3－氯－7－氨基去乙酰氧基头孢烷酸中残留溶剂气相色谱法分析

王三忠

甘肃省兰州市红古区窑街煤电集团有限公司总医院，甘肃 兰州 730000

3－氯－7－氨基去乙酰氧基头孢烷酸中残留溶剂气相色谱法分析

王三忠

甘肃省兰州市红古区窑街煤电集团有限公司总医院，甘肃 兰州 730000

目的:探讨气相色谱法测定3－氯－7－氨基去乙酰氧基头孢烷酸中残留溶剂的效果。方法:采取了气相色谱分析仪与氢火焰离子化测量仪与HP ChemStation软件进行分析，以30m×0.32mm、0.25μm的毛细管色谱柱进行分析，柱温度从70摄氏度开始，持续6分钟，之后以每分钟10摄氏度的速度加温，直至160摄氏度，保持1分钟。载体气体为纯度在99.99%以上的高纯度氮气，测定杂质含量。结果:样品测定液进样，外标法计算得丙酮残留量为0.0012%。因此7－ACCA样品中残留溶剂符合要求。讨论:气相色谱法能够有效测定3－氯－7－氨基去乙酰氧基头孢烷酸中杂质的含量，对于残留量控制具有极高的价值。

3－氯－7－氨基去乙酰氧基头孢烷酸;残留溶剂;气相色谱法

本文通过气相色谱分析法对7－ACCA中残留的溶剂进行检测，对结果进行分析。

1 资料与方法

1.1 仪器与试剂

本次研究采取了气相色谱分析仪与氢火焰离子化测量仪与HP ChemStation软件。研究中所有的水均为纯净水。7－ACCA药物由浙江砝码医药公司提供，其他残留溶剂甲醇、丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷、异丁醇、甲苯、吡啶、丁酮、二甲基甲酰胺、二甲亚砜均为分析纯。

1.2 检测方法

以30m×0.32mm、0.25μm的毛细管色谱柱进行分析，柱温度从70摄氏度开始，持续6分钟，之后以每分钟10摄氏度的速度加温，直至160摄氏度，保持1分钟。载体气体为纯度在99.99%以上的高纯度氮气，柱流速设置为每分钟1.0毫升，气化室温度为200摄氏度，检测器温度设置为250摄氏度，氢气流苏设置为每分钟40毫升，空气的流速为每分钟400毫升，尾吹气为氮气，流速为每分钟25毫升，分流比为10/1。进样方式为手动，进样体积为1μl。

1.3 溶液制备

1.3.1 定位溶液

溶液1～8:吸取方式保持足够的精密度，吸取630μl密度为0.79丙酮、380μl密度为0.79的甲醇、45μl密度为1.32的二氯甲烷、555μl密度为0.90的乙酸乙酯、620μl密度为0.81的异丁醇、20μl浓度为0.98的吡啶、内标400μl的丁酮、100μl密度为0.87的甲苯，分别将溶液放在100毫升的量瓶内，加水稀释，充分混合后获得100毫升溶液，1～8号定位溶液的质量浓度分别为每毫升5mg、3mg、0.6 mg、5 mg、5 mg、0.2 mg、0.32 mg、0.87 mg。

1.3.2 限量对照溶液

溶液1～7:吸取方式保持足够的精密度，吸取620μl丙酮、380μl甲醇、45μl二氯甲烷、555μl乙酸乙酯、620μl异丁醇、20μl吡啶、内标400μl的丁酮，分别将溶液放在100毫升的量瓶内，加水稀释，充分混合后获得100毫升溶液为对照溶液1～7。溶液8:吸取方式保持足够的精密度，吸取0.5ml甲苯注入50毫升量瓶，加DMF稀释摇匀后获得甲苯贮备液50毫升，精密吸取5毫升贮备液置入50毫升量瓶，加水稀释摇匀，获得对照溶液8。将对照溶液1～8精密吸取1毫升，置入1个10毫升量瓶，加水稀释获得10毫升限量对照溶液。

1.3.3 对照系列溶液

分别精密吸取 630μl丙酮、380μl甲醇、45μl二氯甲烷、555μl乙酸乙酯、620μl异丁醇、20μl吡啶、内标400μl丁酮、甲苯贮备溶液10 ml，置入1个10毫升量瓶，摇匀获得对照液5;取对照液5稀释5倍作为对照液4，取对照液4稀释2倍作为对照液3，取对照液3稀释l倍作为对照液2，取对照液2稀释1倍作为对照液l。

1.3.4 试样溶液

精密称取样品1g，置于10毫升量瓶，加水在超声冰浴10分钟后定容，以每分钟3000转进行离心处理3分钟，去上部清液。根据2010版中国药典附录第三法进行测定。

2 结果

取定位溶液分别进样测定，获得各有机溶剂的保留时间;然后，取限量对照溶液进行系统适用性试验。各组分色谱峰的理论板数均＞70000，分离度＞1.5，与内标丁酮的相对保留时间 (RRT)与中国药典 (2010)提供的参考值基本一致。逐步稀释对照品溶液，按上述方法测定，当信噪比为2时，测得检测结果。样品中各溶剂的检出量远低于中国药典规定量。样品测定液进样，外标法计算得丙酮残留量为0.0012%。因此，7－ACCA样品中残留溶剂符合要求。

3 讨论

3－氯－7－氨基去乙酰氧基头孢烷酸 (7－ACCA)是半合成头孢类抗生素的一种重要中间体。是医药工业合成头孢氨苄、头孢拉定、头孢克洛和头孢羟氨苄等药物不可缺少的中间体。而在合成过程中可能存在多种杂质的残留，在产品质量控制的过程中需要保证有机残留物的含量不超过标准。

由于生产过程中采用o—苯甘氨酸 (头孢羟氨苄采用o—羟基苯甘氨酸)和7—氨基去乙酰氧基头孢烷酸缩合的工艺，故成品中可能引入上述两种物质和其他杂质。《中国药典》用薄层色谱法控制其限量，由于这些杂质具o—氨基酸的性质，可用茚三酮作显色剂。测定p—内酰胺类抗生素药物含量测定的方法文献报道很多，主要为理化测定方法。本章以《中国药典》收载方法为主，讨论酸碱滴定法、碘量法、汞量法，紫外分光光度法及高效液相色谱法等。

［1］马丽，姚彤炜.气相色谱法测定3－氯－7－氨基去乙酰氧基头孢烷酸中残留溶剂［J］.浙江大学学报 (医学版)，2011，40(1):40－43.

［2］范毅颖，于海龙，崔振辉等.头孢唑肟钠残留溶剂的气相色谱法测定［J］.黑龙江医药，2007，20(2):105－106.

R284.1

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1007－8517(2012)05－0033－01

2012.01.26)