（23）：6865-6868.

（收稿日期：2012-06-14本文编辑：陈俊）