饲料中亚麻籽替代部分大豆油对异育银鲫鱼苗生长性能、肌肉组成及血清生化指标的影响

顾夕章 高启平* 谢 骏 张媛媛 蒋宗杰 刘 波 戈贤平 李云兰

(1.通威股份有限公司技术中心水产研究所，成都 610041;2.中国水产科学研究院淡水渔业研究中心，无锡 214081)

随着饲料工业的快速发展，油脂类原料特别是大豆油的价格快速上涨，饲料生产企业和鱼类营养研究者正积极探讨其他油脂部分或全部替代大豆油的可能性。亚麻是重要油料作物之一，居世界油料总产量的第7位。亚麻籽虽含有生氰糖甙、亚麻籽胶和抗维生素B6等，但油脂含量高达38%，亚麻籽油中的亚麻酸含量高达55%(大豆油中仅为8%)，粗蛋白质含量为19.3%，赖氨酸和蛋氨酸含量分别为0.93%和0.37%。关于亚麻籽应用的研究报道主要集中在牛、羊等反刍动物及鸡饲料方面［1－2］，或是亚麻籽油在鱼饲料中的应用研究，很少有在鱼饲料中直接使用亚麻籽的报道。本试验开展了亚麻籽应用于异育银鲫饲料中的试验研究，旨在探讨异育银鲫饲料中亚麻籽的适宜用量，为异育银鲫配合饲料节省原料成本提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物及试验设计

异育银鲫(Carassius auratus gibelio)鱼苗由中国水产科学研究院淡水渔业研究中心南泉养殖试验基地提供。经15d暂养、驯化后，选择体格健康、初均重(14.32±0.02)g的异育银鲫336尾，随机分为4个组，每组设3个重复，每个重复放鱼28尾，以重复为单位放养于实验室可控温流水循环系统中的12个圆形蓄养槽中。

1.2 试验饲料

试验以鱼粉、豆粕、菜籽粕、棉籽粕为蛋白质源，以大豆油为脂肪源配制基础饲料，用亚麻籽替代部分大豆油配制3种与基础饲料等氮、等能的试验饲料，用面粉和200型菜籽粕来调节蛋白质平衡。Ⅰ组为对照组，饲喂基础饲料(大豆油含量为 5.4%)，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别饲喂用 2.40%、4.80%和7.20%亚麻籽替代基础饲料中16.67%、33.33%和50.00%大豆油的试验饲料。饲料组成及营养水平见表1。饲料原料经粉碎过40目筛，混合均匀后用SLP－45小型颗粒机(中国水产科学研究院渔业机械仪器研究所研制)加工成直径1.5 mm、长3～4 mm的颗粒饲料，电风扇条件下干燥后置于冰箱中4℃密封保存。

表1 饲料组成及营养水平(风干基础)Table 1 Composition and nutrient levels ofdiets(air-dry basis) %

1.3 饲养管理

养殖设施为室内控温流水循环养殖系统，单个圆形蓄养槽规格为820 mm×700 mm，以曝气自来水为水源，使用自动控电开关调节水温度，日夜连续充气增氧、控温，定期测量水质。整个试验期间水质条件为:水温 24.5～27.5℃、溶解氧在6 mg/L以上、氨氮在0.1 mg/L以下、亚硝酸盐在0.1 mg/L 以下、pH 6.8 ～ 7.0。饲料于每天08:30、12:30、16:30各投喂1次，投喂量为各试验组鱼体体重的3%～4%。

1.4 样品采集与分析

1.4.1 生物学指标的测定方法

饲养试验第63天每缸随机抽取3尾鱼测定体重、体长、内脏重、肝脏重，用于肥满度、内脏比、肝体比的测定。采样前停喂24 h，对每缸分别进行称重，测定每缸鱼的总体重和尾数，计算特定生长率、饲料系数。

1.4.2 常规营养成分的测定方法

1.4.2.1 样品制备

每缸随机抽取3尾鱼，每组采集9尾鱼。自鱼体两侧头盖骨后至尾鳍前取体背肌肉样品，剪碎、混匀后一部分用于常规营养成分的测定;另一部分冷冻干燥，用于脂肪酸的测定。

1.4.2.2 营养成分的测定

鱼体肌肉水分含量测定采用105℃烘干法;粗蛋白质含量测定采用微量凯氏定氮法;粗脂肪含量测定采用全脂肪法;粗灰分含量测定采用小火炭化后马福炉560℃灼烧法。

1.4.2.3 脂肪酸的测定

每缸随机抽取3尾鱼，每组采集9尾鱼，每3尾鱼作1个混合样本，每组脂肪酸分析3个样本。总脂肪酸的测定采用冯大伟等［3］的方法，氯仿∶甲醇∶H2O=2∶2∶1 抽提总脂肪，分别用 1 mol/L 氢氧化钾－甲醇和0.5 mol/L硫酸甲醇溶液使脂肪酸甲酯化，再用正庚烷萃取脂肪酸甲酯。样品皂化甲酯化后，直接上气相色谱－质谱仪进行分析。检索美国国家标准与技术研究院(NIST)质谱图库，比较样品质谱图与图库中标准质谱图，以确定样品中脂肪酸种类，各脂肪酸相对含量的确定采用面积归一化法计算。

1.4.3 血清生化指标测定

养殖试验结束后分别从每个缸随机取异育银鲫3尾，每组9尾鱼，麻醉后用纱布擦干尾部，采用一次性注射器尾静脉采血，于4℃冰箱中静置3 h后，10 000 r/min、4 ℃离心 5 min，提取血清，置于－70℃冰箱中保存备用，用于血清生化指标的测定。碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)活性采用骏实生物技术有限公司生产的试剂盒在美国贝克曼Cx－4型自动生化分析仪上测定。血清葡萄糖(glucose，Glu)含量用葡萄糖氧化酶－过氧化物酶终点比色法(美国贝克曼Cx－4型自动生化分析仪)测定，试剂盒购自卫生部上海生物制品研究所。血清谷草转氨酶(aspartate aminotransferase，AST) 活性及胆固醇(cholesterol，CHOL)、甘油三酯(triglyceride，TG)、总蛋白(total protein，TP)、白蛋白(albumin，AP)、球蛋白(globin，GP)含量采用比色法(美国贝克曼Cx－4型自动生化分析仪)测定，试剂盒购自上海名典生物工程公司。血清皮质醇(cortisol，COR)含量采用放射免疫法(RIA)测定，试剂盒购自北京北方生物技术研究所。

1.5 相关指标计算公式

特定生长率(specific growth rate，SGR，%/d)=100×(ln末均重－ln初均重)/饲养天数;

饲料系数(feed conversion ratio，FCR)=每个缸投喂饲料总量/每个缸鱼体总增重量;

肝体比(hepatosomatic index，HIS，%)=100 ×试验末鱼体肝重/试验末鱼体重;

肥满度(condition factor，CF，%)=100 ×试验末鱼体重/试验末鱼体长度3;

内脏比(viserosomatic index，VSI，%)=100 ×(试验末鱼内脏重/试验末鱼体重)。

1.6 数据处理与分析

试验结果采用SPSS 13.5软件进行统计分析，采用Duncan氏法多重比较检验组间差异，数据用平均值±标准误表示，以P＜0.05表示差异显著。

2 结果与分析

2.1 饲料中亚麻籽替代部分大豆油对异育银鲫鱼苗生长性能的影响

由表2可见，各组间鱼体特定生长率、饲料系数没有显著差异(P＞0.05)。各组鲫鱼的末均重依次为Ⅱ组＞Ⅲ组＞Ⅳ组＞Ⅰ组，Ⅱ组鲫鱼的增重最大。Ⅲ、Ⅳ组鲫鱼特定生长率相当(P＞0.05)。以上结果说明，饲料中使用亚麻籽替代部分大豆油对鲫鱼的生长性能没有显著影响。

2.2 饲料中亚麻籽替代部分大豆油对异育银鲫鱼苗形体指标及肌肉成分的影响

由表3可见，与对照组相比，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组的鱼体肥满度显著提高(P＜0.05)，Ⅲ组的鱼体内脏比显著提高(P＜0.05)。各组异育银鲫的肝体比无显著差异(P＞0.05)。由表4可见，各组鱼体肌肉水分、粗脂肪、粗灰分含量差异不显著(P＞0.05);与对照组相比，Ⅲ、Ⅳ组鱼体肌肉粗蛋白质含量显著降低(P＜0.05)。以上结果说明，饲料中使用一定水平的亚麻籽有利于提高鱼体的肥满度，但鱼体肌肉中粗脂肪、粗蛋白质含量会下降，尤其是肌肉粗蛋白质含量会较对照组显著下降。

由表5可见，随着亚麻籽水平增加，鱼体肌肉中亚麻酸水平相应增加，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组鱼体肌肉中亚麻酸含量显著高于对照组(P＜0.05)，其他脂肪酸含量与对照组无显著差异(P＞0.05)。这说明饲料中使用亚麻籽会显著提高鱼体肌肉中亚麻酸含量。

表2 异育银鲫的生长性能Table 2 The growth performance of allogynogenetic silver crucian carp(n=3)

表3 异育银鲫的肝体比、肥满度和内脏比Table 3 The HSI，CF and VSI of allogynogenetic silver crucian carp(n=9) %

表4 异育银鲫肌肉成分Table 4 The muscle composition of allogynogenetic silver crucian carp(n=9)

表5 异育银鲫肌肉的脂肪酸组成Table 5 The fatty acid composition of allogynogenetic silver crucian carp(n=3) %

2.3 饲料亚麻籽替代部分大豆油对异育银鲫鱼苗血清生化指标的影响

由表6可见，各组之间血清谷草转氨酶、碱性磷酸酶活性及甘油三酯、皮质醇、总蛋白、白蛋白、球蛋白含量没有显著差异(P＞0.05)。I组异育银鲫血清葡萄糖含量显著高于Ⅲ、Ⅳ组(P＜0.05);Ⅲ、Ⅳ组异育银鲫血清胆固醇含量显著高于Ⅰ、Ⅱ组(P ＜0.05)。

表6 异育银鲫的血清生化指标Table 6 The serum biochemical indices of allogynogenetic silver crucian carp(n=9)

3 讨论

淡水鱼能很好地利用n-3和n-6短链脂肪酸，它们能够将这些短链脂肪酸延长和去饱和，变成代谢所需的长链脂肪酸［3］。姜召山等［4］的研究结果表明，基础饲料中添加亚麻酸能提高鲫鱼的增长率和特定生长率，降低饲料系数。本试验结果表明，在饲料中使用少量的亚麻籽替代大豆油对异育银鲫生长性能没有显著影响，说明在异育银鲫饲料中可使用亚麻籽替代部分大豆油，这可能跟亚麻籽能直接在饲料中提供亚麻酸有关。亚麻籽在动物饲料中使用受制约的因素主要有:1)含有生氰糖甙，可引起动物氢氰酸中毒。生氰糖甙在进入动物机体后，在体内酶的作用下，被水解为剧毒的氢氰酸，氢氰酸和氰化物容易经消化道或呼吸道被吸收，氢基根和体内组织细胞含有的细胞色素氧化酶中的铁结合，使细胞色素氧化酶的正常生物氧化过程不能进行，造成组织细胞缺氧，引起动物中枢神经系统机能严重障碍，发生兴奋、痉挛、抑郁、迅速死亡;2)亚麻籽种子体积小、外皮坚实、脂肪含量高，增加了饲料生产工艺上的粉碎难度;3)亚麻籽含有亚麻籽胶和抗维生素B6，对动物产生有害作用［5－7］。

为期63d的异育银鲫养殖试验过程中没有发现添加亚麻籽后对鱼体生长有明显的负面影响。这可能是与亚麻籽含量，尤其是亚麻籽中的氢氰酸含量不高有关。从养殖试验结束后对鱼体血清生化指标的检测数据来看，添加亚麻籽饲料组鱼体的血清生化指标中葡萄糖、胆固醇发生了一定程度的变化，而皮质醇、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、甘油三酯等指标没有明显变化。这表明使用亚麻籽后对异育银鲫苗种生理上产生了一定程度的影响，但对肝功能没有造成明显的负面影响。通过通威检测中心检测，亚麻籽中氢氰酸的含量为140 mg/kg，折算到饲料中因其所带来的氢氰酸最高含量为10.02 mg/kg，这远远低于国家卫生标准(氢氰酸含量小于350 mg/kg;猪鸡饲料中小于50 mg/kg)。Abd-Aleem 等［8］的研究表明，鲤鱼饲料中当生氰糖甙含量为379 mg/kg的亚麻籽饼用量不超过8%时不会明显影响鱼体生长，该试验亚麻籽饼的适宜用量较高，分析认为可能是与该试验饲料的原料组成有关。

研究表明，亚麻籽在饲料中的应用可以提高肉鸡［9］、反刍动物［10］等肉品质。姜召山等［4］的研究也表明，饲料中添加亚麻酸能显著提高鱼体蛋白质和脂肪的含量。本试验中亚麻籽的使用能显著提高异育银鲫肌肉中亚麻酸含量。这可能是因为亚麻籽中含有亚麻酸，提高了异育银鲫肌肉中的亚麻酸含量，这与王利华等［11］在蛋鸡、郎婧等［12］在猪方面的研究结果一致。但是如果使用过多的亚麻籽，如在异育银鲫饲料中使用4.80%、7.20%的亚麻籽替代大豆油时，显著降低了肌肉粗蛋白质含量。分析认为这可能与亚麻籽中的毒素含量有关，具体还有待进一步研究。

4 结论

① 饲料中使用 2.40%、4.80%、7.20% 亚麻籽替代部分大豆油对异育银鲫生长性能无显著影响，并提高了肌肉亚麻酸含量。

②育银鲫饲料中使用过多的亚麻籽(4.80%、7.20%)替代大豆油时可显著降低肌肉粗蛋白质含量，降低血清葡萄糖含量，增加血清胆固醇含量。

③综合分析可知，异育银鲫鱼苗饲料中亚麻籽替代大豆油以不超过2.40%为宜。

［1］ 许蕾蕾，李秋凤，李建国，等.亚麻籽对育肥期肉牛生长性能和血液指标的影响［J］.中国牛业科学，2012，38(1):5 －9.

［2］ 张爱武，董斌，左璐雅.亚麻籽的营养及其在禽类饲料中的应用［J］.饲料工业，2011，32(5):51－54.

［3］ 韩菲菲，汪以真.必需脂肪酸在鱼虾饲料中的应用［J］.饲料研究，2004(1):15 －19.

［4］ 姜召山，王锐，刘辉宇.亚麻酸对鲫鱼生长性能和鱼体成分的影响［J］.粮食与饲料工业，2010(6):56－58.

［5］ 谢欣梅.亚麻籽在动物饲料中的应用潜力［J］.内蒙古民族大学学报，2005，20(5):530 －532.

［6］ 周小洁，车向荣，于霏.亚麻籽及其饼粕的营养学和毒理学研究进展［J］.饲料工业，2005，26(19):46 －50.

［7］ 孙中义.亚麻籽试用研究进展［J］.中国麻业科学，2010，32(1):37 －44.

［8］ ABD-ALEEM I M，SOLTAN M A.Nutritional value improvement of flax meal and its utilization for carp fishdiets［C］//The 3rd conference on recent technologies in agriculture.［S.l.］:［s.n.］，2005.

［9］ 黄玉兰，杨焕民，李祥辉.亚麻籽对AA肉鸡生产性能及胴体品质的影响［J］.黑龙江畜牧兽医，2010(9):81－83.

［10］ 武雅楠，李建国.亚麻籽对反刍动物消化吸收及肉品质的影响［J］.黑龙江畜牧兽医，2007(1):30－31.

［11］ 王利华，霍贵成，杨丽洁.亚麻籽脂肪酸在蛋黄中的沉积效果［J］.中国饲料，2002(12):8－11.

［12］ 郎婧，石宝明，张宏宇，等.亚麻籽中n-3多不饱和脂肪酸对猪机体脂肪酸组成和肉品质的影响［J］.中国饲料，2010(8):9－12.