甲状腺素对梗阻性黄疸大鼠肝脏保护作用的研究

周志伟 莫海山 黎民宇 董启超 范津瑞 高 原

广东省珠海市人民医院普外科，广东 珠海 519040

梗阻性黄疸是肝胆外科常见疾病，梗阻性黄疸不仅能够引起肝脏的直接损伤，对内分泌系统的功能也具有明显的影响，如胰岛素分泌及利用异常、甲状腺激素代谢异常等。已经有研究表明在肝炎、肝硬化等急慢性肝脏损伤时，常伴随体内甲状腺激素及其转化物水平异常[1]，并且同预后密切相关，能够反映肝脏的损伤程度及预后，为明确梗阻性黄疸时体内甲状腺素的代谢异常情况及给予相应的干预治疗，减轻肝脏损伤，增强胆道肿瘤、胰头肿瘤等重大疾病围术期安全，本文就梗阻性黄疸大鼠甲状腺激素代谢异常以及外源性甲状腺素对肝脏的保护作用进行研究。

1 材料与方法

1.1 试剂与仪器

促甲状腺激素（TSH）、游离甲状腺素 FT3、FT4、TRab 放免试剂盒（天津原子能公司）、血清白蛋白（ALB）、谷丙转氨酶（ALT）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、谷草转氨酶（AST）、凝血酶原活度（PA）检测试剂盒（南京建成生物工程研究所）、大鼠甲状腺素（南京建成生物工程研究所）。

放免计数仪（天津原子能公司），生化分析仪（日本奥林巴斯株式会社），分光光度计（常州医用仪器厂）。

1.2 实验动物及分组

24只清洁级 SD 雄性大鼠，体重（200±20）g，由中山医科大学实验动物中心提供，随机分成三组：对照组、模型组和干预组，每组各8只。所有大鼠均给予标准饮食，自由饮水，分笼饲养，保持饲养室22℃，适当光照，大鼠适应环境后造模，手术前12 h禁食，自由饮水，腹腔内注射1%氯胺酮（80 mg/kg）麻醉，麻醉生效后，取剑突下3 cm无菌正中切口进入腹腔，沿十二指肠上缘找到胆总管，游离之，5-0丝线双重结扎，两线之间离断，3-0丝线逐层关腹。对照组仅游离胆总管，模型组和对照组给予腹腔注射生理盐水1 mL/（kg·d），干预组给予腹腔注射甲状腺素溶液（20 μg/mL）1 mL/（kg·d），连续 14 d，后活体开胸、剪开心脏，取血6 mL，分离血清后深低温保存，分批检测。

1.3 检测方法

TSH、FT3、FT4检测采用放射免疫法 ，ALB、ALT、TBIL、DBIL、AST采用生化分析仪自动检测，PA采用比色法。

1.4 统计学方法

数据处理采用SPSS 11.5统计学软件，计量资料数据以均数±标准差（）表示，采用方差分析，两两比较采用LSD-t检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组大鼠血清甲状腺激素水平

干预组及模型组TSH水平低于对照组（P<0.05），对照组及干预组FT3、FT4水平高于模型组（P<0.05），对照组同干预组FT3、FT4水平比较差异无统计学意义（P>0.05）。组间比较，TSH、FT3、FT4差异均有统计学意义（均 P<0.05）。见表1。

表1 三组大鼠甲状腺激素水平比较（）

表1 三组大鼠甲状腺激素水平比较（）

注：与对照组比较，＊P<0.05；与模型组比较，△P<0.05

组别 只数 TSH（IU/mL） FT3（ng/dL） FT4（ng/dL）对照组模型组干预组F值P值888 0.142±0.010 0.104±0.050 0.106±0.020 12.94<0.05 0.60±0.04 0.34±0.06＊0.57±0.07△27.96<0.05 38.16±6.15 25.97±9.20＊40.20±5.74△33.18<0.05

2.2 三组大鼠肝功能情况

干预组及对照组血清ALT、AST、TBIL、DBIL水平低于模型组（P<0.05），干预组及对照组ALB及PA水平高于模型组（P<0.05），干预组血清 ALT、AST、TBIL、DBIL 水平高于对照组（P<0.05），干预组ALB及PA水平低于对照组（P<0.05）。见表2。

3 讨论

梗阻性黄疸是临床常见疾病，梗阻性黄疸多由于胆道机械性阻塞所致，胆道内压力增高，引起胆汁分泌障碍，胆色素逆向反流进入血液，导致梗阻性黄疸的发生，梗阻性黄疸多引起明显的肝脏损害，除急性肝脏损伤外，甚至能够引起肝脏的纤维化及胆汁性肝硬化，引起肝脏功能严重的损害。肝脏是体内最大的内分泌器官，肝脏能够合成多种激素、酶类及相关的转运蛋白，也是体内激素代谢、灭活的场所，因此肝脏功能损害时多伴有内分泌系统功能异常及激素代谢障碍，如胰岛素代谢异常引起的血糖水平紊乱。近年来的研究发现[2]，在严重肝功能损害患者，多半有体内甲状腺激素的代谢障碍，表现为TSH与T3、T4同向变化，甲状腺激素的内在反馈调节机制异常，有研究认为，在发生肝脏功能损害时，肝脏甲状腺原氨酸 5-脱碘酶（5-deiodinase，5-MDI）合成 5-MDI减少，导致T3生成减少[3]。此外，外周组织对T4摄取减少，可导致T4浓度下降。但是，T4的外环氧酶活性和含量增加，导致T4向rT3转化增多，引起体内甲状腺的激素水平的降低。此外，有研究认为[4]，在肝脏功能损害时，肝脏合成甲状腺素受体蛋白及下丘脑-垂体-甲状腺轴功能抑制也是引起体内甲状腺激素水平异常的主要机制。甲状腺激素能够促进机体的能量代谢，在胆汁分泌过程中，甲状腺激素能够促进胆汁的分泌[5]，但是具体机制目前尚未明确。

表2 三组大鼠肝功能变化比较（）

表2 三组大鼠肝功能变化比较（）

注：与对照组比较，＊P<0.05；与模型组比较，△P<0.05

组别 只数 ALT（U/L） AST（U/L） TBIL（μmol/L） DBIL（μmol/L） ALB（g/L） PA（g/L）对照组模型组干预组F值P值888 41.20±1.83 340.4±21.47＊202.83±19.65＊△89.67<0.05 41.20±1.83 340.4±21.47＊202.83±19.65＊△89.67<0.05 7.32±1.15 137.66±17.15＊105.40±9.45＊△126.42<0.05 5.57±0.55 119.94±11.89＊87.37±8.41＊△227.64<0.05 5.57±0.55 119.94±11.89＊87.37±8.41＊△227.64<0.05 164.29±17.58 129.46±13.26＊142.65±22.40＊△17.2<0.05

本研究发现，在梗阻性黄疸大鼠，体内存在甲状腺激素代谢异常情况，FT3及FT4水平下降，而TSH水平并未出现升高，而是同步下降，提示在梗阻性黄疸时，大鼠体内甲状腺激素分泌的反馈机制失衡，其可能是甲状腺激素水平异常的主要原因，而在给予外源性甲状腺激素后，干预组大鼠体内甲状腺激素水平上升，但是TSH水平未发生明显的变化，说明采用外源性甲状腺激素能够改善梗阻性黄疸大鼠体内的甲状腺激素水平异常，但是并不能纠正甲状腺轴反馈机制的异常。在进一步的研究中发现，给予外源性甲状腺素后，干预组大鼠的肝功能明显改善，肝脏损伤减轻，值得注意的是，干预组大鼠的TBIL及DBIT水平低于模型组，说明外源性甲状腺素能够调节梗阻性黄疸大鼠胆色素的代谢，由于胆道梗阻并未解除，提示其可能在胆色素合成、转运或分泌的水平发生了调节作用，甲状腺素能够调节能量代谢，能够调节三羧酸循环和Na+-K+-ATP酶的活性，在病理条件下，能够促进肝脏细胞的增殖[6-7]，促进损伤干细胞的修复，也是肝功能改善的原因之一，此外对于ALB及PA的检测证实，外源性甲状腺素在减轻肝脏功能损伤的同时能够改善肝脏的合成功能，发挥对肝脏的保护作用。

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