自体DC－CIK 细胞过继免疫治疗肾癌的护理

周 梅 李连涛 闫果珍

随着医学技术的不断发展与完善，肿瘤生物治疗已成为继手术、化疗、放疗后第4种治疗模式。树突状细胞(DC)是体内摄取、加工、呈递抗原的最重要的专职抗原呈递细胞，通过MHCⅠ、Ⅱ类途径将外源性抗原呈递给 CD3+CD4+及CD3+CD8+T细胞，诱导机体产生抗原特异性CTL，识别和杀伤肿瘤细胞，并能抑制肿瘤血管生成，同时激发免疫记忆保护[1]，是唯一可以活化初始T细胞的抗原呈递细胞。细胞因子诱导的杀伤自体细胞(cytokine－induce killer cell，CIK)是目前已知杀伤活性较强的肿瘤生物治疗效应细胞，其主要表达T细胞标记的CD3细胞和表达NK标记的CD56细胞，又称为NKT细胞，兼具有T淋巴细胞强大的抗瘤活性和NK细胞的非MHC限制性杀瘤特点，具有增值速度快、杀瘤活性高、杀瘤谱广、毒副作用小等优点[2]。有研究证明，DC与同源CIK共培养具有更强的增殖活性和细胞毒活性[3]。我院从2010年1月～2011年12月对30例术后肾癌患者进行DC与CIK共培养治疗，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择我院行细胞免疫治疗的肾癌根治术后的患者30例，其中男22例，女8例。年龄35～84岁，平均60岁。入选标准:(1)均有明确的影像学检查和病理学诊断。(2)外周血白细胞总数达3×109/L。(3)无传染性疾病。(4)自愿参加研究，同意并签署知情同意书。

1.2 方法 DC，CIK制备和回输。无菌条件下，由专职人员使用血细胞分离机采集患者自体外周血单个核细胞[4](PBMC)，细胞数量达到(1～3)×108以上，必须保证每位患者1套采集管道。Ficoll法 分 离 PBMC，生 理 盐 水 洗 涤 3次，用 含10%人AB血清的RPMI1640培养基调节密度为(1～2)×106/ml，培养第1 d加入重组人IFN－γ至终浓度2000 u/ml，37℃，5%CO2培养箱内培养，第2 d加入rhIL－2(终浓度为1000 U/ml)以及CD3MaAb 50 ng/ml。每3 d离心更换培养液，观察细胞生长情况，同时补加IL－2 100 U/ml。。在单个核细胞培养2 h之后的贴壁细胞中加入含1000 U/ml的GM－CSF和1000 U/ml IL－4的AIM－V培养液，37℃、5%CO2培养箱培养。每3 d换液1次并补充细胞因子，第6 d再加入TNF－a，共培养8～9 d，获得DC。第7 d的DC细胞、CIK细胞按1∶10比例共培养[5]，继续培养6 d;DC－CIK细胞混悬液需新鲜配制，现配现用。具体操作参照卫生部《人体细胞治疗临床研究质控要点》和中国免疫学会制订的《过继性免疫治疗癌症规范》[6]。

2 结果

30例接受治疗的患者中，无1例出现不良反应，无1例出现严重过敏。均能积极有效地配合医护人员，全部圆满完成治疗，病情稳定。

3 护理

3.1 DC－CIK细胞采集前的准备 (1)心理护理。DC－CIK细胞治疗是一种全新的肿瘤生物治疗方法，要使患者和家属完全认可和接受，心理护理极为重要。与患者及家属用通俗易懂的语言沟通，详细介绍该方法的原理、疗效、安全性，以及不良反应特别是采集血细胞过程可能出现的不良反应，减轻患者的紧张和恐惧心理。在采集时可让家属陪同，争取患者的全力配合。(2)资料准备。全面了解患者各项指标，包括身高、体重、白细胞计数及分类、红细胞压积、血小板数量、肝肾功能、血色素等，患者签署知情同意书。(3)环境准备。采集前紫外线照射采集室1 h，保持环境整洁，空气清新，控制温度22～24℃，湿度50%～60%。(4)健康宣教。告知患者采集前1周注意休息，避免受凉，采集前可进食清淡易消化饮食，忌空腹和油腻饮食。

3.2 DC－CIK细胞采集时的护理 目前细胞采集以机采为主，在采集过程中，关键是静脉通路的建立、生命体征的观察以及不良反应的预防和处理:(1)建立良好的静脉通路。为保证采集的顺利进行，尽量选择粗大、弹性好、易于穿刺和固定的静脉，因此首选肘部粗大静脉(贵要、正中)，其次是下肢股静脉。穿刺成功后，应妥善固定，防止在采集的过程中管道脱出。(2)生命体征的观察。在采集过程中，选派1名有经验的护士全程监护，密切观察患者的生命体征。同时观察机器的运转情况，准确记录各项参数。(3)不良反应的预防和处理。在采集过程中易出现低血钙的症状，因此采集中应询问患者有无手脚、口周麻木，头晕、恶心、呕吐、心慌、抽搐等低血钙症的症状，如有应立即遵医嘱给予10%葡萄糖酸钙缓慢静脉注射。如患者出现面色苍白、心率加快、血压偏低的低血容量综合征时，应暂停采集，可以饮用少许糖水和食物，严重者遵医嘱静脉注射50%高渗葡萄糖100 ml扩容。严密观察患者的穿刺部位是否有渗血、渗液，采集完毕拔管后应按压穿刺部位10～15min，穿刺当天勿淋浴，以免引起穿刺点感染。

3.3 DC－CIK细胞回输的护理 回输前，做好患者的心理护理，消除疑虑，使之配合。DC－CIK细胞为血制品，用输血器输注，输注前严格核对，并嘱患者放松心情，可以听听音乐，看看报纸，转移注意力。回输前30min遵医嘱肌内注射盐酸异丙嗪25 mg，以防过敏反应。输注时，选择患者外周粗大静脉，使用一次性输血器，8～9号头皮针，生理盐水湿润管路后输注细胞液。输注开始时，调节滴速20～30滴/min，观察患者的生命体征，如患者无特殊不适，可逐渐调节滴速80～90滴/min，于1 h内输毕，以保证细胞的活性。输注过程中，每隔10min可轻轻摇晃输液瓶，以避免细胞形成团块。细胞输注后，连接生理盐水冲洗管路20min。在DC－CIK细胞回输后，仍要密切观察患者有无发热、寒战、头晕、乏力等不适。出现上述情况，告知医师及时处理。

3.4 不良反应的处理 DC－CIK细胞过继免疫治疗最常见的不良反应是寒战和发热，少数患者还可出现胸闷、气喘、心悸、皮疹，甚至休克等不良反应。寒战、发热的发生可能与DC－CIK细胞体外培养过程中应用多种细胞因子，培养结束洗涤细胞过程中未能将细胞因子及培养基完全清除，致使异源成分输入机体引起变态反应，因此在输注过程中注意严格无菌操作。体温＜38℃，汇报医师，密切观察患者体温，一般停药后体温可自行恢复正常;体温＞38℃，嘱咐患者多喝水，及时汇报医师进行对症处理。但不可应用地塞米松，因地塞米松是一种免疫抑制剂，可能会影响DC－CIK细胞疗效[7]。患者出现胸闷、气喘、皮疹等过敏症状时，立刻停止输注，通知医师，遵医嘱进行抗过敏治疗。穿刺点如有红肿、疼痛、皮温升高、硬结，可给予50%硫酸镁湿热敷。本组30例患者中，无1例发生不良反应，均顺利出院。

4 讨论

肾细胞癌是肾脏最常见的恶性肿瘤，肾癌对放疗和化疗均不敏感，最有效的治疗方法是肾癌的根治性手术，但仍有20%～40%患者术后发生转移[8]。因此，肾癌根治术后如何防止转移、预防复发是亟待解决的问题。由于人体免疫系统在对抗恶性肿瘤中起到重要作用，因此肿瘤的生物治疗已经成为肿瘤综合治疗的重要组成部分。利用生物免疫治疗有利于患者术后免疫功能的恢复，加强机体的抗肿瘤能力，减少复发和转移，从而提高生存率。我院对30例肾癌根治术后患者行DC－CIK生物免疫治疗，发现其对患者的副作用小，安全性高，不良反应少，明显提高了患者的生活质量。

DC－CIK细胞过继免疫治疗是一种新的肿瘤治疗方法，在对患者进行DC－CIK细胞免疫治疗的各个阶段，要注重加强护理干预，严格遵守操作规程，注意无菌操作，重视患者主诉，观察不良反应，及时告知医师给予相应的处理，这些措施的实施在安全有效治疗过程中的起着重要的作用。同时，全程实施针对性的心理护理，使患者和家属对细胞免疫治疗有正确的认识，解除他们的思想顾虑，积极配合治疗和护理，从而达到减少不良反应，改善患者生存质量，延长患者生命的目的。

[1]邹征云，刘宝瑞.树突状细胞瘤苗的制备与临床应用进展[J].肿瘤防治杂志，2004，11(11):1205 －1207.

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[3]张 嵩，王恩忠，白春学，等.共培养的树突状细胞与CIK细胞的体外增殖和杀瘤活性研究[J].实验生物学报，2003，36(5):375－380.

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[5]Wongkajornsilp A，Sangsuriyong S，Hongeng S，etal.Effective osteosarcoma cytolysis using cytokine－Induced killer cells pre－inoculated with tumor RNA － pulsed dendritic cells[J].J Orthop Res，2005，23(6):1460 －1466.

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[8]北京肿瘤生物中心.肿瘤细胞免疫治疗技术能够降低肾瘤术后转移率[EB/OL].(2011 －4 －27)[2012.2.19]http://www.zhongliucls.com/shenai/sazl_12893693.html