中药复方对2型糖尿病大鼠的治疗作用及其机制研究

赵美燕

糖尿病是一种慢性代谢性疾病，由胰岛功能减退、胰岛素抵抗等而引发的糖、蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱综合征，临床上以高血糖为主要特点，典型病例可出现“三多一少”的症状，严重影响着人类的健康。中药治疗糖尿病具有独特的效果，且毒副作用小，可长期应用。笔者通过中药复方对2型糖尿病大鼠治疗作用的研究，初步探讨了其治疗2型糖尿病的作用机制[1－3]，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 药物配制及试剂

中药复方汤剂，由大黄、黄连、黄芪、赤芍、白术、知母、山药、枸杞、人参、金银花等12味中药组成，每剂中药加10倍量水，浸泡30 min，常规煎煮30 min 2次，合并药液浓缩至100 mL;正糖胶囊(威海东宝制药有限公司，国药准字 B20020072，批号为110501)，临用前配制成 0.05 g/mL浓度。链脲佐菌素(STZ，sigma公司产品，由拜耳医药保健有限公司提供，批号S－0130)，－20℃保存，用时用0.1 mol/L的柠檬酸缓冲液在冰浴下配制成10 g/L的STZ溶液，调至pH 4.0，现配现用。

1.2 2型糖尿病动物模型的建立[4－7]

Wistar大鼠，体重180～200 g，雄性90只，由新疆医科大学实验动物中心提供，生产许可证号为SCXK(新)2003－0001。其中15只为正常组，喂以正常饲料(给予每100 g体重1.0 mL生理盐水)。将75只造模大鼠随机分为5组，分别为模型组(给予每100 g体重1.0 mL生理盐水)，阳性药物对照组(正糖胶囊0.75 g/kg)，中药复方低(每 100 g 体重 0.5 mL)、中(每 100 g 体重 1.0 mL)、高剂量组(每100 g体重2.0 mL)。5组均喂以高脂饲料(胆酸钠0.5%，胆固醇 1%，猪油 5%，蛋黄粉 10%，基础饲料 83.5%)。各组均自由进食和饮水，共计12周。于第4周后按腹腔注射链脲佐菌素50 mg/kg，正常组大鼠予以枸橼酸缓冲液腹腔注射进行试验，5 d后尾静脉取血，测定空腹血糖、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)。选取血糖高于11.1 mmol/L的大鼠作为糖尿病模型大鼠，造模后的大鼠均表现明显的多饮、多尿、多食、体重下降，并有精神萎靡、反应迟钝、动作迟缓、蜷卧拱背、皮毛无光泽、松散、身体消瘦、窝湿等现象。

1.3 指标检测

每天观察各组大鼠的活动状态、精神状态、摄食量、饮水量、皮毛、大小便情况，于第12周称重，腹主动脉取血测血糖、糖耐量、TC、TG、糖化血红蛋白、肿瘤坏死因子－α(TNF－α)及白细胞介素6(IL－6)等值。

1.4 统计学处理

所有计量资料均以均数±标准差(X±s)表示。采用PEMS 3.1统计软件进行统计分析，组间比较采用方差分析。

2 结果

2.1 体重

结果见表1。可见，治疗后各组大鼠体重均比给药前体重有所增加，模型组大鼠体重比给药前减轻。

2.2 空腹血糖

结果见表2。可见，模型组大鼠空腹血糖较正常组明显升高。各组大鼠经过治疗后空腹血糖值与模型组比较有显著性差异(P＜0.05)，各组治疗前后空腹血糖值也有明显下降。

表1 给药前后各组大鼠体重变化(X ± s，n=15)

表2 给药前后各组大鼠血糖变化(X ± s，n=15，mmol/L)

2.3 糖耐量

给药第12周后，大鼠禁食不禁水8 h，按2 g/kg的剂量腹腔注射 1.11 mol/L 的葡萄糖溶液，然后测定 0，60，120，180，240 min血糖值，结果见表3。可见，正常组大鼠在180 min时血糖恢复到正常血糖值，模型组大鼠在240 min时血糖值仍然维持较高的水平，糖耐量异常。各给药组大鼠在240 min时血糖值开始下降，说明中药复方对糖耐量异常有所改善。

表3 第12周各组糖耐量试验结果(X ± s，n=15)

2.4 血脂

结果见表4。

表4 给药前后各组血脂变化比较(X ± s，n=15，mmol/L)

2.5 糖化血红蛋白、TNF－α及IL－6

结果见表5。可见，模型组大鼠体内糖化血红蛋白含量较正常组明显升高，即中药复方对糖尿病大鼠糖化血红蛋白含量有所降低。各给药组均降低了2型糖尿病大鼠血清IL－6和TNF－α，但组间无显著性差异，说明无剂量依赖性。

3 讨论

糖尿病属中医“消渴”范畴，基本病机为阴虚燥热，本虚标实，阴虚为标，燥热为本。近年来大量研究说明，2型糖尿病的发生、发展与许多炎症因子密切相关。随着体内TNF－α，IL－6等多种炎症因子的释放，引起胰岛素抵抗，发生胰岛素分泌功能障碍。许多炎症因子如 TNF－α、白细胞介素1(IL－1)、IL－6、γ－干扰素(IFN－γ)等，可通过血液和(或)旁分泌的作用干扰胰岛素的信号转导，导致胰岛素敏感细胞(肝细胞、肌肉细胞和脂肪细胞)内的胰岛素受体底物丝氨酸磷酸化，抑制其酪氨酸磷酸化，导致胰岛素与胰岛素受体的结合能力下降，并减弱胰岛素激活其下游的磷脂酰肌醇－3－激酶结合能力，干扰胰岛素信号经IR/IRS/PI－3K通路下传，从而诱发胰岛素抵抗(IR)[8－12]。本试验结果可知，阳性对照组及中药复方各剂量组对2型糖尿病大鼠糖耐量异常有一定的改善作用，明显降低了血糖、糖化血红蛋白、TC，TG，IL－6，TNF－α，其作用机制可能与减少炎症因子释放，增加胰岛细胞敏感性有关。其他机制例如抑制α－葡萄糖苷酶活性、提高超氧化物歧化酶(SOD)活性、清除自由基、抑制脂质过氧化、对受损胰岛B细胞修复作用等，还需进一步研究。

表5 第12周各组糖化血红蛋白、TNF－α及IL－6比较(X ± s，n=15)

[1]Zimmet P，Alberti KGMM，Shaw J.Global and societalimplieations of the diabetes epidemie[J].NatUre(London)，2001，414:782 － 787.

[2]王梅芳，竺叶青.中药及其复方制荆治疗2型糖尿病的研究概况[J].中成药，2001，23(4):281 －285.

[3]洪 浩.中药降血糖作用机制实验研究进展[J].安徽中医学院学报，2001，20(2):59 －61.

[4]陈 奇.中药药理研究方法学[M].第2版.北京:人民卫生出版社，2006:714－715.

[5]黄国钧，黄勤挽.医药实验动物模型－制作与应用[M].北京:化学工业出版社，2007:531－536.

[6]陈伟强，黄际薇，罗利琼，等.灵芝多糖调节糖尿病大鼠血糖、血脂的实验研究[J].中国老年学杂志，2005，25(8):957－958.

[7]高丽芳，曹丽歌，陈振良，等.魔芋及几丁质对血糖、血脂影响的实验研究[J].毒理学杂志，2005，19(3):219－220.

[8]Libby P，Ridker PM，Maseri A.Inflammation and atherosclerosis[J].Circulation，2002，105:1 135 － 1 143.

[9]Hotamisligil GS，Peraldi P，Budavari A，et al.IRS － 1 － meditaed inhibition of insulin receptor tyrosine kinase activity in TNF－alpha and obesity－inducedinsulin resistance Sphingomyelinase[J].J Biol Chem，1996，271(5 249):665－670.

[10]Peraldi P，Hotamisligil GS，BuurmanWA，et al.Tumor necrosis factor(TNF)－alpha inhibits insulin signaling through stimulation of the p55 TNF receptorand activation of sphingomyelinase[J].JBiol Chem，1996，271(22):13 018－13 022.

[11]Uraznin B.Molecular mechanisms of insulin resistance:Serine phosphor－lation of insulin receptor substrate－1 and increased expression of p85a，The two sides of a coin[J].Diabetes，2006，55:2 392.

[12]关丽娜，都 健，王慧敏，等.运动对胰岛素抵抗大鼠丝氨酸/酪氨酸磷酸化通路干预效应的研究[J].中国糖尿病杂志，2010，18(5):330.