大头艾纳香化学成分的研究

钟林静，林小燕，黄明玉，黄秀旺，张永红

福建医科大学药学院，福州350004

大头艾纳香(Blumea megacephala(Randeria) Chang et Tseng)为菊科(Compositae)艾纳香属(Blumea)植物。又名东风草、白花九里明，生于林缘或灌丛中。广泛分布于云南、四川、贵州、广西、广东、福建及台湾等省区［1］。性味微苦、淡，微温，能祛风除湿，活血调经。主治风湿骨痛，跌打肿痛，产后血崩，月经不调;外用治疮疖［2］。到目前为止，关于该植物化学成分的文献报道较少，主要是关于大头艾纳香中挥发油成分的分析及其抗菌活性［3］和不同采收月份的大头艾纳香中原儿茶酸、绿原酸和咖啡酸的含量测定［4］。为了阐明大头艾纳香生物活性的物质基础，我们对其化学成分进行了系统研究。我们从该植物的全草中分离并鉴定了十三个化合物，分别为无羁萜(1)、小麦黄素(2)、豆甾醇二十六烷酸酯(3)、豆甾醇十八烷酸酯(4)、α-香树脂醇(5)、α-香树脂醇乙酸酯(6)、β-香树脂醇乙酸酯(7)、β-谷甾醇(8)、豆甾醇(9)、β-胡萝卜苷(10)、二十七烷醇(11)、十六烷酸(12)、二十四烷酸(13)。所有化合物均为首次从该植物中分离得到。

1 仪器与材料

WRS-1B数字熔点测定仪，IR-FT Nicolet型红外分光光度仪(KBr压片)，VG2AB-HS质谱仪，Bruker AM-400型核磁共振仪(1H NMR:400 MHz，13C NMR:100 MHz)，BUCHI Rotavapor R-200旋转蒸发仪。柱层层析硅胶(100～200目，200～300目，300～400目)为青岛海洋化工厂分厂产品;柱色谱用Sephadex LH-20(Pharmacia公司产品，上海化学试剂厂进口封装)，薄层层析硅胶G(60)青岛海洋化工集团公司出品。显色剂为5%硫酸乙醇溶液。所有试剂均为分析纯。

大头艾纳香采自福建省福州市高盖山，由福建医科大学天然药物化学系张永红教授鉴定为Blumea megacephala(Randeria)Chang et Tseng。

2 提取与分离

大头艾纳香全草(10 kg)干燥，粉碎后用30000 mL的95%乙醇常温提取3次，每次7 d。合并提取液回收溶剂得到乙醇浸膏，混悬于水中，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收溶剂得到石油醚(209.8 g)，乙酸乙酯(65 g)，正丁醇(120 g)三部分浸膏。

石油醚萃取物用等量硅胶拌样，上硅胶柱，用石油醚-乙酸乙酯(1∶0～0∶1)梯度洗脱，最后用甲醇冲柱，得到十三个部分Fr.Ⅰ～Fr.XIII。其中Fr.Ⅰ(21 g)经过反复硅胶柱的分离纯化，得到化合物1 (21 mg)、3(12 mg)、4(18 mg)、5(11 mg)、6(23 mg)和7(17 mg);Fr.Ⅱ、Fr.Ⅲ、Fr.Ⅳ经过反复硅胶柱纯化分别得到化合物13(45 mg)、11(35 mg)和12(33 mg)。乙酸乙酯部位大致相似，得到十三个部分Fr.Ⅰ～Fr.XIII。其中Fr.Ⅴ经硅胶柱纯化得到化合物9(57 mg);Fr.Ⅶ先经Sephadex LH-20柱分离，以甲醇-氯仿(1∶1)洗脱，后再经硅胶柱层析纯化得到化合物8(115 mg)。正丁醇部位经硅胶柱层析，用石油醚-乙酸乙酯-甲醇梯度洗脱，经TLC检测合并相同馏分，得到十六个部分Fr.Ⅰ～Fr.XVI。其中Fr.Ⅸ析出结晶，得到化合物10(102 mg);Fr.XVI经Sephadex LH-20柱分离纯化，以甲醇-氯仿(1∶1)洗脱，得到化合物2(26 mg)。

3 结构鉴定

化合物1 白色细针结晶(氯仿)，mp.262～268℃，分子式C30H50O;IR(KBr)cm-1:2925，2869，1715(C=O)，1389;1H NMR(CDCl3，400 MHz)δ: 0.73(3H，s，H-24)，0.87(3H，s，H-25)，0.88(3H，d，J=6.4 Hz，H-23)，0.95(3H，s，H-30)，1.00(3H，s，H-26)，1.01(3H，s，H-29)，1.05(3H，s，H-27)，1.18 (3H，s，H-28)，2.24(1H，q，H-4)，2.35(2H，m，H-1);13C NMR(CDCl3，100 MHz)δ:22.3(C-1)，41.5 (C-2)，213.1(C-3)，58.2(C-4)，42.2(C-5)，41.3 (C-6)，18.3(C-7)，53.1(C-8)，37.5(C-9)，59.5(C-10)，35.6(C-11)，30.5(C-12)，39.7(C-13)，38.3 (C-14)，32.4(C-15)，36.0(C-16)，30.0(C-17)，42.8(C-18)，35.4(C-19)，28.2(C-20)，32.8(C-21)，39.3(C-22)，6.8(C-23)，14.7(C-24)，17.9(C-25)，20.3(C-26)，18.7(C-27)，32.1(C-28)，35.0 (C-29)，31.8(C-30)。以上数据与文献［5，6］报道一致，故鉴定其为无羁萜。

化合物2 黄色针状结晶(甲醇)，mp.289～291℃，分子式 C17H14O7;IR(KBr)cm-1:3388 (OH)，1654(C=O)，1611，1508(苯环);1H NMR (DMSO-d6，400 MHz)δ:3.88(6H，s，2×OCH3)，6.19(1H，d，J=2.0 Hz，H-6)，6.55(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，6.97(1H，s，H-3)，7.32(2H，s，H-2'，6')，12.96(1H，s，5-OH);13C NMR(DMSO-d6，100 MHz) δ:164.1(C-2)，104.1(C-3)，182.3(C-4)，157.8(C-5)，99.3(C-6)，164.6(C-7)，94.6(C-8)，161.9(C-9)，120.9(C-10)，140.3(C-1')，104.9(C-2')，148.7 (C-3')，164.1(C-4')，148.7(C-5')，104.9(C-6')。以上数据与文献［7］报道一致，故鉴定其为5，7，4'-三羟基-3'，5'-二甲氧基黄酮(小麦黄素)。

化合物3 白色颗粒结晶(氯仿)，分子式C55H98O2，TLC检测，以石油醚:乙酸乙酯(10:1)为展开剂，用5%硫酸乙醇溶液显色，显紫色，提示该化合物可能为甾体或三萜。1H NMR(CDCl3，400 MHz) δ:5.36(1H，d，J=4.4 Hz，H-6)，0.69(3H，s，18-CH3)，δ0.79～1.07显示有多个甲基质子信号，δ2.29(1H，t，J=6.0 Hz)是与羰基相连的亚甲基质子信号;13C NMR(CDCl3，100 MHz)δ:173.4显示有酯羰基碳信号，δ139.7，138.3，129.3，122.6，为两对烯碳信号，这是典型的豆甾醇5，6和22，23位烯碳信号，δ34.7、31.9、29.7、29.7、29.5、29.5、29.4、29.2、24.4和22.7提示存在多个亚甲基碳信号，根据以上信息推断该化合物为豆甾醇的脂肪酸酯。质谱给出强的麦氏重排所形成的碎片峰396，为形成的稳定碎片—长链脂肪酸部分，382、340、284、256、213、111、97、57和43，由此推断脂肪酸为二十六烷酸。与豆甾醇的13C NMR比较［8］，甾醇的3位化学位移偏高(δ73.66)，证明脂肪酸的酰基同豆甾醇的3位相连，故鉴定其为豆甾醇二十六烷酸酯。

化合物4 白色颗粒结晶(氯仿)，分子式 C47H82O2，TLC检测，以石油醚:乙酸乙酯(10∶1)为展开剂，用5%硫酸乙醇溶液显色，显紫色，提示该化合物可能为甾体或三萜。1H和13C NMR谱图与化合物3的谱图相似，但质谱给出强的麦氏重排所形成的碎片峰为284，是形成的稳定碎片—长链脂肪酸部分，256、213、111、97、84、57和43，由此推断脂肪酸为十八烷酸。化合物4的3位化学位移偏高(δ73.65)，证明脂肪酸的酰基同豆甾醇的3位相连，故鉴定其为豆甾醇十八烷酸酯。

化合物5 无色细针状结晶，mp.148～150℃，分子式C30H50O。在5%硫酸乙醇溶液中显紫红色，Liebermann-Burchard反应阳性。IR(KBr)cm-1:3282 (-OH)，1464与1383(偕二甲基)。EI-MS m/z 426［M］+。1H NMR(CDCl3，400 MHz)δ:5.18(1H，J= 3.6 Hz，H-12)，3.20(1H，dd，J=5.2，10.8 Hz，H-3)，1.25～0.85之间有8个甲基氢信号(δ1.07、1.01、1.00、0.95、0.91、0.80、0.79)。13C NMR (CDCl3，100 MHz)δ:38.8(C-1)，27.2(C-2)，78.3 (C-3)，38.7(C-4)，55.2(C-5)，18.3(C-6)，32.9(C-7)，40.0(C-8)，47.7(C-9)，36.9(C-10)，23.3(C-11)，124.3(C-12)，139.7(C-13)，42.1(C-14)，28.7 (C-15)，26.6(C-16)，33.7(C-17)，59.0(C-18)，39.6(C-19)，36.6(C-20)，31.2(C-21)，41.5(C-22)，28.1(C-23)，15.5(C-24)，15.6(C-25)，16.8 (C-26)，23.3(C-27)，28.1(C-28)，17.4(C-29)，21.3(C-30)。以上数据与文献［9，10］报道一致，故鉴定其为α-香树脂醇。

化合物6 无色针状晶体，mp.216～219℃，分子式 C32H52O2。IR(KBr)cm-1:2944，2852，1455，1369(CH)，1732(-O-C=O)。1H NMR(CDCl3，400 MHz)δ:5.13(1H，t，J=3.6 Hz，H-12)，2.05(3H，s，-COOCH3)，1.08(3H，s，H-28)，1.01(3H，s，H-23)，1.00(3H，s，H-27)，0.90(3H，d，J=3.2 Hz，H-29)，0.88(3H，s，H-26)，0.87(3H，s，H-24)，0.83 (3H，s，H-25)，0.80(3H，s，H-30);13C NMR(CDCl3，100 MHz):38.5(C-1)，23.6(C-2)，80.9(C-3)，37.7 (C-4)，55.3(C-5)，18.2(C-6)，32.9(C-7)，40.0(C-8)，47.6(C-9)，36.8(C-10)，23.4(C-11)，124.3(C-12)，139.6(C-13)，42.1(C-14)，28.7(C-15)，26.6 (C-16)，33.7(C-17)，59.1(C-18)，39.6(C-19)，36.6(C-20)，31.2(C-21)，41.5(C-22)，28.0(C-23)，16.7(C-24)，15.7(C-25)，16.8(C-26)，23.2 (C-27)，28.0(C-28)，17.5(C-29)，21.4(C-30)，173.8(O-C=O)，21.3(O-C=O-CH3)。以上数据与文献［11］报道一致，故鉴定其为α-香树脂醇乙酸酯。

化合物7 无色雪花状晶体，mp.238～239℃，分子式C32H52O2。IR(KBr)cm-1:2944，2852，1455，1369(CH)，1732(-O-C=O)。1H NMR(CDCl3，400 MHz)δ:0.85(3H，s，28-CH3)，0.89(12H，m，23，24，29，30-CH3)，0.98(6H，d，J=6.0 Hz，25，26-CH3)，1.13(3H，s，27-CH3)，2.05(3H，s，CH3CO);13C NMR(CDCl3，100 MHz):38.3(C-1)，23.7(C-2)，80.9(C-3)，37.7(C-4)，55.3(C-5)，18.2(C-6)，32.6(C-7)，39.8(C-8)，47.6(C-9)，36.8(C-10)， 23.5(C-11)，121.6(C-12)，145.2(C-13)，41.7(C-14)，28.4(C-15)，26.1(C-16)，32.5(C-17)，47.2 (C-18)，46.8(C-19)，31.1(C-20)，34.7(C-21)，37.1(C-22)，28.1(C-23)，16.8(C-24)，15.5(C-25)，16.7(C-26)，25.9(C-27)，26.9(C-28)，33.3 (C-29)，23.6(C-30)，171.0(O-C=O)，21.3(O-C= O-CH3)。以上数据与文献［12］报道一致，故鉴定其为β-香树脂醇乙酸酯。

化合物8 无色针状结晶(氯仿)，mp.129～130℃，分子式C29H50O。在5%硫酸乙醇溶液中显紫红色，与β-谷甾醇标准品TLC检测Rf值一致，Liebermann-Burchard反应阳性。IR(KBr)cm-1: 3400(OH)，2960和2867(CH)，1640(C=C)。EIMS m/z 414［M］+，396，381，329，303，255，213，69。1H NMR(CDCl3，400 MHz)δ:5.35(1H，m，H-5)，3.52(1H，m，H-3)，0.68(3H，s，18-CH3)。以上数据与文献［13］报道的β-谷甾醇一致，故鉴定其为β-谷甾醇。

化合物9 无色针状结晶(氯仿)，mp.168～170℃，分子式C29H48O。在5%硫酸乙醇溶液中显紫红色，Liebrrmann-Burchard反应阳性。EI-MS m/z 412［M］+，397，379，300，273，255，231，213;1H NMR (CDCl3，400 MHz)δ:5.35(1H，d，J=5.2 Hz，H-6)，3.52(1H，m，H-3)，0.69(3H，s，18-CH3);13C NMR (CDCl3，100 MHz)δ:37.2(C-1)，31.6(C-2)，71.8 (C-3)，42.3(C-4)，140.7(C-5)，121.7(C-6)，31.9 (C-7)，31.9(C-8)，50.2(C-9)，36.5(C-10)，21.1 (C-11)，39.8(C-12)，42.3(C-13)，56.9(C-14)，24.4(C-15)，28.9(C-16)，55.9(C-17)，12.0(C-18)，19.4(C-19)，40.5(C-20)，21.2(C-21)，138.3(C-22)，129.3(C-23)，51.2(C-24)，31.9 (C-25)，21.1(C-26)，19.0(C-27)，25.4(C-28)，12.3(C-29)。以上数据与文献［14］报道的豆甾醇--致，故鉴定其为豆甾醇。

化合物10 白色粉末，分子式 C35H60O6，难溶于乙酸乙酯、丙酮、DMSO，微溶于氯仿、甲醇，易溶于吡啶。在5%硫酸乙醇溶液中显紫红色，TLC检测在多种展开体系中与β-胡萝卜苷标准品Rf一致，且混合熔点不下降。故鉴定为β-胡萝卜苷。

化合物11 白色粉末，mp.75～76℃，分子式C27H56O，IR(KBr)cm-1:3430(OH)，2917，2849，1472，1462，1046，723;EI-MS m/z:396［M］+，378［M -18］+，350，196，182，168，153，139，125，111，97， 83，69，55，43;1H NMR(CDCl3，400 MHz)δ:3.64 (2H，t，J=6.4 Hz，-CH2OH)，1.53～1.60(4H，m，-CH2CH2CH2OH)，1.25(46H，s)，0.88(3H，t，J= 6.4 Hz，CH3);13C NMR(CDCl3，100 MHz)δ:63.1 (C-1)，32.8(C-2)，31.9(C-25)，29.7～29.4(C-4～24)，26.4(C-3)，22.6(C-26)，14.1(C-27)。以上数据与文献［15］报道基本一致，故鉴定其为二十七烷醇。

化合物12 白色蜡状物，mp.50～52℃，分子式C16H32O2，IR(KBr)cm-1:3424(OH)，2917，2849，1707，1463，1295，936，723;EI-MS m/z:256［M］+，227，213，199，185，171，157，143，129，115，97，85，73，为典型的连续失去 CH2的特征;1H NMR (CDCl3，400 MHz)δ:0.88(3H，t，J=6.8 Hz，CH3)，1.25(brs，CH2×12)，1.63(2H，m，-CH2CH2COOH)，2.34 (2H，t，J=7.6 Hz，-CH2COOH);13C NMR(CDCl3，100 MHz)δ:180.5(COOH)，34.1，31.9，29.7，29.7，29.6，29.5，29.4，29.1，24.7，22.7(多个亚甲基碳信号)，14.1(CH3)。以上数据与文献［16］报道基本一致，故鉴定其为十六烷酸(棕榈酸)。

化合物13 白色固体，mp.85～86℃，分子式C24H48O2，IR(KBr)cm-1:3430(OH)，2918，2848，1707，1463，1296，937;EI-MS m/z:368［M］+，340，312，284，256，241，213，199，185，171，157，143，129，115，97，85，73，43，为典型的连续失去 CH2的特征;1H NMR(CDCl3，400 MHz)δ:0.87(3H，t，J=6.8 Hz，CH3)，1.25(brs，CH2×20)，1.63(2H，m，-CH2CH2COOH)，2.34(2H，t，J=7.6 Hz，-CH2COOH)。以上数据与文献［17］报道基本一致，故鉴定其为二十四烷酸。

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