尤溪县不同地区藤茶黄酮含量及其质量评价

陈卫琳，张 宽，丁春花，杨彩媚，梁一池，胡 娟

（福建中医药大学，福建 福州 350108）

藤茶是葡萄科蛇葡萄属中的显齿蛇葡萄（AmpeLopsis grossedentata）（Hand-Mazz）W.T.Wang的嫩茎叶[1]，主要分布在湖南、湖北、广东、广西、江西、福建、云南、贵州等省区[2]。尤溪县地处戴云山脉北段西部，地貌以中低山地为主。境内东西山岭耸峙，丘陵起伏，千米山峰林立，山间盆地错综；中部尤溪河谷斜贯南北。各地海拔差异较大，最高峰大模山海拔1472米，最低处尤溪口码头闽江江面海拔仅31米。尤溪县地貌差异较大，主要有有四大类型：山地、丘陵、山间盆地、河谷平原。本文采用紫外分光光度法（UV），以二氢杨梅素为指标性成分，对藤茶中总黄酮进行含量测定。

1 仪器与材料

14批藤茶样品采自福建省尤溪县不同地区，将鲜品茎、叶分离，通风处晾干后置鼓风干燥箱中40 ℃干燥，粉碎备用；二氢杨梅素对照品（成都曼思特生物科技有限公司，纯度均≥98%，批号：27200-12-0）。

TV-1800紫外分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）。

金叶RE-52型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；DHG-9240型电热恒温鼓风干燥箱（上海精宏实验设备有限公司）；FA2104N型万分之一电子分析天平（上海精密科学仪器有限公司）；YP202N型百分之一电子天平（上海精密科学仪器有限公司）。

2 方法与结果

2.1 供试品及对照品溶液的制备

2.1.1 供试品溶液 称取第1～7批干燥藤茶茎粉末各10 g、叶粉末各5 g，置于圆底烧瓶中，80%乙醇[1]加热回流提取3次，每次60 min，料液比1∶30，合并提取液，离心，取上清液，分别旋转蒸发浓缩至一定体积，茎浓缩液用80%乙醇定容于50 mL容量瓶中，叶浓缩液用80%乙醇定容于100 mL容量瓶中。藤茶茎、叶浓缩液分别用石油醚（1∶1）萃取4次，挥干石油醚，茎浓缩液用80%乙醇稀释定容至50 mL量瓶，摇匀备用；叶浓缩液用80%乙醇稀释定容至100 mL量瓶，摇匀备用。

称取第8～14批干燥藤茶茎、叶各2 g，置于圆底烧瓶，80%乙醇加热回流提取3次，每次60 min，料液比1∶30，合并提取液，离心，取上清液，旋转蒸发浓缩至一定体积，茎、叶浓缩液用80%乙醇稀释定容至100 mL量瓶，摇匀备用。

2.1.2 对照品溶液 精密称取二氢杨梅素对照品0.0050 g，置25 mL量瓶中，加适量80%乙醇溶解，定容至刻度，摇匀，配制成0.2 mg/mL的溶液，作为对照品贮备液。

2.2 结果

2.2.1 最大吸收波长的确定 取对照品贮备液，于室温放置，精密吸取对照品贮备液1 mL于25 mL容量瓶中，加80%乙醇稀释定容至刻度，摇匀。取供试品溶液1 mL于500 mL容量瓶中，加80%乙醇稀释定容至刻度，摇匀。随行空白，取稀释后对照品和样品溶液于UV 1800分光光度计上扫描，结果供试品和对照品的吸收图谱一致，在292 nm处有最大吸收，故选择292 nm为测定波长。见图1～2。

2.2.2 标准曲线的绘制 精密吸取0.1 mg/mL二氢杨梅素对照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4 mL，分别置于10 mL容量瓶中，80%乙醇定容至刻度。于292 nm测其吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标做标准曲线。得回归方程为：y=0.0602x+0.0063，r=0.9998。

2.2.3 样品总黄酮含量测定 精密吸取第1～7批茎、叶供试品溶液各1.0 mL，置于50 mL量瓶中，80%乙醇稀释定容至刻度，摇匀，再吸取5 mL置于50 mL量瓶中，80%乙醇稀释定容至刻度，摇匀，再吸取5 mL置于10 mL量瓶中；精密吸取第8～14批茎供试品溶液各5 mL，置于50 mL容量瓶中，80%乙醇稀释定容至刻度，摇匀，再吸取1 mL置于10 mL容量瓶中，80%乙醇定容至刻度；精密吸取第8～14批叶每个编号供试品溶液各1 mL，置于50 mL容量瓶中，80%乙醇稀释定容至刻度，摇匀，再吸取1 mL置于25 mL容量瓶中，80%乙醇定容至刻度；于292 nm处测定吸收值（A）。根据回归方程计算样品总黄酮含量，结果见表1。

图1 藤茶茎与二氢杨梅素对照品紫外吸收光谱

图2 藤茶叶与二氢杨梅素对照品紫外吸收光谱

表1 14 个不同产地藤茶样品中总黄酮含量（%）

3 讨论

藤茶是葡萄科蛇葡萄属中的显齿蛇葡萄（AmpeLopsis grossedentata）（Hand-Mazz）W.T.Wang的嫩茎叶，味甘淡，性凉，其功效为清热解毒，祛风湿、强筋骨。药理实验表明，藤茶总黄酮具有消炎、抑菌、止咳、镇痛、护肝、消脂等功效[3]。其主要活性成分为二氢杨梅素，具有降血脂、消炎和清热解毒功能。除了将藤茶作为茶用以外，目前已提取藤茶黄酮生产药品和饮料等[4]。由测定结果可知，藤茶叶中总黄酮含量高于藤茶茎中总黄酮含量，采用紫外分光光度法测定第1～7批藤茶，1号、5号叶的总黄酮含量比较高，第8～14批藤茶，10号叶、茎中总黄酮含量均为最高。

[1]王 岩,王 婴,周莉玲,等.正交试验法优选藤茶的提取工艺[J].中国中药杂志,2002,27(4):302-303.

[2]何桂霞,裴 刚,周天达,等.显齿蛇葡萄中总黄酮和二氢杨梅素的含量测定[J].中国中药杂志,2000,25(7):423-425.

[3]张友胜,杨伟丽,熊浩平.类茶植物显齿蛇葡萄的研究利用现状[J].茶叶通讯,2001(1):19-23.

[4]陈玉琼,李安琪,孟 燕.藤茶黄酮及二氢杨梅素提取条件的优化[J].华中农业大学学报,2009,28(1):102-110.