快速生物监测缺陷原因分析

陈 献 广西桂林市中西医结合医院 541004

生物监测是衡量灭菌质量的可靠指标，是检测灭菌质量的金标准。快速生物监测在3～4h显示结果，改变了过去需2～7d才出结果的历史，改善了灭菌物品先使用灭菌质量监测滞后的状况。随着现代医学的发展，植入型手术普遍推广，快速生物监测更突显其优越性。2009年我院购置了3M快速生物阅读器，主要用于骨科植入型手术植入物灭菌质量监测。自2009年10月－2011年12月，我科共进行脉动真空压力蒸汽灭菌快速生物监测186次，其中184次合格，2次发生缺陷。针对快速生物监测缺陷原因，探讨分析如下。

1 材料与方法

材料：3MAttest 290快速生物阅读器、3MAttest 1292生物指示剂、2009年购进的江汉MZQ－1.2型压力蒸汽灭菌器、按卫生部2002年版《消毒技术规范》自制型生物监测标准试验包。我科使用的快速生物阅读器及压力蒸汽灭菌器性能稳定，运行正常，压力蒸汽灭菌器每天B－D试验、物理监测、化学监测合格。方法：将生物指示剂及化学指示卡放入标准试验包中心部位，生物指示剂与化学指示卡隔一手术巾，标准试验包放置于脉动真空压力蒸汽灭菌器排气口上方，经1个灭菌周期后取出生物指示剂冷却至室温，进行快速生物监测。3h生物监测显示结果，红灯亮表示阳性，绿灯亮表示阴性，黄灯亮表示正在检测。快速生物监测结果，由2人同时判读，只有检测管显示阴性、对照管显示阳性，表示结果合格，灭菌质量合格。

2 结果

2009年10月－2011年12月，我科共进行压力蒸汽灭菌快速生物监测186次，其中184次合格，2次发生缺陷。回顾发生缺陷原因，2010年3月3日所做生物监测，对照管安瓿未压碎，菌片未能湿润，检测3h对照管一直显示处于检测状态，未显示结果。取该检测管与对照管重做生物监测，结果合格。2011年9月6日所做生物监测，检测管未放至阅读孔底部，未能与荧光探测器充分接触，检测3h检测管一直显示处于检测状态，未显示结果，取该检测管与对照管重做生物监测，结果合格。

3 生物监测缺陷原因分析

3.1 生物指示剂质量 生物指示剂在有效期内使用，存放于室温下干燥避光处，避免环氧乙烷及甲醛气体影响，防止生物指示剂失效。

3.2 压力蒸汽灭菌操作环节 生物指示剂外不粘贴化学指示胶带及另加贴标签，生物监测标准试验包内生物指示剂与化学指示卡隔一手术巾放置，避免重叠紧贴，防止化学指示卡热敏物质干扰［1］造成假象。标准试验包放于灭菌柜排气口上方，此为灭菌柜内最难灭菌位置，以确保灭菌取样准确。确认压力蒸汽灭菌器每天进行B－D试验、物理监测、化学监测、每周常规生物监测合格，运行正常。

3.3 快速生物监测操作环节 使用与生物阅读器相匹配的稳定电源，定期进行生物阅读器的维护保养［2］，注意防尘，确保阅读器运行正常，并取用同一批次的生物指示剂作阳性对照［3］。经一灭菌周期后取出生物指示剂冷却至室温，同时取对照管1支，检测管与对照管分别先关闭试剂帽、在挤碎孔压碎安瓿、轻敲试管以使菌片湿润，分别放入对照及检测阅读孔。生物试管放置至阅读孔底部，使荧光探测器与生物试管底部充分接触，并关闭阅读孔盖。检测过程中禁止打开孔盖及移动或触摸生物指示剂，如必须此项操作，时间不得超过10s，防止数据丢失而影响结果判断。压力蒸汽灭菌快速生物监测3h判读结果，只有检测管阴性，对照管阳性，表示结果合格。建议2人同时判读结果，以保证判读的准确性。回顾缺陷2次原因，其中一次对照管安瓿未压碎，菌片未能湿润，故3h对照管一直显示处于检测状态，未显示结果；另一次检测管未放置至阅读孔底部，检测管未能与荧光探测器充分接触，故3h检测管一直显示处于检测状态，未显示结果。2次重做生物监测，结果合格。快速生物监测规范化技术操作尤为重要，严格遵守操作规程，确保每一细节操作准确，避免造成快速生物监测缺陷。规范化技术操作是防止快速生物监测缺陷的核心。因此，规范化操作培训是确保操作正确的前提。

4 讨论

4.1 快速生物监测原理 目前用于压力蒸汽灭菌生物监测的生物指示剂有菌片条、自含式菌片及密封安瓿三种［4］。压力蒸汽灭菌生物监测所用的生物指示剂为嗜热脂肪杆菌芽孢，嗜热脂肪杆菌芽孢在复苏过程中产生α－D－葡萄糖苷酶，该酶的产生能够作为分子水平证明芽孢存活的证据［5］。芽孢酶的存在与细菌生长繁殖呈平行关系［2］，即如果发现芽孢酶的存在，表明细菌未被完全杀灭，从而证明灭菌过程失败。快速生物阅读器是通过专用自动荧光探测器，探测到未被灭活的细菌芽孢产生的α－D－葡萄糖苷酶与荧光底物发生反应时的荧光来判断灭菌效果成败。绿灯显示阴性，红灯显示阳性，只有检测管阴性、对照管阳性时，表示生物监测合格，灭菌质量合格；如检测管及对照管均为阳性，表示生物监测不合格，灭菌失败。

4.2 快速生物监测应用价值 快速生物监测能快速、敏感、准确判读结果，可操作性强，效果理想，极大地缩短了检出结果时间。能及时发现灭菌器工作异常，及时召回灭菌不合格物品，降低医院感染风险及医院感染引起的成本。避免植入型手术植入物使用与灭菌质量监测脱节，为植入型手术提供灭菌质量保障，并为医疗纠纷提供法律依据。3MAttest 1292生物指示剂属自含式菌片，避免人工接种及制作培养基污染导致的结果误差。紧急情况灭菌植入型器械时，可在生物PCD中加用5类化学指示物。5类化学指示物合格可作为提前放行的标志，生物监测结果及时通报使用部门。

4.3 快速生物监测缺陷防范 快速生物监测各环节干扰因素很多，有报道因生物指示剂质量问题造成生物监测不合格［6］，也有记载因快速生物阅读器故障导致生物监测缺陷，还有因压力蒸汽灭菌器性能不稳定造成生物监测结果阳性。有资料建议设立专人进行生物监测，以减少操作失误所造成的缺陷。除注意确保生物指示剂质量、压力蒸汽灭菌器及快速生物阅读器性能稳定、压力蒸汽灭菌操作环节正确合格外，快速生物监测规范化技术操作是至关重要的核心。加强生物监测各环节质量监控，避免发生缺陷影响结果判断。一旦出现生物监测结果阳性，表示灭菌失败，应立即启动压力蒸汽灭菌失败应急预案，及时做好相应处理。当次灭菌物品不能发放，并应及时召回此灭菌器上次生物监测合格以来尚未使用的所有灭菌物品，全部重新处理，灭菌合格后方可发放。同时书面报告相关管理部门，并通知使用部门对已使用该期间无菌物品的病人进行密切观察。及时查找原因，采取改进措施，直至连续3次生物监测合格后，该灭菌器方可正常使用，并对该事件处理情况进行总结汇报。

［1］盛翠宝，袁琼.快速生物监测假性结果原因分析〔J〕.中华医院感染学杂志，2003，13（2）：170.

［2］何小燕，黄浩，江东.1例快速生物监测阅读器未显示结果的报告〔J〕.中国消毒学杂志，2011，28（6）：765.

［3］褚金萍.快速生物监测阅读器在压力蒸汽灭菌效果监测中的应用〔J〕.天津护理，2010，18（3）：150.

［4］钟秀玲，郭燕红.医院供应室的管理与技术〔M〕.第2版.北京：中国协和医科大学出版社，2006：82.

［5］徐遂转，杨晓琴.植入物与植入性器械快速生物监测结果分析〔J〕.中华医院感染学杂志，2011，21（10）：2060.

［6］王学凤.低温等离子体灭菌器生物监测不合格1例分析〔J〕.中外医疗，2011，17：113－114.