APP下载

HPLC法测定维库溴铵含量及有关物质

2012-05-01

药学研究 2012年6期
关键词:溴铵法测定本品

杜 宁

(江苏省食品药品检验所,江苏 南京 210008)

维库溴铵是80年代开始应用,为单季铵类固醇类中效去极化肌松药,在ICU重症病人使用呼吸机时,用于防止人机对抗现象,因该药代谢快,无肌颤现象,所以较其他肌松药的使用更为广泛[1]。心血管稳定性是其突出的优点,常用于危重病人的全身麻醉[2],文献报道[3]用高效毛细管电泳法测定其含量,但对仪器要求较高,而且需要内标,步骤繁琐。我们建立了高效液相色谱法测定含量和分离有关物质,为其质量研究、稳定性考察和有效期预测提供了有效的分析手段。

1 仪器和试药

HP 1100系列高效液相色谱仪,DAD检测器。维库溴铵对照品(USP提供,批号为1711155);维库溴铵(某厂提供,批号分别为091204,091205,091206);甲醇为色谱纯,水为重蒸水,其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 AKZO NOBEL Kromasil ODS柱(4.6mm×250mm,5μm),柱温 30 ℃。以 0.3 M 甲酸铵溶液 - 甲醇(40∶60)为流动相,检测波长为210 nm。

2.2 分离专属性 称取本品 0.1 g,加 0.01 mol·L-1的盐酸溶液溶解并稀释至50mL。取5mL溶液,分别加1 mol·L-1盐酸溶液,1 mol·L-1氢氧化钠溶液,30%过氧化氢溶液2mL和100℃水浴加热1 h,中和后加流动相至10mL,进样,考察降解物的分离性能,分离良好,见图1。

图1 酸破坏(A)、碱破坏(B)、氧化破坏(C)和高温破坏(D)色谱图 1.维库溴铵;2.溴离子

Br离子峰定位:称溴化钾 0.124 g,加 0.01 mol·L-1盐酸溶液溶解至10mL,进样,见图2。

图2 溴化钾色谱图 2.溴离子

2.3 标准曲线 称取五氧化二磷减压干燥至恒重的对照品200.02mg,加 0.01 mol·L-1的盐酸溶液溶解稀释至 100mL。分别精密量取 0.5,1.0,2.0,5.0,10.0,20.0,25.0mL置50mL量瓶中,加0.01 mol·L-1的盐酸溶液稀释至刻度,摇匀。分别量取20μL注入色谱仪,记录色谱图。以浓度(C,μg·mL-1)为横坐标,峰面积(A)为纵坐标,进行线性回归,回归方程为:A=15038C+752840,r=0.9995(n=7)。

结果表明,在 20.0 ~1000.1 μg·mL-1范围内,峰面积与浓度呈良好线性关系。

2.4 重复性试验 按照含量测定方法,另一试验者称取样品,进样,分别测定,含量的RSD均小于2.0%。

2.5 精密度试验 取标准曲线高、中、低3个浓度样品,分别进样5 次,RSD 分别为1.0%、0.8%、0.9%。

2.6 稳定性试验 取含量测定项下的供试品溶液,分别于0,2,4,8,12 h,取 20μL 注入色谱仪,记录峰面积,RSD 为0.9%,表明本品在12 h内稳定。

2.7 检出限和定量限 取浓度为2mg·mL-1的对照溶液,用0.01 mol·L-1的盐酸溶液稀释成一系列由高到低梯度浓度的溶液,维库溴铵的检出限(S/N=3)为0.4 μg,定量限(S/N=10)为 1.3 μg 。

3 样品的测定

3.1 有关物质的检查 取本品,加0.01 mol·L-1盐酸溶液分别制成每1mL含5.0mg的供试品溶液和每1mL中含0.1mg的对照溶液。取对照溶液20μL注入液相色谱仪,调节仪器灵敏度,使主成分峰高为满量程的10% ~25%,吸取上述两种溶液20μL分别进样,记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍,除溶剂和溴离子峰外,其他峰为杂质,见图3。

3.2 含量测定 称取本品 0.1 g,加 0.01 mol L-1的盐酸溶液制成每1mL含2mg的溶液,进样,另称取五氧化二磷减压干燥至恒重的维库溴铵对照品,同法制备测定,按外标法以峰面积计算。

非水滴定法测定含量 称取本品0.25 g,加冰醋酸15mL与醋酐5mL溶解,加醋酸汞试液5mL与萘酚苯甲醇指示液2滴,用高氯酸滴定液(0.1 mol·L-1)滴定至显黄绿色,滴定结果用空白试验校正。每1mL的高氯酸滴定液(0.1 mol·L-1)相当于31.89mg的C34H57BrN2O4,见表1。将实验结果进行比对,结果证明,HPLC法测定含量具有可行性。

图3 维库溴铵样品有关物质色谱图

表1 样品测定结果比较(%,n=3)

4 讨论

4.1 改变方法的原因 滴定法测定含量要用到冰醋酸和醋酐,污染重,对人损伤大,并且黄绿色终点不灵敏,故改为HPLC法测定。

4.2 流动相的选择 试验中曾采用乙腈作为有机相,但峰形拖尾严重。甲酸铵溶液的浓度为0.3 M,太大会损伤色谱柱。

4.3 柱温的影响 本试验考察了不同的柱温(25,30,40℃),发现组分的保留时间随柱温升高而缩短,在30℃时可以有效分离,考虑到温度过高可能引起样品分解,故采用30℃。

4.4 试验结果表明,在本法色谱条件下,主峰和有关物质分离较好,无干扰,可用于含量测定和杂质检查。

[1]李爱萍,周琳,姚亚春,等。注射用维库溴铵在静脉泵注时的护理探讨[J].当代护士(学术版),2004,10(10):93-94.

[2]陆志俊,张芝芳,于布为.国产维库溴铵神经肌肉阻滞效应及对心血管的影响[J].上海医药,2000,21(9):35-36.

[3]韩加怡,黄宗玉,陈钰.高效毛细管电泳法测定注射用维库溴铵的含量[J].中国药科大学学报,1998,29(6):443-445.

猜你喜欢

溴铵法测定本品
预热法测定皮革中六价铬测量不确定度评定
高频红外吸收光谱法测定硅碳球中硫含量
哮喘-慢阻肺重叠综合征应用噻托溴铵联合吸入激素的效果
HPLC法测定盐酸伐地那非的杂质含量
舒更葡糖钠用于罗库溴铵过敏反应的评价研究进展
叮!这有一份“颈椎使用说明书”,请查收
蒸馏定铵法测定沸石粉吸氨量
仙鹤草:止血 止咳 补气力
噻托溴铵粉雾剂的禁忌有哪些?
产品说明书里的无用忠告