蜂王浆口腔崩解片的制备工艺研究

陈三宝，郭孟萍

(宜春学院化学与生物工程学院，江西宜春336000)

蜂王浆是工蜂咽腺分泌出的一种乳白色或淡黄色浆状物，味酸涩、辛辣、略甜，内含有极为丰富的营养物质及生物活性成分，能明显的提高人体免疫力，长期服用对心血管系统疾病及糖尿病等都有很好的防治作用［1］。现已上市的同类品种有胶囊剂、散剂及普通片剂，这些剂型对有吞咽困难或行动不便的老人来说具有一定的困难。为了方便不愿或不能吞咽或取水不便的患者服用，作者将其制成口腔崩解片。根据蜂王浆常温下难保存的特点，为了能最大限度地保留其中的生物活性成分，本研究采用冷冻干燥法制备口腔崩解片，通过加入辅料的方法来解决其容易吸潮的问题，使制剂不需在干燥空气中操作并易于保存和服用。

1 仪器与试药

1.1 仪器设备WD-B药物稳定性检查仪(天津市天大天发科技有限公司);FD-18S冷冻干燥机(北京德天佑科技发展有限公司);BT25S电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司);78X-2型片剂四用测定仪(上海黄海药检仪器有限公司);Aglient1100高效液相色谱配四元泵、紫外检测器((美国安捷伦公司);SK6200HP超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司)。

1.2 试药10-羟基-2-癸烯酸对照品(10-HAD，中国药品生物制品检定所，批号110812-200506);蜂王浆(江西汪氏蜜蜂园有限公司);聚乙二醇(PEG)4000(北京市海淀会友精细化工厂);阿斯巴甜(江苏汉光甜味剂有限公司);对羟基苯甲酸甲酯、无水乙醇、盐酸为分析纯，甲醇为色谱纯。

2 方法与结果

2.1 制备方法蜂王浆的生物活性成分对热敏感，要求－18℃冰冻保存。但为了存储、运输的方便，常常把它制成冻干粉或常规固体剂型使用。本试验选择冷冻干燥法将蜂王浆直接制成口腔崩解片，不但能减少常温下生物活性成分的损失，而且与其他剂型比较，缩短工艺流程，减少辅料用量。由于采用升华干燥，因此干燥后体积不变，疏松多孔，制得的片剂崩解快。其工艺过程:按试验处方配制蜂王浆液适量，分装于Φ18 mm PVC泡眼中(装量1.8 mL)，置入冷冻干燥机的冷阱预冻4 h，然后放在电加热搁板上，密闭，开启真空泵，待真空压力＜20 Pa时，加热升温，保持温度在物料共熔点10℃以下，以2℃/h升温进行升华，时间不少于20 h。再逐渐升温至35℃，升温时间控制在3～4 h左右。停机放气，破坏真空，产品塑封［2］。

2.2 崩解时间测定方法取76 mm×26 mm×1.2 mm标准载玻片2片，透明胶带黏合一端，打开载玻片，将1 cm×3 cm滤纸条置于载玻片黏合端1/3位置，长端约3 mm在载玻片外，药片置于滤纸上，合上载玻片，上片载玻片自然压在药片上，开口端张开约2 cm;用滴管在滤纸露出载玻片端逐滴加37℃蒸馏水，滴水量为每分钟1 mL，滤纸润湿，冻干片吸水崩塌，载玻片开口端闭合至2～3 mm，视为崩解终点［3］。

2.3 10 -HAD测定方法10-HAD按照文献方法进行测定［4］，取样品0.2 g，精密称定，置50 mL量瓶中，加0.03 mol/L盐酸溶液1 mL和水2 mL，立即振摇使溶散，加无水乙醇30mL，边加入边轻轻摇动，再精密加入内标溶液10 mL，并用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，立即置超声波浴中超声15 min，取出，在3 000 r/min下离心10 min。取上清液用微孔滤膜过滤，吸取样品溶液4 μL，注入色谱仪，按内标法计算含有量。

2.4 物料共熔点测定配制蜂王浆混悬液适量(含干物质30%，其中PEG4000质量分数为1%，阿斯巴甜质量分数为0.5%)，置于烧杯中，插入量程范围为－80℃～60℃的结晶点温度计和电极，先后置入冷冻干燥机的冷阱和电加热板上，预冻至－54℃，再缓慢升温。在温度变化过程中，通过数字万用表和温度计测温同步记录电阻和温度计的变化，绘出电阻温度曲线图(图略)。结果在－24℃时电阻急剧变化，故确定该混合物的低共熔点在－24℃。为避免产品熔化而形成喷瓶，选择－35℃以下为物料预冻温度，升华过程应维持产品温度不高于－30℃［5］。

2.5 辅料的选择蜂王浆含水分62.5%～70.0%，干物质30.0%～37.5%，其中蛋白质占36%～45%，含转化糖20%～45%，总脂类物质3.0%～6.0%，小分子物质(如维生素、矿物质、游离氨基酸)为2%～3%，此外还有一定量的未知物质［6］。经试验，未加辅料的蜂王浆冻干片成形较好，片形完整，硬度适当，说明其中蛋白质、糖类等冻干后形成了足够强度和弹性的骨架，因此可以不加骨架形成剂。但蜂王浆粉吸湿性强，加上冻干片具有高孔隙度，在通常情况下非常容易吸潮，吸湿后可引起物理化学性质的改变，不但给生产、存储和使用带来困难，还影响到制剂的有效性和安全性。因此要减少其吸湿性，就需要降低操作环境湿度或添加辅料。经试验，加入适量PEG4000能降低蜂王浆冻干片的吸湿性［7］。同时加入质量分数0.5%阿斯巴甜为甜味剂可改善口感。

2.6 临界相对湿度(CRH)的测定用蒸馏水溶解PEG4000，配成10%溶液，分别与蜂王浆混合，配制成固形物中PEG质量分数分别为0、0.5%、1%、3%、6%5种混合物，加阿斯巴甜0.5%，混匀，分装于PVC泡眼中，按2.1项的方法制备成冻干片，取出，精密称质量，分别置于WD-B药物稳定性检查仪中，设置温度为25℃，相对湿度分别设置为10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%，每隔24 h称量一次，直至冻干片吸湿平衡为止，按下式计算吸湿百分率。

式中，m1为吸湿前质量，m2为吸湿后质量。

以吸湿百分率为纵坐标，相对湿度为横坐标作图，得到不同比例PEG蜂王浆冻干片在不同湿度下的吸湿平衡曲线图，结果见图1。

由图1中各曲线的两端分别做切线，两切线交点的横坐标即为样品的CRH，结果见表1。

图1 蜂王浆与不同比例PEG混合物冻干片在不同湿度下的吸湿平衡曲线(25℃)

表1 蜂王浆与不同比例PEG混合物冻干片的CRH

2.7 物料含水量的优化物料中的水分经冷冻至－35℃以下结晶，然后水在高真空中升华，得到相似多孔结构的固体剂型。水分高，冻干后物料空隙大，但耗时且成本高。水分低，则冻干时间短，效率高。物料水分含有量不同对片剂质量会产生一定影响。用蒸馏水配制含不同水分的试样，按2.1项方法制备样品，测定崩解时间及硬度，结果见表2。

表2 不同水分原料对片剂产品质量的影响

2.8 工艺验证表1和表2的结果显示，试验号2为最优配方。按此处方，称取蜂王浆180 g，5%聚乙二醇4000溶液13 g、5%阿斯巴甜溶液7 g，混匀，按2.1项的方法制备成冻干片，物料预冻温度为－35℃～－54℃。连续试制3批，按要求进行检验，结果显示，崩解时间平均为7.5 s，硬度平均为79.3 N(n=6)。外观平整光滑，说明该制备工艺稳定。

2.9 加速试验稳定性考察取验证实验制备的样品用铝塑泡罩包装，外包铝塑袋，塑封，置于WD-B药物稳定性检查仪中，设置温度30℃，RH 60%，放置6个月，于0、1、2、3、6月取样，分别按稳定性考察项目及试验方法进行检验，对10-HAD含有量、水分、崩解时限和硬度等考察项目进行测定，结果见表3。

表3 加速试验考察结果

表3结果表明，经加速试验考察6个月，各项考察指标与0月比较均无明显变化，样品基本稳定，因此本品处方及工艺条件稳定可行。

3 讨论

3.1 由图1和表1可看出，当蜂王浆冻干片在RH＞23%时，其吸湿率大幅度增加，通过作图法得出其CRH为28%。实际制备时，环境湿度太低不但较难控制，且干燥的空气不利于人员的操作，产品吸潮性强，为此考虑加入辅料来改善CRH，通过比较，以加1%PEG的较适当，其CRH为52%，较易控制，制备过程中控制环境相对湿度小于45%时，能使产品水分含有量小于3%。

3.2 由表2可看出，物料的水分含有量对蜂王浆冻干片的崩解时限和硬度有一定的影响，未经稀释制备的冻干片崩解时限和硬度均符合要求，用水稀释后制备的冻干片虽然崩解时间更短，但硬度更小，密度低，单位体积承载的活性成分少，且更耗时、耗能。综合考虑，制备蜂王浆冻干片以不稀释为佳，加入辅料后含水率以小于70%为宜。

3.3 PEG作为一种药用合成高分子材料，易溶于水，化学稳定好，具有一定的表面活性，本实验结果显示，蜂王浆中加入适量PEG4000，能达到抗吸湿的作用，当质量分数小于1%时其CRH还不够理想，当质量分数大于1%时其CRH变化不大，且高湿度下高比例PEG吸湿更严重。至于其机理是否是通过PEG与蜂王浆中主要成分分子上的基团以氢键的形式结合达到抗吸湿的作用，有待进一步研究。

采用冻干法制备的蜂王浆口腔崩解片，易吸潮，若用常规的泡罩包装，会吸收空气中的水分而收缩变形，使表面黏，质软。因此，将泡罩封口后应考虑再用一层防潮密封材料(如铝塑袋)并真空包装，以确保存储期间的稳定性。

［1］林玉庆.蜂王浆冻干粉直接压片填充剂的选择［J］.中成药，2007，29(10):1531-1532.

［2］阚家忠，张德忠.蜂王浆冷冻干燥工艺［J］.食品机械，1990(3):26-28.

［3］董玲，吉春.冻干法制备口腔崩解片崩解检查方法研究［J］.北京中医药大学学报，2006，29(7):494-501.

［4］GB9697—2008:蜂王浆［S］.

［5］崔清亮，郭玉明，程正伟.冷冻干燥物料共晶点和共熔点的电阻法测量［J］.农业机械学报，2008，39(5):65-68.

［6］蔡柳.蜂王浆主要功效成分的贮藏稳定性研究［D］.长沙:湖南农业大学，2008.

［7］王振华，田军，孔秋玲，等.聚乙二醇影响葡萄糖吸湿性的初步研究［J］.中药新药与临床药理，2010，21(2):205-206.