高效液相色谱法测定复方景天胶囊中红景天苷含量

闫雪生，李 岩

(山东省中医药研究院，山东 济南 250014)

复方景天胶囊是我院研制的非标制剂，主要由红景天、人参、菊花、五味子组方，具有滋补强壮、扶正固本功能。为控制胶囊质量，笔者以方中主药红景天的主要成分红景天苷为指标，参考有关文献[1－2]，用高效液相色谱(HPLC)法测定复方景天胶囊中红景天苷含量，现报道如下。

1 仪器与试药

高效液相色谱仪(美国Waters公司)，包括Waters 600 Controller，WatersTM600 Pump，Waters996 PhotodiodeArrayDetector;超纯水(Millipore公司纯水器);所用甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯;红景天苷对照品(中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号为110818－200404);复方景天胶囊(自制)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:lichrospher C18柱江苏汉邦科技有限公司(250 mm×4.6 mm，5 μm);用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;流动相:甲醇－水(12∶88);检测波长:275 nm。理论板数按红景天苷峰计算应不低于2 000。

2.2 溶液制备

取本品内容物0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，准确加入甲醇10 mL，称定质量，超声提取30 min，称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液用微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。精密称取红景天苷对照品4.60 mg，置10 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，取5 mL稀释至10 mL，配制成每1 mL含红景天苷0.23 mg的溶液，作为对照品溶液。取缺红景天的阴性样品，参照供试品溶液的制备方法，制得缺红景天的阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

阴性干扰试验:分别精密吸取2.2项下3种溶液各10 μL，注入液相色谱仪。结果供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应位置上有色谱峰，阴性对照品溶液色谱中则无此峰，表明在该测定条件下，阴性样品不干扰红景天苷的测定，见图1。

图1 高效液相色谱图

线性关系考察:精密吸取对照品溶液(0.46 g/L)，分别稀释成含红景天苷 0.092，0.184，0.276，0.368，0.460 g/L 的溶液，各吸取10 μL，注入高效液相色谱仪，测定峰面积积分值。以峰面积积分值为纵坐标、进样量(μg)为横坐标绘制标准曲线，得回归方程 Y=260 488 X+14 428，r=0.999 9(n=5)。结果表明，红景天苷进样量在0.92～4.6μg范围内与峰面积积分值线性关系良好。

精密度试验:精密吸取同一对照品溶液10 μL，连续进样5次，测定峰面积积分值。结果的 RSD为0.89%(n=5)，表明仪器精密度良好。

稳定性试验:精密吸取同一供试品溶液，于 0，2，4，8，24 h时进样，记录每次进样的峰面积。结果的 RSD为0.99%(n=5)，表明供试品溶液在24 h内稳定性良好。

重现性试验:取同一批样品5份，按拟订的方法测定。结果每粒胶囊平均含红景天苷 4.214 mg，RSD 为 0.99%(n=5)，表明方法重现性良好。

加样回收试验:取已知含量的同批样品6份，每份约0.1g，精密称定，分别加入红景天苷对照品，按供试品溶液制备方法制备溶液并测定含量，计算回收率。结果见表1。

表1 红景天苷加样回收试验结果(n=6)

2.4 样品含量测定

分别精密吸取3批供试品溶液，各10 μL，注入液相色谱仪，测定各批样品中红景天苷的含量，结果见表2。根据所用红景天原料中红景天苷平均含量为0.953%，结合药典规定红景天苷含量应不低于0.50%计算，暂订本品每粒含红景天以红景天苷(C14H20O7)计，不得少于 3.0 mg。

表2 样品含量测定结果

3 讨论

复方景天胶囊为中药复方制剂，成分复杂，本试验以红景天苷作为含量测定指标。红景天苷的光谱扫描显示在223 nm波长处有最大吸收峰，在275 nm波长处有弱吸收峰，文献[1－4]中这2个波长均作为红景天苷的测定波长。本次试验中发现，红景天苷在223 nm波长处测定易受其他成分干扰;在275 nm波长处测定，红景天苷色谱峰分离好，无干扰。试验中还比较了多种比例的流动相，结果以甲醇－水(12∶88)为优，峰的分离效果好，基线平稳。采用高效液相色谱法测定复方景天胶囊中红景天苷含量，简便易行，结果重现性好，可用于复方景天胶囊的质量控制。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:化学工业出版社，2005:附录33.

[2]宋兴发，尚 强，高 山.红景天养生片中红景天苷的含量测定[J].医药导报，2009，28(12):1 629－1 630.

[3]WS－10926(ZD－0926)－2002，国家中成药标准汇编·中成药地方标准上升为国家标准部分(内科气血津液分册)[S].

[4]WS3－000(Z－080)－2002(Z)，国家药品标准·新药转正标准(第36册)[S].