苦瓜多糖提取工艺的优化及其抗氧化活性
2012-04-29马景蕃江烨等
马景蕃 江烨等
摘要:采用水提醇沉法提取苦瓜(MomordicacharantiaL.)中的多糖,在单因素试验的基础上设计正交试验考察提取过程中提取温度、提取时间、料水质量比和V浸提液∶V乙醇对多糖提取率的影响,并对所提取苦瓜多糖的抗氧化活性进行了检测。结果表明,最佳提取工艺为提取温度90℃、提取时间2h、料水质量比1∶35、V浸提液∶V乙醇=1∶4.0。苦瓜多糖对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)和超氧阴离子自由基(O2-·)有较好的清除作用,在试验范围内清除率随苦瓜多糖用量的增加而升高。
关键词:苦瓜(MomordicacharantiaL.)多糖;水提醇沉法;优化;抗氧化
中图分类号:S642.5;R284.2;O629.12 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2012)24-5761-03
苦瓜(MomordicacharantiaL.)属葫芦科植物,是一种常用蔬菜。对于苦瓜属植物的药用价值人们早有认识,在民间被广为应用[1]。现代医学研究证实苦瓜具有抗肿瘤、提高免疫功能、降血糖等作用。多糖作为苦瓜的有效成分之一几乎无毒副作用,在治疗肿瘤、免疫力低下、高血糖、衰老、病毒性疾病等方面疗效独特[2]。本试验采用水提醇沉法从苦瓜中提取粗多糖,考察乙醇添加量、提取温度、提取时间和料水质量比对其提取率的影响,优化提取工艺。并对苦瓜多糖的抗氧化性能进行分析,为其开发利用提供参考依据。
1 材料与方法
1.1 材料
新鲜苦瓜购自当地市场,将鲜苦瓜洗净去内瓤,切成薄片。置于电热恒温鼓风干燥箱中60℃烘干至恒重,干燥的苦瓜经粉碎后过40目筛,得到黄绿色苦瓜粉。
所用化学试剂均为分析纯。FZ102微型植物粉碎机,天津市泰斯特仪器有限公司;DHG-9415A电热恒温鼓风干燥箱,上海一恒科技有限公司;HH-4数显恒温水浴锅,金坛市科析仪器有限公司;SHB-3循环水多用真空泵,郑州杜甫仪器厂;RE-3000旋转蒸发仪、TD5A台式低速离心机、AL204电子天平,海南凯达科学仪器有限公司。
1.2 方法
1.2.1 原料预处理 将苦瓜粉用80%的乙醇(体积分数,下同)回流4h以除去苦瓜中的单糖、低聚糖、甙类等杂质[3],抽滤,滤液经回流回收乙醇,干燥后的苦瓜粉滤渣用于提取多糖。
1.2.2 苦瓜多糖的提取 取1g预处理后的苦瓜粉→按一定的料水质量比加水→置于一定温度的恒温水浴锅中浸提→抽滤→加乙醇沉淀→析出沉淀→4000r/min离心20min取沉淀层→去蛋白→收集清液,再加入4倍体积的乙醇醇析→取沉淀用乙醚、丙酮反复洗涤,干燥24h→得苦瓜粗多糖固体[4]。
粗多糖提取率=葡萄糖质量浓度×稀释倍数×样品溶液体积×换算因子/苦瓜粉质量×100%
1.2.5 正交试验 在单因素试验的基础上设计L9(34)正交试验对提取条件进行优化[10]。
2 结果与分析
2.1 单因素试验结果
2.2 正交试验结果
2.3 苦瓜多糖的抗氧化活性分析
3 结论
2)苦瓜多糖能有效清除DPPH·和O2-·,在试验范围内其清除率随苦瓜多糖用量的增加而升高,表现出显著的抗氧化性。
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