硒代蛋氨酸对大鼠的两代繁殖毒性试验

丁丽军，胡成云，刘 学，崔卫波，张雨梅

（1.江苏畜牧兽医职业技术学院，江苏 泰州 225300；2.扬州大学兽医学院，江苏 扬州 225009）

硒代蛋氨酸（硒代甲硫氨酸）是硒与氨基酸结合的一种有机硒化合物，可用于人和动物硒元素营养补充剂。目前，畜禽饲料中基本以无机硒（亚硒酸钠）作为硒源补充剂，无机硒含量高成本低，但需要量和中毒量相差很小，极易中毒，而有机硒具有更高的吸收率与生物安全性［1-2］。饲粮中无机硒与有机硒（酵母硒）水平大于5mg／kg时，均具有毒性，但亚硒酸钠致硒中毒更迅速、更严重［3］。目前在动物饲料中有机硒的补饲量尚无参考标准，剂量过大或长时间补充有可能产生毒性。本文通过硒代蛋氨酸较大剂量、较长时间添加对大鼠的繁殖毒性的试验，以期了解对大鼠的繁殖性能、对子代鼠生长发育的影响。

1 材料与方法

1.1 材料 Wistar大鼠（清洁级），4周龄，180只，公母各半。购自扬州大学比较医学中心。大鼠饲喂经60Co照射饲料，自由采食和饮水，饮水为符合城市饮用水标准的自来水。试验前在实验动物房环境中适应3d。

DL-硒代蛋氨酸，纯度99.5%。硒代蛋氨酸由江苏龙泉饲料公司制成药料，经饲料中添加。

1.2 方法

1.2.1 饲喂剂量 硒代蛋氨酸在饲料中的添加剂量分高、中、低3个剂量组，分别为7.5mg／kg、3 mg／kg体重和0.6mg／kg体重（相当于1／40LD50、1／100LD50和1／500LD50）。正常对照组给以常规大鼠饲料。每组公鼠各20只，母鼠20～25只。

1.2.2 大鼠合笼 在给予受试物2月后，每组随机选择雌鼠和雄鼠，按雌雄1∶1的比例同笼交配，次日晨检查阴道栓，见栓后即为受孕第1日，受孕鼠分笼饲养，继续饲喂各试验剂量的饲料。每组怀孕鼠须20只以上。动物的体重如持续增长，则表示妊娠过程及胚胎发育正常，考察交配率、妊娠率。

交配率（%）=一周内见阴道栓母鼠数／交配母鼠数×100%

妊娠率（%）=分娩幼仔的孕鼠数／见阴道栓母鼠数×100%

1.2.3 F1代生长及繁殖 在受孕第20天时，每组处死10只孕鼠用于畸形检查。每组余下的10只孕鼠待自然分娩后，记录每窝的产仔数、活仔数、死仔数、性别，测量每仔的体长、体重和尾长。分别计算出生存活率和离乳存活率。断奶后，新生鼠分为两部分。第一部分从每窝仔鼠中随机拿出公母鼠各1只，公母分笼饲养，每组共20只用于F1代交配。每组余下的F1代鼠公母分开，且调整至相同的数量，每组公母各10只，每周称量体重和饲料消耗1次，用于生长情况的观察。所有F1代鼠自断奶后，均饲喂各试验组的饲料。

第一部分用于交配的F1代鼠在9周龄时，以雌雄1∶1的比例同笼交配，次日晨检查阴道栓，见栓后即为受孕第1日，受孕鼠分笼饲养，继续饲喂各组的含药饲料，计算交配率和妊娠率。于受孕第20天时，处死F1孕鼠，称取窝重、胎盘重，计数活产幼仔数、死胎以及吸收胎数。活产胎仔取出后，检查性别，逐只称重，并按窝计算平均体重。

1.2.4 数据分析 试验数据采用SPSS 12.0软件处理，统计学分析采用χ2检验或方差分析。

2 结果与讨论

2.1 对F0代繁殖性能的影响 各试验组孕鼠剖检后，窝仔数、胎盘重、活仔体重、体长、尾长等指标见表1，各组均无死胎。统计数据显示硒代蛋氨酸中、低剂量组窝仔数、胎仔平均体重、体长、尾长、胎盘重、性别比及吸收胎率与正常对照组无统计学差异（P＞0.05）。高剂量组平均胎仔体重、体长、尾长均大于正常对照组（P＜0.05）。高剂量组胎仔发育较好除了高剂量有机硒的作用外，可能与其每窝仔数相对少，胎仔个体发育营养充足也有关系。

母鼠的交配率、妊娠率、产仔总数及新生鼠存活率与正常对照组相比无显著性差异（P＞0.05），见表2。

表1 F0孕鼠剖检情况 （n=10／组）

表2 F0鼠繁殖性能

2.2 对F1代生长发育影响 F1代新生鼠离乳后，给予各组相应的试验饲料，其体重及饲料消耗分别见图1和图2。硒代蛋氨酸各试验组的F1代鼠体重在第6周后明显小于正常对照组；但随着周龄的加大（9周后），低剂量组与正常对照组的体重差距逐渐缩小，且低剂量＞中剂量＞高剂量。饲料消耗情况是：9周前各试验组饲料消耗明显低于正常组，但9周后与正常组的差距变小，低剂量组在10周后与正常组无明显差异（P＞0.05）。

各试验组在给予硒代蛋氨酸最初的4～5周内，体重与饲料消耗明显减少，经过一定时间的适应后，饲料摄入和体重也相应增加，与正常对照组的差距逐渐缩小，剂量越小与正常组的差距越小。

2.3 对F1代繁殖性能的影响 F1代孕鼠剖检情况见表3。高剂量组胎仔体重、体长、窝重及胎盘重均小于对照组，体长及胎盘重显著小于对照组（P＜0.05）；中剂量组胎仔重、体长、尾长及窝重明显大于正常组（P＜0.05）；低剂量组除体重外，其他指标与正常对照组无显著差异（P＞0.05）。

表3 F1孕鼠部检情况（n=6／组）

F1代鼠繁殖性能参数见表4。各试验组和正常组胎仔数相当，均未见有死胎。高剂量组的交配率及妊娠率均低于其他组，中、低剂量组与正常组无明显差异。高剂量组母鼠的交配率及妊娠率较低的原因可能与该组的公母鼠体重相对较小有关系。

表4 F1鼠繁殖性能

3 结语

DL-硒代蛋氨酸对亲代Wistar大鼠的繁殖性能无明显影响。高剂量（7.5mg／kg体重添加）对F1代鼠的生长及繁殖性能有所影响；而中、低剂量（3mg／kg，0.6mg／kg体重添加）与正常对照组没有明显差异。

［1］Rayman M P.The use of high-selenium yeast to raise seleniumstatus：how does it measure up［J］.British Journal of Nutrition，2004，92：557-573.

［2］Kim Y Y，MahanD C.Effects of dietary selenium source and level on pig hair color and various selenium indices［J］.J Anim Sci，2001，79：949-955.

［3］Kim Y Y，Mahan D C.Comparative effects of high dietary levels of organic and inorganic selenium on selenium toxicity of growing-finishing pigs［J］.J Anim Sci，2001，79：942-948.