顶空毛细管气相色谱法测定盐酸洛哌丁胺中残留溶剂

2012-01-30胡猛慎洪志玲黄剑英厦门市药品检验所福建厦门361012

药学实践杂志 2012年6期

胡猛慎，洪志玲，黄剑英(厦门市药品检验所，福建厦门361012)

盐酸洛哌丁胺(loperamide hydrochloride)，化学名为N，N-二甲基-α，α-二苯基-4-(对氯苯基)-4-羟基-1-哌啶丁酰胺盐酸盐，是一种抗腹泻药，有胶囊剂、颗粒剂等制剂，临床用于各种非感染性腹泻有很好疗效且副作用较低，是一种安全有效的口服止泻药［1］。由于该原料药在合成过程中使用到甲醇、异丙醇、甲基异丁酮等多种有机溶剂，曾有文献报道气相色谱法分析其中4种有机溶剂的残留［2］。本文采用顶空毛细管气相色谱法同时对盐酸洛哌丁胺中甲醇、异丙醇、正己烷、乙酸乙酯、四氢呋喃、氯仿、甲基异丁酮、甲苯、苯9种溶剂残留进行检测，结果表明方法简便准确。

1 仪器与试药

1.1 仪器岛津GC2010AF气相色谱仪(配有FID检测器);岛津色谱工作站;PE TurboMatrix40自动顶空进样器;Hitachi BEBICON空压机;SPH-300氢气发生器;AL-204-IC万分之一分析天平。

1.2 试药盐酸洛哌丁胺供试品(批号:10091011、10091012、10091013，由某药企提供);氮气为高纯氮;二甲亚砜(DMSO)、甲醇、异丙醇、正己烷、乙酸乙酯、四氢呋喃、氯仿、甲基异丁酮、甲苯、苯均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与顶空条件色谱柱:DB-624毛细管柱，规格30 m×0.32 mm×0.25 μm;载气:高纯氮;流速:2.0 ml/min;柱温:程序升温，初始温度35℃维持16 min，以每分钟5℃升温至50℃，维持2.5 min，再以每分钟40℃升温至120℃，维持3 min，再以每分钟40℃升温至200℃，维持1min;进样器温度为200℃;分流比1∶1;检测器为氢火焰离子化检测器(FID)，检测器温度为250℃，氢气40 ml/min，空气400 ml/min，尾吹30 ml/min。顶空瓶加热温度100℃，加热时间25 min，进样环110℃，传输线120℃，进样时间0.12 min。

2.2 对照品溶液的配制分别精密称取0.266 2 g三氯甲烷、0.011 0 g苯置100 ml量瓶中，用DMSO稀释至刻度;另分别精密称取0.027 2 g甲醇、0.051 3 g异丙醇、0.012 4 g正己烷、0.071 5 g乙酸乙酯、0.020 9 g四氢呋喃、0.010 3 g甲基异丁酮、0.011 3 g甲苯于100 ml量瓶，加入适量DMSO稀释，再精密移取前述100 ml量瓶中溶液2.0 ml至该量瓶中，以DMSO稀释至刻度，摇匀，作为残留溶剂对照储备液。精密移取对照储备液5.0 ml于50 ml量瓶中，用DMSO稀释至刻度，摇匀，精密量取5.0 ml，置顶空瓶中，密封，作为混合对照品溶液。

2.3 供试品溶液的配制精密称取盐酸洛哌丁胺样品0.5 g，置20 ml顶空瓶中，精密加入二甲亚砜5 ml，密封，作为供试品溶液。

2.4 专属性试验分别取DMSO和混合对照品溶液，按上述色谱条件进行顶空分析，结果见图1，表明溶剂DMSO中的少量杂质不干扰残留溶剂的分析，且各组分峰之间分离度符合规定，理论塔板数均大于5 000。

图1 空白溶剂(A)和混合照品溶液(B)气相色谱图1-甲醇(4.4 min);2-异丙醇(7.8 min);3-正己烷(10.9 min);4-乙酸乙酯(15.4 min);5-四氢呋喃(16.3 min); 6-三氯甲烷(16.7 min);7-苯(19.4 min);8-甲基异丁酮(24.8 min);9-甲苯(25.1 min);10-二甲亚砜(28.7 min)。

图2 供试品溶液气相色谱图1、4-溶剂峰(7.3 min，28.7 min);2-乙酸乙酯(15.4 min); 3-四氢呋喃(16.3 min)

2.5 线性关系分别精密移取2.2项下的残留溶剂对照储备液1.0、3.0、5.0、7.0、10.0 ml于50 ml量瓶中，用DMSO稀释至刻度，摇匀，作为1～5号浓度系列对照品溶液，各精密量取5.0 ml置顶空瓶中，密封，作为工作对照品溶液，在上述顶空气相色谱条件下分析，测定各溶剂的峰面积，以各溶剂峰面积Y对浓度X(μg/ml)绘制标准曲线，结果各组分在对应浓度范围内均呈良好线性，见表1。

表1 残留溶剂组分的线性方程与范围

2.6 精密度试验取混合对照品溶液按上述色谱条件平行进样6次，结果甲醇、异丙醇、正己烷、乙酸乙酯、四氢呋喃、三氯甲烷、苯、甲基异丁酮、甲苯峰面积的RSD分别为0.9%、0.8%、2.6%、0.8%、0.5%、2.5%、3.2%、0.8%、0.6%，均符合《中国药典》2010年版二部规定的残留溶剂外标法精密度试验的要求(RSD不大于10%)［3］，表明方法重现性良好。

2.7 回收率试验精密称取批号为10091013的供试品9份(其中含乙酸乙酯0.01%、四氢呋喃0.001%，未检出其他溶剂)置20 ml顶空瓶，每份0.5 g，分3组，每组3份，分别精密加入“2.5”线性项下的2、3、4号浓度对照品溶液5.0 ml，按上述色谱条件分析，计算各组分回收率，结果平均回收率(n=9)甲醇为96.0%(RSD=1.2%)、异丙醇为97.4%(RSD=0.8%)、正己烷为95.2%(RSD= 2.6%)、乙酸乙酯为99.4%(RSD=1.7%)、四氢呋喃为97.6%(RSD=1.8%)、三氯甲烷为96.2% (RSD=2.9%)、苯为102.3%(RSD=2.8%)、甲基异丁酮为98.5%(RSD=0.9%)、甲苯为95.9% (RSD=0.8%)。

2.8 检测限逐步稀释混合对照品溶液，按上述色谱条件进样，结果甲醇、异丙醇、正己烷、乙酸乙酯、四氢呋喃、三氯甲烷、苯、甲基异丁酮、甲苯的最低检测限(S/N=3)分别为0.326、0.616、0.007、0.086、0.0502、3.19、0.132、0.124、0.136 μg/ml。

2.9 样品测定取3批盐酸洛哌丁胺供试品按“2.3”项下制备供试品溶液进行顶空进样分析，结果见表2。