二氧化碳超临界流体萃取两面针根挥发油成分的气相色谱－质谱分析＊

周劲帆，覃富景，冯 洁，赖茂祥

(1.广西医科大学药学院，广西 南宁 530021;2.广西中医药研究院，广西 南宁 530022)

两面针为广西特色大宗中药材之一，为芸香科花椒属植物两面针 Zanthoxylum nitidum(Roxb.)DC.的干燥根，被广泛应用于中医处方、中成药及精细化工产品中，为数十种中成药的原料药材，历代本草及中国药典均有收载，具有行气止痛、活血散瘀、祛风通络之功效[1]，主要用于气滞血瘀引起的跌扑损伤、风湿痹痛、胃痛、牙痛、毒蛇咬伤、外治汤火烫伤等，近年研究发现其还有抗肿瘤作用[2－4]。关于两面针药材挥发油化学成分分析的研究已有文献报道[5]。笔者应用二氧化碳超临界流体萃取(SFE－CO2)两面针根挥发油，并应用气相色谱－质谱联用(GC－MS)技术对挥发油化学成分进行分析，鉴定其化学成分结构，报道如下。

1 仪器与试药

HL－(2+1)L/50Mpa－UBQ型超临界流体二氧化碳萃取仪(杭州华黎泵业有限公司);Tracems 2000型气相色谱－质谱联用仪(美国Finnigan公司)。两面针根于2010年10月采自广西南宁市邕宁县，自然凉干后再经微波烘干，粉碎过筛，生药标本由广西医科大学冯洁副教授鉴定为芸香科(Rutaceae)花椒属植物两面针Zanthoxylum nitidum(Roxb.)DC.植物的根，凭证样本存放于广西医科大学药学院。

2 方法与结果

2.1 挥发油的制备

采用SFE－CO2技术，萃取釜压力25 MPa，温度47℃，分离釜1压力7 MPa，分离釜2压力5 MPa，釜1和釜2温度均为室温，萃取时间 3.5 h(静态时间 1 h，动态时间 2.5 h)，流速 20 L/h。用无水硫酸钠干燥后得淡黄色油状物，备用。

2.2 GC－MS联用分析

色谱柱为 DB－5 MS石英毛细管色谱柱(30 m×0.25 mm，0.25 μm);气化温度270℃;程序升温初始温度为60℃，维持2 min，以10℃ /min升温速率升至120℃，再以5℃ /min升至180℃，接着以3℃ /min升至180℃，维持10 min;载气为高纯氦气，流量为1.0 mL/min。取2.1项制得的淡黄色油状物，用氯仿溶解，制成 5.0 g/L 的溶液，0.45 μL 微孔滤膜过滤，进样量为0.8 μL，分流比 40 ∶1，溶剂延迟时间 2 min，EI电离源 70 eV，离子源温度200℃，加速电压200 eV，扫描质量范围 m/z 35～650。对总离子流图中各峰经质谱扫描后得到质谱图，通过Xcalibur工作站NIST标准图库进行检索，确认各化合物;通过Xcalibur工作站数据处理系统，按峰面积归一化法计算各化合物在挥发油中的相对百分含量。

结果从两面针根的挥发油中检出34个化合物，GC－MS图见图1;鉴定了其中23个化合物的结构，占挥发油总量的95.12%，见表1。

图1 两面针根挥发油的GC－MS总离子流图

表1 两面针根挥发油化学成分及其含量

3 讨论

应用GC－MS联用法分析两面针根化学成分，结果表明其主要化学成分为萜类，其中荜澄茄烯醇相对含量高达49.96%，其次是亚麻油酸和油酸，含量分别为14.34%和10.16%。橙花叔醇有不寻常的鲜苹果香，可赋有趣的、持久的花香气味，有一定的协调性能和定香作用;亚麻油酸为人体必需脂肪酸，在降低血液胆固醇和血脂、预防心血管疾病、清除人体过氧化物、增强免疫力、预防糖尿病等方面有着十分重要的生理意义[6];油酸同样为人体所必需的不饱和脂肪酸，有多种生物活性，可以减少小鼠胰岛细胞CCKAR mRNA的表达以及降低胰岛素的分泌量[7]。文献[5]中，斯杷土烯醇[(－)－spathulenol]的含量最高，达 55.21% ，其次为异斯杷土烯醇(isospathulenol，6.35%)和异香树素环氧化物(isoaromadendrine epoxide，3.88%)。本研究报道的 SFE－CO2法萃取两面针根挥发油的主要成分与文献[5]的主要成分有别，可能是与产地、采收期、提取方法等因素有关。

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[3]徐 强，李朝旭，叶招明.氯化两面针碱对人骨肉瘤细胞的诱导凋亡作用及其机制[J].南方医科大学学报，2011，31(2):361－364.

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