原发性高血压患者尿液足细胞标志蛋白PCX水平测定及分析

刘冬青，赵莲英，樊瑞芬，瞿 峰

(1邯郸市第一医院，河北邯郸 056002;2河北工程大学附属医院)

近年来，我国原发性高血压发病率逐渐升高，肾脏是其重要的靶器官。近几年大量的研究证实，尿液中出现足细胞是诊断肾脏早期微小病变最有效的方法，但其检查方法繁琐、临床应用受限。2011年11月～2012年3月，我们对92例原发性高血压患者尿液中足细胞标志蛋白Podocalyxin(PCX)、微量白蛋白(mALB)进行了检测及对比分析，旨在探讨PCX在早期肾损害诊断中的应用价值。

1 资料与方法

1.1 临床资料 同期于我院就诊的原发性高血压患者92例(高血压组)，男54例，女38例;年龄40～76岁。均符合1999年WHO及中国高血压防治指南高血压病诊断标准相关规定，收缩压(SBP)≥140 mmHg和(或)舒张压(DBP)≥90 mmHg。排除冠心病、糖尿病及肾血管性、慢性肾脏病性高血压。另选取我院体检中心的健康体检者30例作为对照组，两组一般资料具有可比性。

1.2 尿液中PCX、mALB检测 两组均收集清晨首次清洁中段尿10 mL，2 500 r/min离心10 min后取上清，一部分用免疫比浊法测定mALB，试剂盒为英国朗道厂家提供，所用仪器为日立7170全自动生化分析仪。另一部分保存于－80℃低温冰箱中(避免反复冻融)待检 PCX:取人足细胞标志蛋白PCX ELISA试剂盒(美国R＆D公司提供)，用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，向包被单抗的微孔中依次加入PCX抗原、生物素化的抗人PCX抗体、辣根过氧化物标记的抗生物素蛋白，经过彻底洗涤后用底物四甲基联苯胺(TMB)显色，用酶标仪在450 nm波长下测定吸光度值，计算样品浓度。

1.3 统计学方法 采用SPSS13.0软件进行统计学处理。计量资料用±s表示，正态分布的两组均数间比较用t检验，计数资料采用χ2检验，检验水准α=0.05。指标间相关性采用Pearson相关分析法。

2 结果

2.1 尿液PCX、mALB水平 高血压组和对照组尿液 PCX 分别为(4.816 ±1.769)、(2.032 ±0.652)ng/mL，mALB 分别为(46.6 ±10.3)、(11.2 ±5.9)mg/L，组间比较P均 ＜0.01。

2.2 尿液PCX、mALB阳性率 高血压组和对照组尿液 PCX 阳性率分别为 45.6%(42/92)、0，mALB阳性率分别为28.3%(26/92)、0，组间比较P分别＜0.01、0.05;高血压组PCX阳性率显著高于mALB阳性率(P＜0.05)。

2.3 高血压组尿液中PCX水平与mALB水平的关系 Pearson相关分析显示，高血压组尿液中PCX水平与 mALB水平呈显著正相关，P＜0.05(r=0.749)。

3 讨论

足细胞即肾小球脏层上皮细胞，呈趾状交叉覆盖于肾小球基底膜最外层，连同基底膜和毛细血管内皮细胞一起，构成肾小球血液滤过屏障。肾小球损伤时足细胞首当其冲，故足细胞损伤和脱落是肾病最早期的病理改变。目前尿液中mALB作为肾早期损伤的常用检测指标已在临床广泛应用。PCX又称为Podocalyxin相似蛋白1，位于足细胞顶端区，近期研究显示其为肾脏足细胞表达的带有大量负电荷的唾液酸黏蛋白，其主要表达在肾小球上皮细胞而不表达于其他的尿道上皮细胞，该蛋白缺乏或改变将最终影响肾小球滤过膜的功能［1］。Hara等［2］证实，肾脏疾病患者尿中排泄的足细胞及其裂解碎片均能反映足细胞损伤程度。Vogelmann等［3］研究提示，即使是凋亡的足细胞仍然表达PCX。因此，目前临床已将PCX作为检测各种肾小球疾病患者足细胞的标志分子［4］，用PCX代表和定量尿中足细胞的脱落情况对评价肾小球疾病中足细胞的损伤具有临床意义。

大量文献证实，尿中mALB是早期发现肾病最敏感、最可靠的检测指标［5］。本研究显示，高血压组尿液中PCX、mALB水平及阳性率均显著高于对照组，高血压组PCX阳性率显著高于mALB阳性率;Pearson相关分析显示，高血压组尿液中PCX水平与mALB水平呈显著正相关。表明原发性高血压患者存在足细胞受损的状态，即高血压导致足细胞形态结构和相关分子表达异常，进而引起肾小球滤过屏障结构和功能的异常，促使蛋白尿形成;PCX检测比mALB能更早发现原发性高血压患者的微小肾损伤，二者联合检测可以相互弥补、提高早期肾损伤检出率［4，6］。笔者认为，对于尿液中 PCX 或者mALB阳性的高血压患者应及时采取干预措施，如运用血管紧张素转化酶抑制剂、血管紧张素受体阻断剂、肾上腺皮质激素保护足细胞、保护肾功能，减少终末期肾病的发生和发展，此对于保护庞大的原发性高血压人群的健康具有重要临床意义。

［1］Barisone L，Kopp JB.Update in podocyte biology:putting ones best foot forward［J］.Curr Opin Nephrol Hypirtens，2003，12(3):251-259.

［2］Hara M，Yanagibara T，Kihara I，et al.Apical cell membranes are shed into urine froom injured podocytes:a novel phenomenon of podocyte injuy［J］.J Am Soc Nephrol，2005，16(2):408-416.

［3］Vogelmann SU，Nelson WJ，Myers BK，et al.Urinary excretion of viable podoccytes in health and renal disease［J］.Am J Physiol，2003，285(1):40-48.

［4］Petemann A，Floege J.Podocyte damage resulting in podocyturea A potential diagnostic markerto assess glomerulat disease activity［J］.Nephmn Clin Pmct，2007，106(2):61-66.

［5］韦景勇.尿微量白蛋白检测在高血压早期肾损害诊断中的应用价值［J］.临床合理用药，2011，4(7):33-34.

［6］陈立平.足细胞及其相关分子在糖尿病肾病中的作用［J］.中国现代医学杂志，2006，8(16):2478-2483.