GC法测定辣椒碱中环己烷、乙醇、乙酸乙酯残留量

蒋 雷，蒋玉梅，宋 非

(1.山东绿叶制药有限公司，山东 烟台 264003;2.烟台市食品药品检验所，山东 烟台 264000)

辣椒碱系自茄科植物辣椒中提取制得的混合物，其主要成分辣椒碱为(反)－N－［(4－羟基－3－甲氧基苯基)甲基］－8－甲基－6－壬烯酰胺，为白色或微黄色结晶性粉末。辣椒碱主要通过影响C型感觉神经元上的神经传导介质P物质的释放、合成和贮藏而起镇痛和止痒作用。

辣椒碱生产当中使用了有机溶剂:环己烷(二类残留溶剂)、乙醇(三类残留溶剂)、乙酸乙酯(三类残留溶剂)。辣椒碱现行标准为:国家食品药品监督管理局标准YBH05742006，其中没有残留溶剂的检查，根据《中国药典》2010年版凡例规定“如生产过程中引入或生产中残留有机溶剂，均应按‘残留溶剂测定法’检查并应符合相应溶剂的限度规定”。

1 仪器与试药

1.1 仪器 气相色谱仪(agilent6890N);氮、氢、空气发生器(SGD－300，北京东方精华苑科技有限公司);电子分析天平(Sartorius BP210S)。

1.2 试药 环己烷(分析纯);乙醇(色谱纯);乙酸乙酯(色谱纯);辣椒碱(山东绿叶制药有限公司20101017)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 检测器:氢火焰离子化检测器;固定相:6%氰丙级苯基－94%二甲基聚硅氧烷;色谱柱:石英毛细管柱30 m;载气柱流量 2.0mL·min－1;助燃气:氢气;柱温:120℃维持10min;气化室温度:200℃;检测器温度:250℃。

2.2 对照溶液的制备 精密移取环己烷50.0μL(39.00mg)，乙醇 63.4μL(50.00mg)，乙酸乙酯 55.4μL(50.00mg)于100mL量瓶中，加适量N，N－二甲基甲酰胺溶解并稀释至刻度。精密取上述溶液1mL置于10mL量瓶中，用N，N－二甲基甲酰胺溶解并稀释至刻度。

2.3 供试品溶液的制备 精密称取供试品0.5 g于10mL量瓶中，加适量N，N－二甲基甲酰胺溶解并稀释至刻度。

2.4 分别精密量取对照溶液、供试品溶液各1μL，注入气相色谱仪，记录色谱图。

2.5 专属性 按2.2项下配制对照品溶液，图1中三色谱峰(从左到右)依次为环己烷、乙醇、乙酸乙酯，三色谱峰分离良好，无干扰。

图1 专属性试验色谱图

2.6 线性关系 分别配制浓度为对照品溶液50%，75%，100%，125%，150%的溶液，测定。以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，分别对三种溶剂进行线性回归，环己烷、乙醇、乙酸乙酯回归方程分别为:

Y=3.0733X －0.1584，r=0.998，线性范围:19.5 ～58.5 μg·mL－1;Y=1.6208X －8.6，r=0.998，线性范围:25.0 ～75.0 μg·mL－1;Y=1.3872X－0.88，r=0.999，线性范围:25.0 ～75.0μg·mL－1。

2.7 精密度 取对照品溶液重复进样5次，每次1μL，测得环己烷峰面积的RSD为3.5%;乙醇峰面积的RSD为3.3%;乙酸乙酯峰面积的RSD为3.1%。

2.8 准确度 称取同一批次辣椒碱(山东绿叶制药有限公司20101017)0.5 g，未检出三种有机溶剂，精密称定9份，并分别加入3个梯度量的环己烷、乙醇、乙酸乙酯，按2.1项下色谱条件测定，结果见表1、2、3。

表1 环己烷回收率试验结果

续表1:

表2 乙醇回收率试验结果

表3 乙酸乙酯回收率试验结果

2.9 定量限 取对照品溶液稀释至信噪比10∶1，环己烷的定量限为:0.7 ×10－3mg·mL－1;乙醇的定量限为:1 ×10－3mg·mL－1;乙酸乙酯的定量限为1 ×10－3mg·mL－1。

3 小结与讨论

3.1 在色谱条件优化过程中，发现采用高极性的聚乙二醇柱分离效果不如极性相对较低的DB－624柱，较高的柱温既能够满足分离度的要求，又可缩短出峰时间，从而提高检测效率。

3.2 溶剂的选择 对丙酮、DMSO、正己烷等做过实验均未达到预期效果，最终选择DMF作为溶剂，与测定溶剂之间能够达到有效分离。

3.3 实验结果表明本方法操作简单，准确、专属性强、重现性好，可作为辣椒碱中乙酸乙酯、环己烷、丙酮残留量的测定方法。

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典2010年版(二部)［S］.北京:中国医药科技出版社，2010:附录 ⅧP.