镍铬合金与钴铬合金烤瓷熔附金属全冠对犬牙龈组织的影响

付 颖，王稚英，李 新

(1辽宁医学院附属第二医院，辽宁锦州121004;2辽宁医学院口腔医学院)

烤瓷熔附金属(PFM))全冠能完整恢复牙体的形态及功能，抗折力强，且颜色、外观逼真，色泽稳定，表面光滑，耐磨性和抗冲击性强，是目前临床上较为常用的牙齿修复体。镍铬合金是我国牙科最常用的合金，具有强度高、金瓷结合强度好以及价格低廉的优点，但有牙冠桥颈部变色发暗之弊，甚至累及牙龈［1］。钴铬合金烤瓷牙属于非贵金属烤瓷牙中的一种，其优点是具有较强的金属稳定性，耐腐蚀性较高，一般情况下不会出现黑色牙龈或牙龈出血的现象［2］。与贵金属烤瓷修复体以及全瓷修复体相比，钴铬烤瓷修复体的费用低很多。而与镍铬烤瓷修复体相比，钴铬烤瓷修复体又比较安全。2011年3月～2012年2月，我们通过给成年犬制作镍铬合金PFM冠和钴铬合金PFM冠修复体，观察烤瓷熔附金属对动物牙龈组织的影响，为临床牙修复体的设计及开发、PFM材料的选择提供参考。

1 材料与方法

1.1 主要试剂和仪器 金刚砂车针、硅橡胶印模、缩龈线、3M ESPE水门汀黏结剂、环氧树脂。镍铬合金，钴铬合金。TUNEL试剂盒，DAB显色试剂盒，LEICA EM UC6超薄切片机，JEM-1200EX型透射电子显微镜，ZEISS A1光学显微镜，CIAS-1000型细胞图像分析仪。

1.2 实验动物选择及分组 选择清洁级、健康成年雄性杂种犬3只，年龄2岁，体质量15～18 kg。每只犬有42颗恒齿。每只犬右侧牙作为实验组，上颌选8颗牙制作镍铬合金PFM冠，下颌选8颗牙制作钴铬合金PFM冠;左侧牙为正常对照组。实验动物由辽宁医学院实验动物中心提供，生产许可证号为SCXK(辽)2010-0002。

1.3 标本的制作与采集 肌肉注射氯胺酮(0.4 mL/kg)对犬进行麻醉。使用手用龈上龈下刮治器对3只犬进行右侧牙龈龈上龈下刮治，左侧不作处理。1周后，对实验组犬牙分别进行镍铬合金PFM冠和钴铬合金PFM冠修复术。8个月后，切取牙龈组织，手术术式相同。

1.4 牙龈组织观察 ①光镜下牙龈组织病理变化:切取每颗修复体对应的犬牙龈及其对侧健康牙龈一小块，放入质量浓度为4%的多聚甲醛固定液中固定24 h。常规乙醇脱水，石蜡包埋，制成5 μm厚切片，行HE染色，光镜下观察。②电镜下牙龈组织病理变化:切取每颗修复体对应的犬牙龈及其对侧健康犬牙龈一小块，置2.5%戊二醛缓冲溶液固定12 h以后，再出取1 mm3的牙龈组织，放入3%戊二醛缓冲溶液继续固定2 h，再放入1%锇酸固定1 h;梯度乙醇、丙酮脱水，环氧树脂包埋。用超薄切片机切片，厚度为50 nm，经醋酸双氧铀—柠檬酸铅电子染色后，透射电镜观察，拍摄X线片观察牙龈组织超微结构的变化。

1.5 牙龈组织凋亡细胞的检测 采用TUNEL法。每组随机选择6张牙龈组切片(取材及防脱切片的制作同免疫组化实验)，显微镜下观察细胞核中有棕黄色颗粒者为阳性表达细胞。每张切片选择5个不重叠高倍视野(10×40)，采用CIAS-1000型图像分析系统进行阳性细胞计数。凋亡指数=(阳性细胞数/细胞总数)×100%。

1.6 统计学方法 采用SPSS13.0统计软件。数据比较用单因素方差分析。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 光镜下牙龈组织病理变化 光镜下观察到实验组钴铬合金修复体牙龈组织炎症细胞浸润和局部血管充血较少;镍铬合金修复体牙龈组织可见大量的炎症细胞浸润，局部血管充血明显。正常对照组牙龈组织血管充血较轻，炎细胞浸润不明显。

2.2 电镜下牙龈组织病理变化 电镜下细胞凋亡的形态学改变以细胞核的变化为主，核染色质边聚固缩，形成半月形、环形、球形或不规则形的高电子密度的浓缩核;细胞体积明显缩小，形状改变。实验组钴铬合金修复牙的牙龈组织细胞核染色质边聚，镍铬合金修复体牙龈组织细胞早期凋亡，发生细胞核固缩。

2.3 凋亡细胞检测结果 实验组镍铬合金修复牙的牙龈组织的细胞凋亡数较多、钴铬合金修复牙的牙龈组织细胞凋亡数少，正常对照组未见凋亡细胞。实验组用镍铬合金PFM修复后，牙龈组织细胞凋亡指数为58.63%±9.42%;用钴铬合金PFM修复后，牙龈组织细胞凋亡指数为35.80%±7.58%;正常对照组牙龈组织细胞凋亡指数为4.96%±2.19%;前两者相比，P＜0.05;前两者与正常对照组相比，P均＜0.05。

3 讨论

在烤瓷牙发明的最初一段时间里，牙齿修复体主要由贵金属(黄金)制作，为了降低烤瓷牙修复的费用，人们开始研究其他烤瓷用合金——贱金属烤瓷用合金。最早镍铬合金被广泛应用，它含有镍和铍，镍金属相对于别的金属来说活性较高、具有致敏性，铍具有较强的致癌性，长期使用产生牙龈黑线的几率较高，并且还有轻微的毒性反应，不利于人体健康。另外，镍铬合金铸造后收缩率较大，边缘密合性相对较差，而且由于其具有一定的腐蚀性，在人造冠的龈缘易形成黑线，影响美观［3］。

钴铬合金是针对镍和铍的毒性而开发的，有很好的生物相容性［4］，相比镍铬合金，其钴含量更高，一般为25%，因为钴含量高，所以其耐腐蚀性比镍铬合金好，金属稳定性更好，出现牙龈黑线的几率要小许多，并且无毒、无致癌物质、和瓷的结合性更好，更加不易崩瓷。钴铬烤瓷牙兼具金属的强度和瓷的美观，其颜色、外观、质感逼真，色泽稳定，表面光滑，耐磨性强，不易变形，抗折力强，属长久性修复体［5，6］。与贵金属烤瓷牙以及全瓷牙相比，钴铬烤瓷牙的费用低很多。与镍铬烤瓷牙相比，钴铬烤瓷牙又比较安全。

本研究结果表明，用镍铬合金作为金属烤瓷修复体，犬牙龈组织可见大量的炎性细胞浸润，局部血管出血;而用钴铬合金作为金属烤瓷修复体，犬牙龈组织光镜炎性细胞浸润及局部血管出血较少。这一结果与文献［7～9］报道相符。镍铬合金PFM修复犬牙对犬牙龈组织超微结构的影响较大，而钴铬合金PFM修复犬牙对犬牙龈组织超微结构的影响较小。两种金属烤瓷修复体修复后周围牙龈组织都存在着不同程度的细胞凋亡。目前，钴铬合金中钴含量较镍铬合金高，一般为25%。因为含钴量较高，其耐腐蚀性能较镍铬合金好，并且金瓷结合良好，又因为含有较多铬，其熔点较高。与镍铬合金相比，钴铬合金对牙龈组织的影响较少。表明选择钴铬合金制作PFM基底冠，有利用牙龈的健康。

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