心复康口服液的药效学研究进展1）

2012-01-29胡元会刘瑞华吴华芹

中西医结合心脑血管病杂志 2012年8期

杜柏，胡元会，刘瑞华，吴华芹，高杨

通过建立多种动物模型探讨心复康口服液治疗充血性心力衰竭（心衰）的作用机制，现将有关的研究内容综述如下。

1 心复康口服液对心室重塑及心功能的影响

1.1 心复康口服液对急性缺血性心衰的影响马文礼等［1］采用冠状动脉结扎法制作心肌梗死模型，研究表明中药心复康口服液在明显减少左室舒张末期内径（LVEDD）和左室舒张末期容积（LVEDV）的同时，使急性心肌梗死（AMI）模型大鼠减小的左室射血分数（LVEF）、左室短轴缩短率（FS）值显著增加。心复康口服液口服液可以改善心室重塑大鼠的心功能，保护心脏结构重整；抑制心脏胶原纤维的增生［1］。胡元会等［2］采用冠脉结扎法制作心肌梗死模型，研究后认为心复康口服液能显著改善心肌梗死心衰大鼠的血流动力学状态，可使心肌梗死心衰大鼠心输出量（CO）增加，左室内压最大变化速率（±dp／dtmax）上升，说明心复康口服液能显著改善心肌梗死心衰大鼠的心脏收缩和舒张功能。

1.2 心复康口服液对慢性心衰的影响胡元会等［3］通过腹腔注射阿霉素复制心衰大鼠模型，研究认为心复康可使心衰大鼠心排血量（CO）增加，±dp／dtmax上升，证实心复康口服液对阿霉素心衰模型大鼠心功能有明确保护作用。

2 心复康口服液对大鼠心肌Ca2＋定位及Ca2＋－ATPase活性的影响［3，4］

Ca2＋稳态对维持心肌细胞正常的形态和功能是不可或缺的，在心肌细胞膜及线粒体膜、肌浆网膜等生物膜上存在转运Ca2＋的Ca－ATPase，线粒体和肌浆网等细胞内Ca2＋贮库可调节细胞内Ca2＋在一定范围，若过多的Ca2＋进入细胞或Ca－ATPase活性降低可使上述调节失常，导致Ca2＋超载，从而损伤细胞结构和功能。Ca－ATPase具有主动转运Ca2＋的作用，是调节心肌细胞内Ca2＋稳态的主要酶之一，通过腹腔注射阿霉素复制大鼠心衰模型，证实ADR模型组心肌细胞Ca－ATPase反应较弱，沉淀物多在肌膜和线粒体膜上，提示由于细胞生物膜上Ca－ATPase活性降低，以至进入细胞内过多的Ca2＋不能被及时转运出细胞或转进Ca2＋内贮库，从而使细胞内Ca2＋超负荷，导致心肌细胞变性、坏死。而心复康治疗组心肌细胞Ca－ATPase反应较正常对照组、ADR组增强，反应物广泛分布于肌纤维膜、线粒体膜及肌浆网膜各处，说明药物可通过增强细胞膜上Ca2＋泵活性，将进入细胞内的Ca2＋移出，防止Ca2＋超负荷，同时，线粒体和肌浆网膜上Ca2＋泵活性增强，将部分Ca2＋移入内贮库，推测该药改善心功能的机制可能是在Ca2＋超负荷时减少胞浆内Ca2＋浓度，并在心肌收缩时由内贮库释放出一定的Ca2＋以满足心肌收缩所需。提示心复康口服液有显著改善阿霉素心衰模型大鼠的心脏收缩和舒张功能的作用，可能与通过提高Ca－ATPase活性、促进Ca2＋转运、防止心肌细胞Ca2＋超载有关。

3 心复康口服液对心肌的保护作用及可能的作用机制

3.1 心复康口服液对阿霉素亚急性心肌毒性的防治作用胡元会等［5］通过腹腔注射阿霉素复制亚急性心肌损伤大鼠模型，以心肌超微结构及心肌组织中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px）活性、丙二醛（MDA）含量为观察指标。结果阿霉素模型组GSHPx活性和MDA含量分别为（51.59±2.721）U／（min·mg）和（0.66±0.468）nmol／（mg·pr），与正常对照组比较有统计学意义（P＜0.01）；心复康组GSH－Px活性和 MDA含量分别为（64.77±5.112）U／（min·mg）和（0.326±0.241）nmol／（mg·pr），与模型组比较有统计学意义（P＜0.01），接近正常对照组。同时电镜观察发现，阿霉素模型组心肌细胞的超微结构有严重损伤，硝酸镧标记可见镧颗粒进入细胞内，在细胞内有大量电子致密的镧颗粒，线粒体外膜周围亦有致密的镧颗粒沉积，坏死的肌原纤维之间亦有少量散在的镧颗粒沉积。心复康治疗组心肌细胞超微结构损伤较轻，细胞间隙和外膜可见镧沉积的电子致密颗粒，线粒体、肌丝之间有少量的镧颗粒沉积。结果显示ADR模型组心肌细胞超微结构损伤严重，膜通透性亦发生明显改变。心复康治疗组心肌细胞超微结构损伤较轻，膜通透性改变不明显。心复康口服液具有抗氧自由基作用和保护心肌细胞超微结构及膜通透性的作用。提示这种心肌保护作用的机制可能与心复康口服液增强心肌细胞对半醌式自由基的清除能力有密切关系。3.2 心复康口服液对注射去甲肾上腺素兔心肌损伤的保护作用及可能的机制通过注射去甲肾上腺素复制兔心肌损伤模型，何建成等［6］用透射电镜观察发现心复康口服液对心肌细胞超微结构有明确的保护作用，可改善去甲肾上腺素心肌病心肌微循环，防治心肌内毛细血管内皮受损，保护心肌细胞超微结构免受损伤。曹雪滨等［7］应用半定量计算心肌坏死面积证实其可以减轻心肌组织损伤程度，并且可以防止钙离子过度内流，证实心复康口服液对兔实验性心肌损伤有明确保护作用。琥珀酸脱氢酶（SDH）为心肌细胞线粒体能量代谢的关键酶，反应心肌细胞能量代谢的水平［8］。曹雪滨等［9］应用电镜细胞化学方法结合图像分析研究表明，心复康口服液可以明显提高去甲肾上腺素性损伤的心肌细胞线粒体SDH活性，证实心复康口服液对心肌细胞能量代谢具有一定的保护作用。并应用电镜硝酸镧电子示踪技术证实，对心肌细胞膜通透性的保护可能为心复康口服液对心肌细胞的超微结构保护作用的重要机制之一。

4 心复康口服液对心肌能量代谢产物及相关调节酶基因和蛋白的表达的影响

4.1 心复康口服液对心肌能量代谢产物的影响心肌能量代谢障碍是心肌细胞损伤的始动环节，是引起和促进心力衰竭发生、发展的重要因素。王艳飞等［10］通过建立腹主动脉部分缩窄致压力超负荷大鼠模型，用高效液相法（HPLC）测定心肌高能磷酸盐的浓度，通过透射电镜观察大鼠心肌线粒体的形态，观察大鼠第6周、第8周心功能的指标及心肌高能磷酸盐［三磷酸腺苷（ATP）、二磷酸腺苷（ADP）、一磷酸腺苷（AMP）、腺嘌呤核苷酸总量（TAN）及能荷（EC）］的含量。治疗组与模型组相比，大鼠心功能指标及ATP、ADP、AMP、TAN的含量均明显改善（P＜0.01）。治疗组大鼠心功能指标及 ATP、ADP、AMP、TAN的含量在8周时明显高于6周时（P＜0.05）；治疗组大鼠心肌线粒体的受损程度较模型组轻。证实心复康口服液能明显改善慢性压力超负荷大鼠心肌能量代谢和心脏功能，并对心肌线粒体起到保护作用。

乳酸（lactate，LAC）是能量代谢的低能通路，是细胞能量代谢缺乏的指标。心肌能量代谢发生障碍时，脂肪酸氧化利用减少，葡萄糖氧化利用增加。由于糖酵解作为乳酸产生的主要途径，葡萄糖氧化利用增加势必会引起机体乳酸的增加。徐淑乐等［11］运用1H－MRS对腹主动脉部分缩窄致压力超负荷模型大鼠心肌组织乳酸进行检测，结果显示6周、12周时模型组大鼠心肌乳酸水平较同期假手术组、心复康组显著升高（P＜0.01）。同组间比较，模型组大鼠心肌乳酸水平6周、12周时均呈明显升高趋势（P＜0.01）。可见，模型组大鼠心肌能量代谢障碍持续存在，并随着时间的延长呈进一步加重趋势。心复康组大鼠心肌乳酸水平，12周时较6周时显著降低（P＜0.01），进而说明心复康对于大鼠心肌能量代谢障碍具有非常明显的改善作用。

徐淑乐等［12］运用1H－MRS对腹主动脉部分缩窄致压力超负荷模型大鼠心肌组织肌酸、牛磺酸水平进行检测，结果显示6周、12周时，模型组大鼠心肌肌酸、牛磺酸水平均低于同期假手术组、心复康组（P＜0.01）。同组间比较：模型组大鼠心肌肌酸、牛磺酸水平，12周时较6周时显著降低（P＜0.01）；心复康组大鼠心肌肌酸、牛磺酸水平，12周时较6周呈显著升高趋势（P＜0.01）。说明心复康对于大鼠心肌能量代谢障碍具有非常改善作用，而且随时间延长，其中药心复康对心肌能量代谢的改善作用则进一步凸显。

4.2 心复康口服液对心肌能量代谢相关调节酶基因和蛋白的表达的影响葡萄糖转运因1（GLUT1）是调节心肌细胞糖代谢的主要膜转运蛋白，心肌缺血时分布于细胞亚膜的GLUT1移向细胞质膜，从而促进心肌细胞的糖代谢。心肌缺血时不仅是心肌细胞GLUT1发生移位，而且GLUT1mRNA的表达亦可增强数倍。吴华芹等［13］研究发现，心复康口服液可增加结扎左冠状动脉前降支心肌梗死后心衰模型大鼠心肌组织中ATP含量，上调GLUT1基因的表达，有效改善心肌梗死后心衰大鼠心肌能量代谢，从而保护心功能。

徐淑乐等［14］通过检测腹主动脉部分缩窄致压力超负荷模型大鼠心肌线粒体ND4mRNA和蛋白的表达，发现模型组大鼠ND4mRNA的相对含量较同期假手术组明显降低（P＜0.01）；心复康组与假手术组比较ND4mRNA的含量显著升高（P＜0.01），ND4蛋白含量升高（P＜0.05），表明心衰大鼠心肌线粒体ND4mRNA和ND4蛋白含量降低，心复康口服液可上调大鼠心肌线粒体ND4mRNA的表达，增加心衰大鼠心肌线粒体中ND4蛋白含量，显著改善心衰大鼠心肌能量生成障碍。

王巍伟等［15］观察心复康口服液对压力负荷性心衰大鼠心肌细胞线粒体呼吸酶复合物活性的影响，证实心复康口服液能够显著提高心衰大鼠心肌细胞线粒体呼吸酶复合物活性，尤以线粒体呼吸酶复合Ⅱ（SDH）、Ⅳ（CCO）为著，进而改善心肌细胞能量代谢障碍，对心肌能量代谢具有一定的保护作用。王红英等［16］采用腹主动脉部分缩窄法制作充血性心力衰竭（CHF）大鼠模型，研究结果显示，心复康口服液治疗6周、8周后的CHF大鼠心肌线粒体跨膜电位显著升高，同时大鼠心肌ATP、ADP、AMP和TAN水平均有升高，能量代谢障碍得到改善。证实心复康口服液可稳定线粒体膜电位，显著改善心衰大鼠能量代谢障碍。

7 心复康口服液对缓慢性心律失常的影响

程晓昱等［17］用甲状腺切除致缓慢性心律失常大鼠60只，心复康高、中剂量组能提高缓慢性心律失常大鼠的心率，改善房室传导，其疗效明显优于对照组（P＜0.05或P＜0.01）；可以提高血浆环磷酸腺苷含量，降低环磷酸鸟苷的含量。心复康可以有效提高缓慢性心律失常大鼠心率，其机制可能是通过对神经内分泌的调节来实现的。

综上所述，从多角度、系统的实验研究中，通过使用并建立不同动物模型，证实了具有益气温阳、活血化瘀功效的心复康口服液对各种心肌损伤及心力衰竭模型具有多方面的药理作用，为其临床用于治疗充血性心力衰竭提供了切实的证据。

［1］马文礼，郭茂娟，赵旭，等.心复康对心肌梗死大鼠心室重塑和功能的影响［J］.天津中医药杂志，2007，24（2）：135－137.

［2］胡元会，马铁民，陈双厚，等.心复康口服液对心肌梗死心衰大鼠心功能的影响［J］.中国中医基础医学杂志，2006，12（9）：680－681.

［3］胡元会，曹雪滨，陆文云，等.心复康口服液对阿霉素心衰模型大鼠心功能及心肌Ca－ATPase定位的影响［J］.陕西中医学院学报，2000，23（3）：38－39.

［4］胡元会，车维新，曹雪滨，等.心复康口服液对大鼠实验性心衰模型心肌细胞Ca－ATPase及琥珀酸酶活性的影响［J］.中医药学报，2000，15（2）：34－37.

［5］胡元会，曹雪滨，曹贵民，等.心复康口服液对实验心衰模型大鼠心肌组织自由基代谢和心肌膜通透性的影响［J］.中国中医基础医学杂志，2000，6（2）：16－19.

［6］何建成，王朝宏.心复康口服液对去甲肾上腺素心肌病超微结构的影响［J］.甘肃中医学院学报，1995，12（2）：44－46.

［7］曹雪滨，王朝宏，朱永成，等.心复康口服液对去甲肾上腺素损伤的保护作用［J］.中医药研究，1995，11（2）：60－61.

［8］曹雪滨，王朝宏，朱永成，等.心复康对去甲肾上腺素心肌损伤琥珀酸脱氢酶活性的影响［J］.天津中医，1994，11（6）：42－44.

［9］曹雪滨，王朝宏，李学荣，等.心复康对去甲肾上腺素心肌损伤超微结构及膜通透性的影响［J］.河北中医，1995，17（3）：20.

［10］王艳飞，曹雪滨，徐淑乐，等.心复康口服液对慢性压力超负荷大鼠心肌能量代谢的影响［J］.第三军医大学学报，2009，31（18）：1720－1723.

［11］徐淑乐，曹雪滨，张刚，等.心复康口服液对心衰大鼠心肌乳酸的影响［J］.中国中医基础医学杂志，2010，16（12）：113－115.