壮医药线点灸疗法对痛经大鼠脑垂体β－内啡肽的影响※

汤红丽 马钰婷 王建慧 班素梅(.广西南宁市第四人民医院，53003 .山西省人口计生委科学研究)

痛经是指行经前后或月经期出现下腹疼痛、坠胀，伴腰酸或其他不适，程度严重影响生活和工作质量，是妇科常见疾病，临床将其分为原发性和继发性两类[1]。壮医药线点灸疗法治疗原发性痛经具有良好效果[2～4]。本研究通过动物实验，观察经壮医药线点灸疗法治疗后痛经大鼠的扭体反应及脑垂体β－内啡肽(β－endorphin，β－EP)含量，探讨壮医药线点灸疗法治疗痛经的效果及其作用机理，报道如下。

实验材料

1.实验动物：选择健康、清洁级、雌性、未孕SD大鼠50只，鼠龄3个月，体重180～220g，由广西医科大学实验动物中心提供，合格证号为SCXK桂2003－0003。饲料由广西中医学院实验动物中心提供，适应性饲养1周。

按体质量随机分为四组：正常对照组(正常组)，痛经模型组(模型组)、痛经模型＋壮医药线点灸组(药线组)、痛经模型＋空线点灸组(空线组)。每组10只，剩余10只大鼠用于补充意外死亡的缺失，均给普通全价固体饲料、饮用自来水饲养。

2.主要实验试剂和仪器：壮医药线由广西中医学院壮医研究所门诊部提供；己烯雌酚注射液由上海通用药业有限公司生产，批号20071020；催产素注射液由上海禾丰制药有限公司生产，批号20071015；2%戊巴比妥钠由上海卓康生物技术有限公司生产，批号20071130；2%冰醋酸由重庆川江化学试剂厂出产，批号20060221；神经肽盒放射免疫试剂盒由上海朗顿生物技术有限公司提供。主要仪器：秒表，JJ300型精密电子天平(常熟双杰测试仪器厂生产)，冷冻离心机(上海手术器械厂生产)。

造模

参照文献[5]进行，除正常组外，其余组大鼠经股部皮下注射己烯雌酚注射液(人工造成动物处于相同的动情期，以便提高子宫平滑肌对催产素的敏感性)，连续10天给药：第1天、第10天给药0.8mg／只，第2～9天给药0.4mg／只；于末次给药24h、末次点灸0.5h后，经腹腔注射催产素注射液2U／只，观察30min内大鼠扭体反应情况，出现扭体反应则提示原发性痛经大鼠造模成功。扭体反应标准：大鼠腹部收缩内凹，躯干与后肢伸展，臀部与一侧肢体内旋。

方法

药线组：施予壮医药线点灸疗法。选用标准Ⅱ号药线(直径0.7cm，经多种药材精制液浸泡而成的苎麻线)，实验人员用左手抓取大鼠，使其保持仰卧位，用右手拇指、食指持药线一端，露出线头1～2cm，在备好的蜡烛上点燃，保留圆珠炭火，如有明火须熄灭，将线端炭火对准所选穴位，顺应手腕和拇指屈曲动作，拇指指腹稳健而敏捷地将有炭火的线头直接点按于选定的穴位上，一按火灭即起为一壮，一穴灸一壮，穴位无须常规消毒。于药线组造模的第5天开始，施灸穴位：中极、关元、地机、太冲、后三里(足三里)、三阴交，施灸第一天先在所选穴位处备皮，充分暴露以上穴位，每天点灸1次，连续7天。

其余组：空线组选用直径为0.7mm的麻线，其余选穴、疗程、操作步骤等均同药线组。正常组、模型组不予任何处理。

观察指标及检测方法

1.扭体反应：大鼠腹腔注射催产素后，观察30min内各组大鼠的扭体次数，按以下公式统计扭体抑制率。扭体抑制率(%)＝(模型组平均扭体次数－治疗组平均扭体次数)÷模型组平均扭体次数×100%。

2.脑垂体β－EP测定：腹腔注射催产素1h后，采取颈椎脱臼处死法将其处死，迅速剥离脑垂体，将其称重记录后，加到1ml 100℃生理盐水中，煮沸5min后，迅速冷却，用2%冰醋酸制成匀浆，置4℃环境中1～2h后，离心 2400r／min，15min 后取出上清液，置 于－20℃冰箱保存备用。采用神经肽放射免疫试剂盒检测脑垂体β－EP含量。

结果

各组大鼠扭体反应情况见表1。

表1 四组大鼠扭体次数及扭体抑制率比较(±s)

表1 四组大鼠扭体次数及扭体抑制率比较(±s)

注：与模型组比较＊P＜0.05，与空线组比较△P＜0.01

组 别 扭体次数 扭体抑制率(%)正常组 0.0 0＋0.0 0△3 6.2 4%1 0 0%模型组 2 9.8 0＋3.0 1 0空线组 2 7.4 0＋2.0 1＊ 8.0 5%药线组 1 9.0 0＋3.5 9＊△

实验结果显示：与模型组、空线组比较，药线组扭体次数均明显减少(P＜0.01)。

各组大鼠脑垂体β－EP含量测定结果见表2。

表2 四组大鼠脑垂体β－EP含量比较(±s，ng／ml)

表2 四组大鼠脑垂体β－EP含量比较(±s，ng／ml)

注：与模型组比较＊P＜0.01，与空线组比较☆P＜0.01

组 别 只数 脑垂体β－E P 含量正常组 1 0 3 7 9 8.1 0＋5 1 0.6 1＊模型组 1 0 2 2 6 8.5 0＋3 0 0.2 2空线组 1 0 3 7 0 9.3 0＋6 0 2.3 3＊药线组 1 0 7 3 6 1.7 0＋1 2 0 6.9 5＊☆

实验结果显示：正常组、空线组、药线组大鼠脑垂体β－EP含量均显著高于模型组(P＜0.01)；且药线组大鼠脑β－EP含量高于空线组(P＜0.01)。

讨论

壮医药线点灸疗法是壮医独具特色的医疗技法之一，点灸所用的药线是由苎麻搓成线，经特制壮医药水浸泡加工而成，其气味芳香、辛散，具有止痛、活血化瘀的作用。本实验采用催产素致痛制作原发性痛经大鼠模型，根据中医经络选穴原则，选取中极、关元、地机、太冲、后三里、三阴交等调经、理气、活血之穴，用壮医药线灼灸刺激穴位，靠其火粹迅速地发挥药效，疏调机体两路(龙路、火路)气机，刺激机体经络腧穴系统，调理“嘘勒”(气血)。实验结果表明：与对照组比较，壮医药线点灸疗法能对抗催产素所致的大鼠扭体反应(P＜0.01)，提示壮医药线点灸疗法对痛经具有较好的止痛效果。

β－EP是一种神经内分泌激素，属于一类具有吗啡样活性的神经多肽，具有内源性镇痛作用[6]。李继俊[7]认为子宫是β－EP的靶器官，参与子宫功能活动的调节，黄体期β－EP水平降低，以致子宫功能活动失常，成为疼痛的原因之一。本实验运用壮医药线点灸治疗后，痛经大鼠β－EP含量明显升高，与模型组、空线组比较，差别有显著意义，提示壮医药线点灸疗法有效治疗原发性痛经的机理可能与升高脑垂体β－EP含量有关。

[1]乐杰.妇产科学.第6版.北京：人民卫生出版社，2005：347－348.

[2]梁翀华.药线点灸治疗痛经50例小结.甘肃中医，2002，15(1)：11.

[3]刘芳.壮医药线点灸治疗痛经.中国临床医生，2003，31(7)：46－47.

[4]卢英翔.壮医药线点灸合中药外敷治疗原发性痛经37例.广西中医学院学报，2004，7(4)：23－24.

[5]杨美春，汤红丽，方刚.壮医药线点灸疗法对催产素致痛大鼠血液流变学的影响.中国民间疗法，2009，6(17)：40－41.

[6]徐晓娟，金沈锐.芍药甘草汤不同配伍比例对痛经大鼠β－内啡肽的影响研究.中国中医基础医学杂志，2004，10(6)：40－41.

[7]李继俊.妇产科领域中的β－内啡肽.实用妇科与产科杂志，1990，6(3)：155－156.