1083例妇女HPV感染状况分析

西电集团医院（西安710077） 杨小艺 李 娜 王海宁

宫颈癌是比较常见的妇女恶性肿瘤之一，发病率仅次于乳腺癌。有研究证实，在世界范围内罹患宫颈癌的患者中，有93%以上均能检测到 HPV感染［1－2］。其中，高危型HPV感染、病毒的持续存在是导致宫颈癌前病变及宫颈癌的必要因素［3］。目前已分离出110余种HPV－DNA，其中30多种与宫颈感染和病变有关。国外有文献报道因地域差异和检测方法不同，宫颈原位腺癌及浸润性腺癌与HPV型别的关系及检出率大有不同［4］。为了解西安地区妇女HPV感染状况及常见型别分布，本文采用HPV－RDB法对1083例西安市城区妇女进行HPV－DNA检测，现将检测结果报道如下。

对象与方法

1 研究对象 以2010年6月至2011年6月在西电集团医院及西安交通大学医学院第一附属医院妇科门诊就诊的1083例妇女为研究对象，年龄18～80岁，平均年龄36.5岁。每例均检测HPV19种亚型。

2 标本采集 宫颈脱落细胞在无菌条件下用特制宫颈刷深入宫颈管内2cm，旋转数周后并停留片刻取出，取出后放入装有2ml细胞保存液的保存管中，沿刷柄折痕将宫颈刷折断，旋紧管盖，－20℃保存待测。

3 试剂与仪器 人乳头瘤病毒基因分型检测试剂盒（PCR－反向斑点杂交法）由广州达安基因有限公司提供；仪器是由广州达安基因有限公司提供的DA7600型扩增仪。

4 样本DNA的提取 将宫颈刷上的细胞洗脱于2ml细胞保存液中，洗脱液转至1.5ml离心管中，10000r／min离心5min，弃去上清，保留管底细胞沉淀。向沉淀中加入50μl DNA提取液，充分振荡混匀，100℃保温10min，10000r／min离心5min，上清备用。PCR扩增：严格按照试剂盒使用说明，取PCR反应管若干于室温解冻平衡10min，分别加入提取上清5μl，6000r／min瞬时（3s）离心后，将各反应管放入PCR仪，按下列条件扩增：93℃3min变性，然后按93℃40s→55℃40s→72℃40s扩增，共40个循环，最后72℃延伸7min。杂交：将PCR扩增产物98℃，8min变性，立即置于冰水混合物中2min以上，按试剂盒说明进行杂交反应。

5 统计学方法 应用SPSS16.0统计软件进行统计分析，采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

结 果

1 西安市城区妇女HPV感染率及HPV亚型分布 见表1。1083例样本中，检出HPV阳性402例，总阳性率为37.12%（402／1083）。亚型感染率相对较高的3个型别依次为16、52和58型，分别占检出总例数的38.06%、16.42%和14.43%。分别占总例数的14.13%、6.09%和5.36%。

表1 西安市城区妇女HPV感染亚型分布

2 以年龄分组1083例西安市城区妇女HPV感染及分布情况 见表2。以＜20组和＞60岁组检出率最高（75.00%和70.00%）。剩下的4个年龄段组，以20～29岁和40～49岁年龄段检出率较高（P＜0.05）。

表2 以年龄分组HPV感染情况

讨 论

人乳头瘤病毒是一种具有种属特异性的嗜上皮病毒，属于乳头瘤病毒科，是一种双链闭环小DNA病毒。流行病学研究表明，HPV感染与宫颈癌的发生密切相关，现已知20余种与癌症相关的HPV型别，例如HPV16、18、45、31、33、52、58和35是引起宫颈癌的比较常见的几种基因型别，但是其地理变异及区域分布尚待研究［2］。

Clifford等［4］研究发现在世界范围内除亚洲之外的区域比较常见的HPV基因型别是16、18、45、31和33，而在亚洲比较常见的是52和58。Bao等［5］对大量处于宫颈病变各个时期以及细胞学检查正常的中国女性HPV感染进行监测，结果发现感染最多的型别是16型，其次比较广泛流行的是58和52型。国内有学者研究证实，福州地区HPV阳性检出率为25%，沈阳地区HPV阳性检出率为21.63%，贵州地区HPV阳性检出率为25.9%，HPV主要检出亚型为16、52和58［6－8］。

本研究结果显示，1083例受检者中HPV阳性者402例，阳性率为37.12%。检测HPV 19种亚型中，单纯感染一种亚型者287例，同时感染2个亚型者93例，同时感染3个亚型者18例，同时感染4个亚型者4例。从表1中可以看出19种亚型中以16型感染例数最多，为153例（38.06%）（其中单一感染102例，混合感染41例）；其次为52型66例（16.42%）（其中单一感染29例，混合感染37例）；58型58例（14.43%）（其中单一感染32例，混合感染26例）。而在世界范围内流行比较广泛的18型，仅检出阳性14例，阳性率1.29%，说明西安市城区育龄妇女在已检出的高危亚型中比较常见的3种基因型别是16、52和58，与国内外学者研究结果大致相同。但是西安地区HPV阳性检出率为37.12%，明显高于福州、沈阳、贵州等地，考虑与受检病例大部分为门诊有宫颈病变的患者有关。

年龄也是HPV感染的重要因素。30岁之前的年轻妇女由于性生活活跃，HPV感染机会大，但是30岁之前自身免疫能力也较强，大部分HPV可通过自身免疫系统清除，只造成一过性感染。30岁之后，HPV的感染率下降，但是随着年龄的增长，宫颈癌的发病率逐渐升高。所以对于30～50岁的妇女进行HPV的检测和随访意义重大。本研究结果显示，在＜20组和＞60岁组检出率各出现两个高值（75.00%和70.00%），但这两组我们检测例数过少。剩下的4个年龄段组，以20～29岁和40～49岁年龄段检出率较高，差异有统计学意义（χ2＝24.11，P＜0.05）。结果表明30岁以前HPV感染率较高，这与年轻妇女性生活活跃有关；40～49岁为宫颈癌高发阶段，HPV病毒的持续感染造成了宫颈的癌前病变乃至宫颈癌的发生，提示宫颈癌普查计划应该对这一阶段人群进行重点关注。

HPV分型检测是检测受检者罹患宫颈癌的发病风险度及决定其筛查间隔的重要手段。本文通过对西安城区1083例妇女HPV感染型别的检测，总结出本地区主要流行的HPV感染型别为16、52和58型；并对感染率较高年龄段进行了分析统计，为宫颈癌的普查提供了基本信息，并为宫颈癌疫苗的研究提供了一定的依据。

［1］ Walboomers JM，Jacobs MV，Manos MM，et al.Human papillomavirus is a necessary cause of invasive cervical cancer worldwide［J］.The Journal of Pathology，1999，189（1）：12－19.

［2］ Bosch FX，Manos MM，Munoz N，et al.Prevalence of Human Papillomavirus in Cervical Cancer：a Worldwide Per－spective［J］.J NCI J Natl Cancer Inst，1995，87（11）：796－802.

［3］ Schiffman M，Castle PE.Human papillomavirus：epidemiology and public health［J］.Arch Pathol Lab Med，2003，127（8）：930－934.

［4］ Clifford GM，Smith JS，Plummer M，et al.Human papillomavirus types in invasive cervical cancer worldwide：a meta－analysis［J］.Br J Cancer，2003，88（1）：63－73.

［5］ Bao YP，Li N，Smith JS，et al.Human papillomavirus type－distribution in the cervix of Chinese women：a metaanalysis［J］.Int J STD AIDS，2008，19 （2）：106－111.

［6］ 汪 欣，赵素萍，魏建威.福州地区935例妇女HPV感染情况的分析［J］.分子诊断与治疗杂志，2011，3（1）：33－35.

［7］ 李艳红，张 伟，朱少君，等.早期宫颈癌筛查有效方案的探讨和研究［J］.陕西医学杂志，2006，35（7）：842－843.

［8］ 高玉华，高 岩.2104名体检妇女高危型 HPV－DNA检测情况的分析［J］.医药与保健，2010，18（1）：124－125.