尘肺患者全肺灌洗液中骨桥蛋白水平测定的分析

蒋泽文，刘春云

(1、信丰县人民医院呼吸内科，江西 信丰 341600；2、赣州市第五人民医院呼吸内科，江西 赣州341000)

尘肺患者全肺灌洗液中骨桥蛋白水平测定的分析

蒋泽文1，刘春云2

(1、信丰县人民医院呼吸内科，江西 信丰 341600；2、赣州市第五人民医院呼吸内科，江西 赣州341000)

目的探讨各期尘肺患者全肺灌洗液中骨桥蛋白（OPN）水平及其在尘肺防治中的意义。方法选取尘肺全肺灌洗患者60例，采用ELISA法测定全肺灌洗液的OPN水平，另外20例具有相同接尘史但未确诊尘肺患者列为对照。结果尘肺Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期组的肺泡灌洗液OPN水平均显著高于对照组(P均<0.01)；Ⅰ、Ⅱ期组OPN水平低于Ⅲ期组(P<0.01)；Ⅱ期组高于Ⅰ期组(P均<0.05)均有统计学意义。结论OPN参与尘肺的发生发展过程,并且其水平可能与尘肺严重程度有关联。

尘肺；全肺灌洗；骨桥蛋白

尘肺病是由于在职业活动中，长期吸入生产性粉尘并在肺内潴留而引起的以肺组织弥漫性纤维化为主的全身性疾病。粉尘长期滞留在细支气管与肺泡内，使病人即使脱离粉尘作业场所，病变也会继续发展，其机制仍不清楚。国内外学者在探索其机理方面做了大量的研究，最近有研究发现骨桥蛋白(osteopontin，OPN)作为细胞因子参与了尘肺的发生发展。本文我们收集了60例尘肺患者和20例接尘者全肺灌洗液标本，并对他们OPN水平进行了检测和分析。

1 资料与方法

1.1 对象及分组 随机选取赣州市第五人民医院2011年3月至2012年3月住院治疗的尘肺患者60例,所有尘肺患者均经市级职业病防治研究所按照GBZ70)2009《尘肺病诊断标准》予以确诊并分期，其中Ⅰ期18例 ,Ⅱ期22例，Ⅲ期20例。同时20例具有相同接尘史但未确诊尘肺患者列为对照。所有研究对象均排除各种感染所致急、慢性炎症,系统性疾病包括肝肾功能不全、肿瘤、糖尿病、结缔组织病、炎性肠病、口服类固醇及激素替代治疗者。所选病例中在接尘史、年龄、性别构成上无显著性差异。

1.2 手术方法 全部病人均按肺灌洗常规进行，快速麻醉诱导，采用双腔支气管导管插管，静脉复合麻醉。插管成功，双肺分隔满意后，分别测左右肺气道压＜30cmH2O及各项指标正常时开始灌洗。一般一侧肺灌洗9～12次，灌洗量1000～1500ml/次，直至灌洗回收液澄清为止。

1.3 标本采集 收集全部灌洗回收液,混匀后取30 ml于塑料离心管中,1200r/min离心10 min,取上清液置于-20℃冰箱保存备用。

1.4 测定方法 采用ELISA法,测定药盒USCN LIFE SCIENCE＆TECHNOLOGY COMPANY提供;专人专机进行测量,操作按说明书进行。

1.5 统计学分析 结果处理采用SPSS13.0统计软件包进行处理,计量资料采用均数±标准差(±s)表示,计量资料组内及组间比较采用t检验及方差分析,计数资料比较用χ2检验。以P﹤0.05为差异有显著统计学意义。

2 结果

2.1 研究对象的一般情况 对照组及各期尘肺组一般资料比较,对照组与各期尘肺组接尘史、平均年龄及性别比如表所示。对照组及尘肺各期间常规资料比较均无明显差异,见表1。

2.2 尘肺组与对照组各指标比较 OPN尘肺组与对照组比较P＜0.01,有统计学意义，见表2。

2.3 各组灌洗液OPN水平的比较 尘肺Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期组的肺泡灌洗液OPN水平均显著高于对照组(P均<0.01)；Ⅰ、Ⅱ期组OPN水平低于Ⅲ期组 (P<0.01)；Ⅱ期组高于Ⅰ期组(P均<0.05)均有统计学意义,见表 3。

3 讨论

尘肺的基本病变是结节的形成和弥漫性间质纤维增生。在这一过程中，单核巨噬细胞、肺泡上皮细胞、内皮细胞、成纤维细胞、肌成纤维细胞等都可以分泌细胞因子、炎性介质等生物活性物质，从而促进成纤维细胞的迁移和增生以及间质胶原的增生[1]。在众多的细胞因子，骨桥蛋白作为一种机体反应性功能蛋白,参与纤维化的过程已经得到许多实验证实。OPN是一种分泌型糖基化磷蛋白，广泛存在于各种组织和体液中，具有多种生物学活性，整合素αvβ3是其主要受体。OPN主要参与细胞的增殖、分化、迁移及黏附。本次实验结果显示,尘肺患者肺泡灌洗液OPN水平均明显高于接尘人群,具有统计学意义。近年来研究发现，在呼吸系统，OPN在损伤上皮、肺泡与间质巨噬细胞、T细胞以及肺血管内皮呈现高表达[2]。在肺纤维化的过程中，活化的成纤维细胞可能是OPN主要来源之一[3]，反过来OPN作为一种多功能细胞因子和细胞外基质，能够协同多种炎症细胞分泌的细胞因子激活成纤维细胞，使OPN呈现高表达。OPN可上调成纤维细胞中金属蛋白酶1组织抑制剂(T1MP-1)和I型胶原蛋白表达，下调基质金属蛋白酶-1(MMP-1)的表达，从而导致细胞外基质(ECM)蓄积[4]，而细胞外基质蓄积是所有纤维化疾病的最大特征。

表1 4组一般临床资料比较(±s)

表1 4组一般临床资料比较(±s)

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表2 尘肺组与对照组各指标比较(±s)

表2 尘肺组与对照组各指标比较(±s)

注：与正常组比较◇P＜0.01。

例数 OPN水平(ng/ml)对照组尘肺组组别20 60 35.62±9.53 90.87±22.77◇

表3 各期尘肺组与对照组各指标比较(±s)

表3 各期尘肺组与对照组各指标比较(±s)

注：与对照组比较△P<0.01；与Ⅰ期尘肺比较＊P<0.01；与Ⅱ期尘肺比较 ＃P<0.05。

组别 例数 OPN(ng/ml)对照组Ⅰ期尘肺组Ⅱ期尘肺组Ⅲ期尘肺组20 18 22 20 35.62±9.53 65.41±12.01△96.01±13.46△＊108.13±17.95△＊＃

在对尘肺灌洗液OPN的检测中发现，尘肺Ⅱ期患者肺泡灌洗液中OPN水平高于Ⅰ期;差异有统计学意义。提示OPN水平随肺纤维化的出现分泌增加,且随疾病严重程度有升高趋势。Ⅰ期、Ⅱ期组OPN水平高于Ⅲ期组(P<0.01)，推测可能是尘肺Ⅰ期、Ⅱ期主要病变是弥漫性间质纤维增生，尘肺Ⅲ期主要病变是结节形成。

综上所述,本研究结果表明,OPN介导并参与尘肺的纤维化过程，且与疾病的严重程度有关联，可以作为一拮抗靶点，采取干预措施，可能改善尘肺患者的预后，延缓肺纤维化的发生。有关OPN在尘肺患者血清和灌洗液中水平有无相关有待进一步研究。

[1]金泰庭.职业卫生与职业医学 [M].北京：人民卫生出版社,2003.249.

[2]Berman J S，Berlin D，Li X，et a1.Altered bleomycin-induced lung fibrosis in osteopontin deficient mice[J].Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol，2004，286(6)：1311-1318.

[3]Serlin D M，Kuang P P，Subramanian M，et a1.Interleukin-1beta induces osteopontin expression in pulmonary fibroblasts[J].J Cell Biochem，2006，97(3)：519-529.

[4]张向峰，Foda Husaein D.骨桥蛋白在高氧所致急性肺损伤中的作用及机制的初步探讨 [J].中华结核和呼吸杂志，2006，29(6)：385-389.

R135.2，R446.19

B

1674-1129(2012)04-0367-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2012.04.020