两种乙型肝炎表面抗原检测方法的结果比较

候其华 田 丹

黑龙江省嫩江县人民医院检验科，黑龙江 嫩江 161400

目前，临床上常用的乙型肝炎病毒表面抗原 (HBsAg)的检测方法有酶联免疫吸附试验 (ELISA)、胶体金免疫层析 (GIA)法等。我们采用GIA法和ELISA法对155份血清标本进行HBsAg平行检测并比较了两法的测定结果，现报道如下。

1 材料和方法

1.1 待检标本 155份常规静脉血清标本，均来自我院住院患者，年龄25～61岁。

1.2 试剂 GIA法HBsAg检测试条，由杭州艾康生物技术有限公司提供;ELISA法HBsAg检测试剂盒，上海科华公司产品。所有试剂均经过卫生部生物制品检定所批批检，均在有效期内。

1.3 方法 ELISA法按照试剂说明书操作，设阴阳性对照及空白对照。GIA法采用高特异性的抗体抗原反应的免疫层析技术，试剂条含有预先固定于膜上测试区 (T)和质控区 (C)的抗体。测试时，将试剂条插入血清标本，在测试区 (T)内出现一条紫红色条带为阳性，没有出现紫红色条带为阴性，无论是阴性或阳性结果，在质控区 (C)内都会有一条紫红色条带，在20分钟内判定测试结果。

2 结果

ELISA法检测出HBsAg阳性69份，阴性86份。GIA法检测出HBsAg阳性63份，阴性92份;有6份ELISA法阳性结果标本胶体金法没有检出，两法结果总符合率96.1%。若以ELISA法结果作为真值，则GIA法的敏感性为92.0%，特异性为100%，准确率为96.1%。

3 讨论

准确检测HBsAg对于早期发现乙肝及其无症状携带者具有重要意义。ELISA法是检测HBsAg的常用方法，具有高度的敏感性和特异性，但操作程序较为繁琐，耗时长。GIA法检测HBs，用胶体金代替酶标记抗HBs，样品中HB-sAg与金一抗HBs结合后沿硝酸纤维素膜迁移，在包被有抗HBs处形成“抗HBs一HBsAg一金抗体”夹心物而出现紫红色线。此法集免疫反应与色谱层析之特点，使待测样品的HBsAg与吸水纤维上的金抗体HBs不断结合，形成HBsAg一金标抗体复合物，再由层析作用持续通过硝酸纤维素膜，与膜上固相抗HBs结合。因为所有样品均经过较窄的纤维素膜的持续性反应，实际上对被测的物质起到了浓缩作用，提高了敏感性。由于无须洗涤，大大减少了污染机会，且不需要仪器设备，易于操作，整个检测过程在20分钟内即可完成，能满足急诊检验的需要。我们采用GIA法和ELISA法对155份血清标本进行了平行检测并进行结果比较。GIA法出现6份假阴性结果，无假阳性结果，两法结果总符合率96.1%，说明 GIA法的敏感性低于ELISA法。笔者认为，造成GIA法出现假阴性结果的常见原因主要有:①试剂本身的灵敏度较低，导致漏检;②加样量不准确，导致反应不充分，影响结果判定;③实验温度过低，导致反应速度降低，在20分钟判定结果时弱阳性不能完全显示出来;④稀释液加法不正确。与ELISA比较，GIA检测HBsAg一般不出现假阳性，对抗原量过大的标本未发现有前带反应，表明GIA检测HBsAg具有高特异性［1]。GIA法能够检测血清和末梢全血，即采即测，既可单份操作，也可大批量检测，不需特殊仪器和设备，试剂稳定，无须洗涤，没有四甲基联苯胺等有害物质成分，不会污染环境;结果受外因影响较少，特异性高，敏感性较好，通常情况下，20分钟即可报告结果。GIA法除了适用于急需的快速诊断外，还可以在流行病学调查和健康人群体检中作为快速初筛普查手段。

总之，ELISA法具有高度的敏感性和特异性，但操作程序较为繁琐，耗时长;GIA法能够检测血清和末梢全血，既可单份操作，也可大批量检测，特异性高，出结果快，但敏感性低于ELISA法。两法测定HBsAg各具有优点及不足，应根据具体情况进行选择。

［1]陶义训.快速免疫结合试验在医学中的应用评估.中华医学杂志，2007，21(5):30-32.