高效液相色谱法测定苯佐卡因软膏中苯佐卡因含量

杨丽杰，牟 阳，王金华，胡宝荣，张 婧

(哈尔滨医科大学附属第一医院药学部，黑龙江 哈尔滨 150001)

苯佐卡因软膏为医院制剂，是苯佐卡因单方制剂，具有局部麻醉作用，临床用于皮肤瘙痒与黏膜和创面、溃疡面及痔疮的镇痛等。目前医院制剂质量规范的含量测定方法为永停滴定法，而永停滴定仪的适用范围较窄。本试验的目的是通过高效液相色谱法检测苯佐卡因软膏的含量，建立一个准确、可靠的检测方法。

1 仪器与试药

Waters 600高效液相色谱系统(2996检测器、717自动进样器、Empower数据系统);BP211D 10万分之一天平(德国Sartorius公司)。苯佐卡因对照品(药用原料，永停滴定法测得含量为99.2%);苯佐卡因软膏(哈尔滨医科大学附属一院制剂室);甲醇为色谱纯，水为超纯水(自剂)，其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

分析柱:SinoChrom ODS－BP 柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);流动相:甲醇－水－冰醋酸(80∶20∶0.5);柱温:25℃;流速:1.0 mL/min;检测波长:291 nm。

2.2 溶液配制

取105℃干燥至恒重的苯佐卡因对照品100 mg，精密称定，置100 mL量瓶中，加甲醇溶解，并稀释至刻度摇匀，得苯佐卡因对照品溶液(质量浓度为 100 μg/mL)。取苯佐卡因软膏0.10 g，置50 mL容量瓶中，加甲醇30 mL，置超声水浴中加热溶解(水浴温度40℃)，待溶液降至室温，加甲醇至刻度摇匀，得供试品溶液。另吸取空白基质(除苯佐卡因外的软膏基质)0.10 g，同法制备空白溶液。

2.3 波长选择及专属性试验

取对照品溶液10 μL进样，在200～400 nm波长范围内扫描，得最大吸收波长。空白溶液和供试品溶液分别进样10 μL。结果显示苯佐卡因在291 nm波长处有最大吸收，而其他成分在该波长处无吸收，故选择291 nm波长作为检测波长，取空白基质和苯佐卡因没有干扰。将空白基质和供试品按2.1项下操作所得溶液和对照品溶液，各取10 μL进样，得色谱图。由图1可见，方法专属性强，且杂质不影响主成分测定。

2.4 方法学考察

线性关系考察:分别进样苯佐卡因对照品溶液2.5，5.0，10.0，15.0，20.0，30.0 μL，以对照品质量浓度 C(μg/mL)为纵坐标、峰面积 A为横坐标进行线性回归，得回归方程 Y=1.19×106X －2.75 ×105，r=0.999886(n=6)。结果表明，苯佐卡因质量浓度在2.50～40.00 μg/mL范围内与峰面积线性关系良好。

图1 高效液相色谱图

加样回收试验:精密称取已知含量的样品适量，6份，置具塞锥形瓶中，分别加入苯佐卡因对照品6份，按2.1项下条件测定供试品的苯佐卡因量，计算回收率。结果见表1。

表1 苯佐卡因加样回收试验结果(n=6)

精密度试验:取同一批号样品5份，用甲醇将样品稀释成含苯佐卡因约100 μg/mL的待测溶液，连续进样6次，分别测定其峰面积。结果其 RSD小于0.14%，表明方法精密度良好。

2.5 样品含量测定

取3批样品，按照2.2项下供试品溶液的配制方法处理样品，进样10 μL，记录峰面积值，计算样品中药物的标示量百分含量。结果批号分别为20091013，20100104，20100305的样品标示百分含量分别为 100.08% ，101.30% ，99.96%。

3 讨论

苯佐卡因软膏为黑龙江省医院制剂品种，笔者医院制剂室生产该药，疗效得到了广大医疗工作者的认可，检测方法为永停滴定法，但该方法存在检测灵敏度不好、误差较大的不足。文献[3]报道了苯佐卡因脂质体凝胶的检测[3]。苯佐卡因软膏有采用紫外分光光度法检测的报道[1]，且有关苯佐卡因其他剂型的研究报道[2－3]，但未见苯佐卡因软膏高效液相色谱法测定的报道。本试验结果显示，在本试验条件下基质成分对苯佐卡因的检测没有影响，具有出峰时间适当，操作简便、快速、准确的特点。因此，该方法可用于该制剂的含量测定。

[1]王 瑞，张 淼.紫外分光光度法测定苯佐卡因软膏中苯佐卡因的含量[J].第一军医大学分校学报，2005，28(1):65－66.

[2]茅志安，姚健康，张 艳.高效液相色谱法测定炎痛净乳膏中双氯芬酸钠和苯佐卡因的含量[J].中国现代应用药学杂志，2002，19(2):149－150.

[3]单萍萍，郭 静，申国庆.高效液相色谱法同时测定抗敏止痒水中两组分含量[J].中国医院药学杂志，2007，27(9):1319－1320.